体外诱导人骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞

目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞.方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)及CCl4损伤的小鼠肝脏共培养等诱导方式,在不同时间点分别用RT-PCR和荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因的表达,免疫组织化学染色检测肝细胞标志. 结果: 在HGF和bFGF诱导第7天时甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin-18, CK18)和色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase,TDO)基因表达阳性,CK18和TDO的表达随诱导时间延长增高;第7天诱导细胞组织化学染色AFP、白蛋白(ALB)、肝细胞核因子(hepatocyte nuclear factor,HNF)、肝细胞特异性抗原(HSA)和CK18表达阳性.与损伤小鼠肝组织共培养21 d后细胞表达AFP和TDO.结论:HGF和bFGF联合诱导以及与CCl4损伤肝组织共培养的方法可体外促进人MSCs分化为肝细胞样细胞,可为肝脏疾病或肝损伤的干细胞治疗提供细胞来源.     

慢病毒转染人骨髓间质干细胞研究

目的:分离培养人骨髓来源间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行慢病毒载体介导的基因转染研究。方法:采取全骨髓贴壁培养法分离培养人骨髓MSCs。利用脂质体法进行慢病毒感染人骨髓MSCs。结果:分离培养出人骨髓来源的MSCs,并用携带绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的慢病毒成功感染人骨髓MSCs。结论:获得人骨髓MSCs并进行慢病毒载体介导的基因修饰,为间质干细胞基因工程和组织工程研究奠定了基础。     

胚胎骨髓间质干细胞抑制淋巴细胞增殖反应的初步研究

目的：研究骨髓问质于细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的免疫调节作用。方法：从胚胎股骨中分离培养间质干细胞,经克隆化分选出形态均一的细胞,用流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度。将分离培养的骨髓间质干细胞接种于96孔板,待其长满孔面积的80%～90％时用直线加速器以30GY剂量照射,然后与分离的外周血淋巴细胞共培养3d,以单独培养的淋巴细胞为对照,加入ConA刺激68h,MTT加入后继续温育4h,用酶标仪检测以观察MSCs对外周血淋巴细胞增殖反应的影响。结果：MSCs对外周血淋巴细胞的转化有明显抑制作用(抑制率为28％)。结论：MSCs具有抑制体外淋巴细胞增殖的作用。     

胚胎骨髓间质干细胞分离纯化及基本生物学特性

目的　分离纯化胚胎骨髓间质干细胞 (MSCs) ,研究其基本生物学特性。　方法　采用 1 0 73g LFicoll淋巴细胞分离液分离胚胎骨髓MSCs,体外扩增并观察生长特性 ,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达和细胞周期 ,染色体技术分析其遗传特性。　结果　胚胎骨髓MSCs培养 3d后呈针尖状的贴壁细胞 ,7～ 10d后细胞融合呈纤维状 ,体外扩增 10代可获得 1× 10 1 2 ～ 5× 10 1 2 个细胞 ;CD13、CD2 9、CD4 4、CD71表达阳性 ,CD3、CD14、CD33、CD34、CD38、CD4 5、HLA DR表达为阴性 ;染色体核型正常 ;G0 G1 期 :84 6 % ,G2 M期 :2 99% ,S期 :12 35 %。　结论　胚胎骨髓MSCs体外具有较好的增殖更新能力 ,在组织工程中可有广阔的应用前景。     

Q－开关红宝石激光治疗246例太田痣

目的 报道Ｑ－开关红宝石激光治疗太田痣的临床观察和病理变化。方法 根据患者不同的年龄,性别以及太田痣色素的浅,分别采用４－６Ｊ／ｃｍ６２不同的能量密度,用Ｑ－开关红宝石激光治疗太田痣患者２４６例。脉冲时间为４０ｎｓ,光斑直径为５ｍｍ或６．５ｍｍ。每次治疗后色素仍未消退者,间隔３－６个月再行下一次治疗。治疗前,后及皮肤表面恢复正常后,各取活组织标本一份行光镜和电镜检查。结果 Ｑ－开关红宝石激光治疗３     

上皮细胞间质样转化相关基因在胃癌组织中的表达及其相互关系

目的:研究上皮细胞间质样转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的相关基因在胃癌组织中的表达及相互关系.方法:用实时定量PCR方法检测23例胃癌患者癌及癌旁组织中介导EMT发生的转录因子 Slug、Twist以及E-钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达情况,并分析胃癌...     

