尿激酶型纤溶酶原激活因子cDNA的克隆与原核表达

目的构建尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21中表达,为进一步研究uPA奠定基础。方法应用逆转录RT-PCR,从人肝细胞cDNA中扩增人尿激酶型纤溶酶原激活因子基因序列,与原核表达质粒pET32a重组,获得表达质粒uPA-pET32a。用氨苄青霉素平板筛选转化子,双酶切与DNA测序进行鉴定,用IPTG诱导表达,并用Western blotting进行鉴定。结果从肝细胞cDNA中扩增的uPA基因片段长1296bp,酶切及DNA测序证实uPA-pET32a重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为68900Mr,经Western blotting证实为目的蛋白。结论成功构建了重组原核表达质粒uPA-pET32a,并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期的相一致,为进一步的研究奠定了基础。     

多椎体压缩骨折的经皮穿刺椎体成形术治疗

目的 :探讨多椎体压缩骨折行经皮穿刺椎体成形术的方法、疗效及手术注意事项。方法 :采用单纯C型臂X线机监视引导 ,俯卧位或侧卧位 ,多椎体同时穿刺注射方法进行手术。本组 7例 (2 5个椎体 )年龄 6 0～ 79岁 ,男 2例 ,女 5例。每例患者骨折椎体数 3～ 9个 ,PVP手术椎体数 3～ 6个 ,骨折压缩程度 2 5 %～ 80 %。手术前及术后 2天和术后 4月时分别进行活动能力、止痛药使用情况及疼痛强度视觉类比评分 (VAS)。结果 :俯卧位手术 2例 ,侧卧位手术 5例 ,手术时间 2 .0～ 4 .5h ,单侧注射 16个椎体 ,双侧注射 9个椎体 ,单椎体骨水泥注射量 0 .5～ 4 .0ml。 7例止痛药使用评分 ,术后比术前降低 (T =0 ,P<0 .0 1) ,4例术后完全不用止痛药 ,随访时仍保持该水平。活动能力评分在术后 2天比术前增加 (T =0 ,P <0 .0 1) ,术后 4月进一步改善。疼痛强度VAS在术后 2天时比术前下降 2 .1～ 6 .4 ,平均 5 .1,自身前后比较有极显著性差异 (t=7.4 ,P <0 .0 0 0 5 ) ,随访时仍维持术后水平。结论 :多椎体压缩骨折采用PVP治疗有效 ,单纯透视引导下侧卧位多椎体同时穿刺注射是较好方法。     

透明质酸钠治疗膝骨性关节炎的临床观察

1999年 6月～ 2 0 0 1年 2月 ,我院采用关节腔内注射透明质酸钠治疗膝骨性关节炎 (osteoarthritis,OA) 4 0例 ,经8～ 12周随访 ,效果满意 ,报告如下。1　临床资料1.1　一般资料本组 40例 ,男 15例 ,女 2 5例。年龄 40～ 76岁 ,平均 5 6岁。双膝 5例 ,单膝 35例 ,X线片均证实为膝 OA。本组均采用透明质酸钠注射液 (山东正大福瑞达制药有限公司生产 ) ,在无菌操作下行膝关节腔内注射 ,每次 2 ml。注射后用消毒敷料贴盖注射处 ,每周 1次 ,共 5周。1.2　临床观察指标临床观察指标包括疼痛、压痛、肿胀及膝关节功能 ,其记分标准见附表。　　疗…     

糖尿病患者出现低血糖的病因分析与对应措施

糖尿病 (DM),目前仍采用： (1)饮食疗法; (2)运动疗法; (3)血糖监测; (4)药物治疗; (5)糖尿病教育等 5个方面来维持血糖浓度的正常水平 (3.9～ 6.1mmol/L)。低血糖发作时,可出现一系列交感神经兴奋和中枢神经系统功能 紊乱的症状,严重者可出现昏迷,持续严重的低血糖将导致不可逆的脑损害,甚至死亡。因此,出现低血糖时必须紧急处理,以免造成不良后果。本文就 DM患者出现低血糖的几种因素与对应措施浅析如下： 1 发生低血糖的常见因素 (1)不合理的饮食摄取。患者缺乏糖尿病方面的知识教育,思想负担过重,饮食量控制严格,每日进…     

