大鼠烫伤致肠道免疫屏障损伤与血浆内毒素变化的关系

目的探讨导致烧伤后血浆内毒素水平升高和肠源性脓毒症的肠道免疫学因素．方法采用４０％体表面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ度烫伤大鼠模型（ｎ＝４０），对肠道内ＩｇＡ含量、肠道细菌ＩｇＡ包被率和血浆内毒素的变化进行动态观察．结果伤后血浆内毒素水平（ｋＥＵ／Ｌ）明显升高，伤后３ｄ达０１１３±００３９，（对照组，ｎ＝１０，００８３±０００７，Ｐ＜００５）；肠内容物中ＩｇＡ含量（μｇ／ｇ）逐渐下降，伤后１ｄ，３ｄ均明显降低，其中３ｄ达３４１５±４０２（对照组为５６２９±１７２０，Ｐ＜００１），为最低点；而后逐渐回升，至伤后１０ｄ已接近对照组水平．烫伤后各时相点肠道细菌的ＩｇＡ包被率均明显降低，伤后３ｄ降至４４３％±６５％（对照组为６３９％±６５％，Ｐ＜００１）．结论烧伤后肠道内ＩｇＡ含量与功能的异常可能是导致内毒素血症和肠源性脓毒症的重要原因之一．     

金黄色葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体对烫伤脓毒症大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)肠毒素B(SEB)单克隆抗体(单抗)对烫伤脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用。方法雄性Wistar大鼠56只随机分为正常对照组(n=10)、烫伤对照组(n=10)、烫伤后金葡菌感染组(n=20)和SEB单克隆抗体(单抗)拮抗组(n=16)。测定肺组织SEB水平、髓过氧化物酶(MPO)活性、肿瘤坏死因子(TNF)-α和干扰素(IFN)-γ表达的改变。结果烫伤后金葡菌脓毒症动物肺脏SEB含量明显升高,伤后2、6h分别为66.85ng/g组织和92.46ng/g组织,与正常对照组(14.26ng/g组织)和烫伤对照组(17.32ng/g组织)相比均为P＜0.01;同时,肺组织MPO活性显著增强,峰值可达7.39U/g组织,与正常对照组(2.09U/g组织)相比P＜0.05。与之相应,肺组织MPO活性显著增强(P<0.05)。同时,局部组织IFN-γ和TNF-α基因及其蛋白质表达明显上调(P<0.05),并与肺脏SEB含量呈高度正相关(分别为r=0.9207、P=0.0033和r=0.8142、P=0.0258)。SEB单抗早期干预可有效降低肺组织中SEB含量,并显著抑制IFN-γ和TNF-α的产生,肺脏病理改变亦明显减轻。结论SEB单抗干预可抑制IFN-γ和TNF-α等炎症介质的产生,从而显著减轻烫伤后金葡菌对机体的损害。     

腹腔严重感染时使用不同抗生素对内毒素释放的影响

目的：探讨腹腔感染时使用抗生素对内毒素释放的影响及其意义。方法：采用盲肠结扎穿孔法造成大鼠腹腔感染，分别给予泰能，复达欣，庆大霉素或不予治疗，动态观察血浆内毒素，肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素－6（IL－6）变化，统计72h死亡率，结果：内毒素水平，庆大霉素组高于不治疗组（P＜0．01），泰能组和复达欣组则低于不治疗组（P＜0．01），但两者差异无显著性（P＞0．05）。TNF和IL－6的变化趋势，治疗组好于不治疗组，泰能组，复达欣组，庆大霉素组和不治疗组的死亡率分别为20．0％，10．0％，50．0％和71．4％，前两组低于不治疗组（P＜0．05）。结论：用泰能，复达欣治疗后，内毒素水平低于而不是高于庆大霉素组和不治疗组，病死率也降低，反映了有效抗生素治疗的综合效应。     