人脐带间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞样细胞及ERK1/2通路活化研究

目的探讨人脐带间充质干细胞(hucMSC)体外诱导分化为肝细胞样细胞(HLC)的机制。方法用组织块贴壁培养法分离、纯化和扩增hucMSC,观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志;经肝细胞生长因子(HGF)/碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)/抑瘤素M(OSM)联合诱导后,用RT-PCR、免疫荧光法检测肝细胞和hucMSC中特异基因AFP、ALB、TDO、CK18和ABCG2、CD44、OCT4及ALP、AFP、CK18蛋白的表达;用western blot检测经诱导后的hucMSC中ERK1/2信号通路活化情况。结果流式细胞术结果表明,分离培养的hucMSC表达干细胞特异性标志CD13、CD29、CD44,不表达造血干细胞标志CD34、CD45和HLA-DR;RT-PCR结果表明,诱导后的hucMSC ALB、AFP、TDO、CK18基因表达增强,ABCG2、CD44、OCT4表达降低;免疫荧光结果表明,hucMSC可在体外诱导分化为具有肝系细胞表型细胞,其ALP、AFP、CK18蛋白表达增强;western blot结果表明诱导后hucMSC的ERK1/2磷酸化水平增加。结论 hucMSC可在体外诱导分化为HLC,其机制可能与ERK1/2磷酸化相关。     

miR-1调控胃癌细胞SGC-7901迁移能力的实验研究

目的探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。方法脂质体转染寡核苷酸片段NCmimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力,western blot检测转染后细胞上皮间质转化(EMT)指标。结果miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平(900.10±240.40)明显高于NC-mimics转染组(1.01±0.18),差异有统计学意义(t=6.48,P0.01)。miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平(0.65±0.04)明显低于NC-inhibitor转染组(1.01±0.14),差异具有统计学意义(t=4.19,P0.05)。miR-1-mimics转染组迁移细胞数量[(362±10)个]明显高于NC-mimics转染组[(112±10)个],差异有统计学意义(t=21.65,P0.01)。miR-1-inhibitor转染组迁移细胞数量[(64±8)个]明显低于NC-inhibitor转染组[(133±14)个],差异有统计学意义(t=17.07,P0.01)。与NC-mimics转染组比较,miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱(t=19.28,P0.01),神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强(t=5.43,P0.01;t=23.14,P0.01);与NC-inhibitor转染组比较,miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强(t=6.14,P0.01),N-cadherin和Vimentin表达减弱(t=6.78,P0.01;t=7.94,P0.01)。结论 miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移;miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移;miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力。     

1％联苯苄唑乳膏治疗浅部真菌病

最近,我科应用北京四环制药厂生产的孚琪（１%联苯苄唑）乳膏治疗６２例皮肤浅部真菌病,取得显著疗效,现报道如下。一、临床资料所有病例均为门诊患者,有典型的临床表现且经镜检证实,治疗前２周内未使用过全身或局部抗真菌药物。共６２例,其中男２９例,女３３例。年龄最小７个月,最大７０岁,平均（４１±１５．５）岁。病程最短５ｄ,最长１４年,平均１．２５年。６２例患者中体股癣２１例,手足癣３５例,皮肤念珠菌病６例。４４例作真菌培养,其中３６例获阳性结果,包括红色毛癣菌２７例、须癣毛癣菌１例、絮状表皮癣菌１例、羊毛状小孢子菌１…     

胃癌组织标本中lncRNA RN7SK的表达及其筛查价值

目的检测胃癌组织中长链非编码RNA(lnc RNA)RN7SK表达水平,并探讨其在临床筛查中的价值。方法 q RT-PCR检测lnc RNA RN7SK在胃癌细胞、胃癌组织中的表达水平;绘制ROC曲线,分析其用于筛查胃癌的效能。结果 lnc RNA RN7SK在人胃癌细胞系SGC-7901(3.91±0.53)、MGC-803(3.44±0.29)、HGC-27(4.04±0.87)和BGC-823(4.30±1.13)中的表达水平明显高于人胃粘膜上皮细胞系GES-1(1.02±0.27),差异具有统计学意义(t分别为12.33、7.48、7.20、4.90,P0.05)。lnc RNA RN7SK在55例胃癌组织中有47例(85.5%)表达上调,8例(14.5%)表达下降。lnc RNA RN7SK筛查胃癌患者的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.827,95%可信区间(CI)为0.746~0.907,当cut-off值为0.618时,敏感性为0.836,特异性为0.782。结论 lnc RNA RN7SK在胃癌组织中高表达,且具有较高的筛查效能,可作为潜在的胃癌诊断分子标志物。