应用圆形分布研究流行性出血热人群发病与褐家鼠带病毒率的关系

家鼠型流行性出血热(EHF)的流行与家鼠带病毒率的消长呈季节性、周期性波动。通过圆形方法处理后,EHF的发病高峰在3月29日;家鼠带病毒率高峰在3月8日,比EHF发病高峰提前3周。80%EHF病例发生在1月17日至6月12日;80%带病毒鼠分布在前一年的11月25日至当年6月22日,且鼠带病毒率的80%分布范围亦比EHF发病率范围提前1个月。从高峰日期和分布情况显示,褐家鼠带病毒率高低是EHF发病季节高峰形成的主要因素之一。     

肾综合症出血热误诊2例

1 病例摘要例1,男,40岁。于1992年11月25日腹痛、发热、咳嗽,用药无效,3d后又出现呕吐、腹泻住某医院。治疗后诊断不清来本院以急性“胆囊炎”收入外科。该患来自疫区,有流行病学史。入院后查体:T38.2℃,P92次/min,BP19.9/1.2KPa,神志清楚,表情痛苦,心肺无明显变化,有腹触痛。2次便检有脓细胞,又因茵痢转入传染科。经查体发现腋下有线状出血点,针刺部位有出血瘀斑,呕咖啡样物,伴有腰痛,     

2015年某院临床分离的病原菌的分布及耐药性分析

目的：分析2015年广东省中医院临床分离的病原菌的分布及其耐药谱,为临床抗菌药物的使用和医院感染的监控提供依据。方法总结分析2015年临床分离的病原菌的分布及耐药情况,并采用K‐B纸片扩散法对主要的病原菌进行耐药性分析,数据统计采用SPSS19．0软件进行统计分析。结果2015年共分离3558株病原菌,其中革兰阴性杆菌检出2617株,占73．6％;革兰阳性球菌检出941株,占26．4％。病原菌检出率高的病原菌前10位依序是大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌。革兰阴性杆菌对厄他培南、阿米卡星和哌拉西林／他唑巴坦的耐药性较低,而鲍曼不动杆菌的耐药率普遍较高;革兰阳性球菌则对头孢曲松、头孢呋辛钠、青霉素G和克林霉素的耐药性较高,未发现对万古霉素、利奈唑胺、替加环素耐药的金黄色葡萄球菌和粪肠球菌。结论病原菌的分布及其耐药谱分析的结果对医院感染的监控和对指导临床改变抗菌药物的使用习惯以降低细菌的耐药性都有着积极的意义。     

惰性分离胶管保存标本对钾、钠、氯检测结果的影响

目的:研究惰性分离胶管采集和保存钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)标本的可行性.方法:随机选择患者标本40例,采用惰性分离胶管和干燥管(无抗凝)采集同一患者血液标本,待血液凝固后立即离心,各取出150μL血清到Eppendorf管(简称Ep管)冷冻保存;再分别于2,4,6,8,24h后从惰性分离胶管中取出150μL血清到Ep管中冷冻保存,检测并比较上述血清的K+、Na+、Cl-浓度.结果:惰性分离胶管和干燥管离心后0hK+、Na+、Cl-结果差异无统计学意义(P>0.05),惰性分离胶管的2,4,6,8,24hK+、Na+、Cl-检测结果与0hK+、Na+、Cl-检测结果差异也无统计学意义(P>0.05).结论:使用惰性分离胶管不会影响K+、Na+、Cl-的检测结果,且可以防止K+、Na+、Cl-浓度的改变,能有效保存这些标本.     

血清乙肝病毒外膜大蛋白检测在乙肝诊断治疗中的应用

目的通过检测乙肝病毒患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白（HBV—LP）、HBV—DNA、乙肝前Sl蛋白（PreSlAg）以及乙肝两对半（HBVM）,探讨HBV—LP与HBV—DNA、HBeAg、PreSlAg的关系及其在临床诊断、治疗中的应用价值。方法共检测174例乙肝病毒患者血清标本,HBV—LP、PreSlAg以及HBVM采用ELISA法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HRV—DNA。结果在乙肝病毒感染者血清中,HBV—LP、HBV—DNA和PreSlAg的阳性率分别为83．3％、78．2％和65．5％,前两者与后者比较有统计学意义（P〈0．05）;随HBV—DNA拷贝数的增加,HBV—LP与PreSlAg的阳性率随着增加,同时HBV—LP吸光度OD值也随着增加。对HBeAg阴性的血清,HBV—LP的阳性率（79．1％）明显高于IreSlAg的阳性率（65．6％）（P〈0．05）。结论HBV—LP与HBV—DNA有良好的正相关性,HBV—LP与HBV—DNA的符合率高于PreSlAg,HBV—LP检测可以作为反映乙肝患者病毒复制的血清免疫学指标,也可作为判断HBV感染者体内病毒复制程度的可靠指标。