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目的　探讨腹部外科手术病人全血细菌DNA检测结果与血细菌培养、术后全身炎症反应综合征(SIRS)及感染的关系。方法　将 2 0 0 3年 5～ 10月收治的 6 3例腹部外科病人分为 :胃肠手术组和非胃肠手术组 ;大手术组和中等手术组 ;术后发生SIRS组和未发生SIRS组。术前和术后 2h、2 4h、4 8h采集外周血 ,利用聚合酶链反应 (PCR)技术进行细菌DNA检测。结果　术前PCR均为阴性 ,术后共有 12例PCR阳性。术后 2h、2 4h和4 8hPCR阳性率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。胃肠和非胃肠手术组PCR阳性率分别为 2 0 .6 %和 17.2 %(P >0 0 5 )。大手术组和中手术组PCR阳性率分别为 36 .0 %和 7.9% (P <0 .0 1)。术后出现SIRS的病人PCR阳性率为 4 1.7% ,高于无SIRS组的 5 .1% (P <0 .0 1)。PCR阳性组SIRS发生率为 83.3% ,阴性组为 2 7.5 %(P <0 0 1)。PCR阳性者 6 6 6 7%发生感染并发症 ,阴性者无一发生 (P <0 .0 1)。术后血细菌培养阳性率 4 .8% ,显著低于PCR的 19.0 % (P <0 .0 1) ;培养阳性者 ,PCR均呈阳性。PCR阳性结果中大肠杆菌DNA阳性占6 6 7%。结论　腹部外科术后早期 (2h)即可发生肠道细菌易位 (BT) ,以大肠杆菌为主。BT与手术时间长 (>3h)和 (或 )失血量大 (>5 0 0mL)有关 ,而与是否胃肠手术无关。术后SIRS和感染并     

内毒素及其增敏系统在烫伤后金葡菌脓毒症中的改变及意义

利用大鼠20％体表面积Ⅲ度烫伤复合金葡菌攻击致脓毒症模型，探讨内毒素及其增敏系统－脂多糖结合蛋白（LBP）和脂多糖受体CD14在G＋菌脓毒症中的变化规律及其与机体过度炎症反应的关系。70只Wistar大鼠随机分为正常对照组（10只），烫伤对照组（10只）和烫伤脓毒症组（50只），检测动物心，肝，肺，肾等组织中LBP，CD14和TNF－α mRNA表达的改变，同时测定组织和血浆内毒素水平，小肠组织二氨氧化酶（DAO）的活性及病理形态学改变，结果显示，烫伤合并金葡菌感染后动物小肠组织DAO活性显著降低，并且至感染后24h仍处于较低水平，同时血浆内毒素水平明显升高，于金葡菌攻击后2h达峰值（P＜0．05），6h则迅速恢复至正常范围，心，肝，肺，肾等组织中LBP，CD14和TNF－α，mRNA表达广泛上调，至24h仍维持于较高水平，肝脏LBP mRNA与肝组织TNF－α基因表达的改变呈显著正相关，提示烫伤后金葡菌感染可导致肠源性内毒素移位和内毒素增敏系统LBP，CD14表达广泛上调，后者作为金葡菌致病因子和内毒素的共同受体对金葡菌脓毒症的发生，发展可能具有促进作用。     

乳腺癌雌激素受体与组织学的关系

任何激素的靶细胞均含有能与该种激素相结合的受体,甾类激素的受体是细胞浆中的一种特殊蛋白。某些乳腺癌在癌变过程中部分或全部保留雌激素受体,它的生长和功能受激素环境的影响。另一些乳癌缺乏雌激素受体,它的生长和功能不受激素环境的     

双单抗夹心ELISA方法检测血浆及组织中金黄色葡萄球菌肠毒素B

目的：建立一种敏感、快速的酶免疫测定谅，用于定量检测动物体液及组织中金黄色葡萄球菌（SAU）肠毒素B(SEB)。方法：采用生物素-链亲素系统放大的双抗体夹心酶联免疫吸附方法，以SEB单抗1D2为包被抗体、生物素标记的另一种SEB单抗2D1为标记抗体进行测定。结果：在0.078-10.000цg/L的浓度范围内，SEB标准品浓度与吸光度值线性关系良好，相关系数为r=0.9906，平均变异系数为5.32%；正常大鼠、家兔和人血浆中的平均回收率分别为96.43%、97.34%和19.99%，正常人尿液中平均回收率为91.53%。结论：本法灵敏度高、准确性好、稳定性强，而且简便、快速，适用于动物血浆及组织中微量SEB的定量测定，并有一定的临床应用前景。     

双单抗夹心ELISA方法检测血浆及组织中金葡菌肠毒素B

目的细菌学研究表明,可溶性外毒素的产生是革兰阳性菌(G+菌)感染的重要标志之一,在G+菌感染性疾病的发生、发展中具有重要意义.其中金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)肠毒素和中毒性休克毒素-1(TSST-1)因其"超抗原"特性,以及它们在脓毒症和中毒性休克综合征中的特殊意义而倍受关注.本文建立了一种敏感、快速的酶免疫测定方法,用于定量检测动物体液及组织中金葡菌肠毒素B(SEB).方法采用生物素-链亲素系统放大的双抗体夹心酶联免疫吸附方法,以SEB单抗1D2为包被抗体、生物素标记的另一种SEB单抗2D1为标记抗体进行测定.结果在0.039～10.000μg/L浓度范围内将SEB标准品进行倍比稀释,平行测定4次.当SEB标准品浓度为0.039μg/L时,测得的平均A值仍明显高于阴性对照(分别为0.193和0.108).若以样品A值/阴性对照A值大于2(P/N＞2)作为阳性判断标准,则最低检出限为0.078μg/L(A=0.220).在0.078～10.000μg/L的浓度范围内,SEB标准品浓度与吸光度值线性关系良好,相关系数为r=0.9906,平均变异系数为5.32%.为了考察方法的精确度,在标准曲线适用的范围内选择3个SEB浓度(10.000μg/L、5.000μg/L和2.500μg/L),每个浓度重复测定4次,变异系数分别为6.82%、5.25%、和3.90%,平均变异系数为5.32%.回收实验显示,正常大鼠、家兔和人血浆中的平均回收率分别为96.43%、97.34%和19.99%,正常人尿液中平均回收率为91.53%.上述结果表明该方法准确性较高,可用于定性及定量检测动物血浆及人尿液中的SEB.结论本法灵敏度高、准确性好、稳定性强,而且简便、快速,适用于动物血浆及组织中微量SEB的定量测定,并有一定的临床应用前景.     

进展期胃癌DNA含量与生物学特性和预后的关系

应用流式细胞术测定了５７例进展期胃癌细胞ＤＮＡ倍体及Ｓ期细胞比，并就ＤＮＡ倍体及Ｓ期细胞比，与病理学因素及预后的关系进行了分析。结果表明，非二倍体癌淋巴结转移阳性率明显高于二倍体癌（Ｐ＜０．０５）。Ｓ期细胞低比者多为Ⅱ期、淋巴结转移阴性、呈膨胀性生长和未侵及浆膜的癌（分别Ｐ＜０．０５）。ＤＮＡ倍体对病人术后５年生存率影响不明显（Ｐ＞０．０５）。低Ｓ期细胞比癌患者术后５年生存率明显优于高Ｓ期细胞比者（Ｐ＜０．０１）。Ｃｏｘ模型多因素分析表明，Ｓ期细胞比为最佳的预后因素。     

高迁移率族-1 蛋白在烫伤后金葡菌脓毒症中的改变与意义

目的 探讨高迁移率族－1（HMG－1）蛋白在烫伤后金黄色葡萄球菌（简称金葡菌)脓毒症中的变化规律及其调控机制。方法 采用大鼠20％体表面积Ⅲ度烫伤复合金葡菌攻击所致脓毒症模型。70只动物随机分为正常对照组（n=10）、烫伤对照组（n＝10）和烫伤后金葡菌感染组（n＝50）,留取肝、肺组织检测HMG－1及脂多糖结合蛋白（LBP）mRNA表达 ,同时测定组织中金葡菌肠毒素B（SEB）和内毒素含量。结果 烫伤后金葡菌感染可导致动物肝、肺组织HMG－1基因表达明显升高,于伤后6－12h达峰值（P＜0．05－0．01）,至24h仍持续于较高水平。相关分析显示,肝、肺组织LBP基因表达与相应脏器HMG－1mRNA表达呈显著正相关（分别为r＝0．800,P＝0．031和r＝0．942,P＝0．002）,但内毒素与之无明显相关性。结论 烫伤后金葡菌感染可导致动物体内HMG－1基因表达上调,后者作为“晚期炎症介质”可能参与了脓毒症的发病过程。