GITR抗体介导增强NK细胞杀伤活性的实验研究

目的探讨糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关受体（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor family related receptor．GITR）抗体通过调节Treg细胞和NK细胞的功能对L615白血病细胞增殖的影响．了解NK细胞对白血病细胞的杀伤活性。方法通过不同的给药方式将L615白血病小鼠设立为4个实验组．提取实验分组后的小鼠脾脏中NK细胞作为效应细胞．以L615白血病细胞作为靶细胞．在体外观察了NK细胞的杀伤活性变化情况．并运用RT-PCR进一步观察了体现NK细胞杀伤活性的几个相关指标的变化。结果GITR抗体可以明显增强小鼠脾脏中NK细胞的杀伤活性．表现为同NK细胞活性密切相关的3个指标穿孔素（Perforin）、γ干扰素（IFN-γ）、Fas的表达量明显增加。结论GITR抗体能够通过Treg细胞的调节增强NK细胞的杀伤活性,进而有效的抑制L615自血病细胞。     

显微数码互动系统在临床基础检验学形态学教学中的作用

临床基础检验学是医学检验专业的专业课程,是综合应用化学、物理学、电子学以及生物化学、免疫学等学科的理论和实验方法,以手工操作或自动化分析等方式,着重对人体血液、尿液等标本进行感官检查、理学检查、化学检查、显微镜检查,     

浅议如何打造大学课堂的魅力

大学课堂时间紧、信息量大,如何才能达到"春风化雨,润物无声"的教学效果。教师应从打造自身的人格魅力、打造课件设计和课堂设计魅力入手以充分打造课堂的魅力。     

临床基础检验学实验教学改革探讨

《临床基础检验学》是检验医学的一个重要分支,是医学检验专业的主干课程之一,是通过综合应用化学、物理学、电子学以及生物化学、免疫学等学科的理论和实验方法,以手工操作或自动化分析等方式,着重对人体血液、尿液、粪便以及其他各种体液和分泌物进行感官检查、理学检查、化学检查、显微镜检查以及自动化仪器检查等。以获得有关病原体感染、机体病理变化和脏器功能状态等信息的一门实验应用科学。     

重庆两家三甲医院肺炎克雷伯菌菌毛变化分析

目的分析重庆两家三甲医院肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)菌毛变化及流行病学,以指导临床诊断及治疗。方法2007年7月至2008年7月共收集这两家医院检验科细菌室158株K.pneumoniae,用PCR方法和血凝实验/血凝抑制实验对其菌毛进行分型。结果145株K.pneumoniae产生Ⅲ型菌毛,7株产生Ⅰ型菌毛,其中2株两种菌毛都产生,还有6株不产生菌毛。结论这两家医院主要感染的是产生Ⅲ型菌毛的K.pneumoniae,而且主要是引起呼吸道感染,这对于临床寻求针对Ⅲ型菌毛K.pneumoniae感染的抗生素替代疗法具有指导意义。     

MLL在HOXA10表达调控中作用的实验研究

目的 通过研究在急性髓性白血病细胞中HOXA10表达调控机制,探讨HOXA10调控作为AML防治新靶点的可能性.方法 以不同剂量雌二醇(E2)在不同时间点刺激急性粒细胞白血病细胞株(HL-60),以不刺激的HL-60细胞作参照应用RT-PCR检测HOXA10基因表达活性的差异明确E2对HOXA10表达的活化作用,并在E2刺激下以反义寡核苷酸转染技术分别敲除ERα、ERβ和MLLs(MLLl-4)后再检测HOXA10 mRNA和蛋白表达的变化确定哪一种雌激素受体的活化与HOXA10的表达相关,哪一种MLL对HOXA10表达有调控作用.以ChIP实验检测MLL和HOXA10的相互作用,再以Western blot检测E2刺激前后组蛋白H3K4甲基化状态以明确MLL是否通过表观遗传学途径调控HOXA10的表达.结果 在E250 nmol/L 6 h刺激下HOXA10表达明显升高,ERα和ERβ反义寡核苷酸转染后HOXA10表达均有下降,MLL1表达沉默时HOXA10表达明显降低(P＜0.05),MLL1可以结合到HOXA10启动子上的ERE区域而组蛋白H3K4甲基化状态在E2刺激后明显高于刺激前(P＜0.05).结论 急性髓性白血病细胞的HOXA10基因表达受MLL1蛋白调控,可能为急性髓性白血病的致病机制分析提供了一个新的方向,MLL1介导的HOXA10表达的改变有可能成为急性髓性白血病的防治新靶点.     

细胞信号转导调控剂对严重烫伤小鼠T淋巴细胞分泌功能的影响及机制

目的观察不同信号转导调控剂对严重烫伤小鼠脾脏T淋巴细胞分泌白细胞介素(IL)2、IL-10功能的影响,并探讨其机制。方法分离正常小鼠及高压热蒸气烫伤小鼠(烧伤面积18％TBSA,Ⅲ度)伤后12、96 h的脾脏T淋巴细胞。分为正常对照组(不加T淋巴细胞活化相关信号转导分子调控剂)、调控剂组[正常细胞分别加入以下调控剂:膜蛋白激酶C(PKC)抑制剂H-7(50μmol／L,1 ml)、PKC激活剂佛波酯(TPA,30μmol／L,1 ml)、非受体型蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂Herbimycin(10μmol／L,1 ml)、丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)抑制剂PD098059(25μg／ml,1 ml)和Ca2 导入剂A23187(100 nmol/L,1 ml)]、烫伤组(不加调控剂)、烫伤 调控剂组(加入上述调控剂)。检测各组细胞IL-2、IL-10的分泌水平。结果伤后各组细胞中IL-2、IL-10含量均低于正常对照组(P<0．05或0．01);烫伤12 h H-7组、烫伤96 h H-7组分别低于烫伤12 h组和烫伤96 h组(P<0．01)。TPA能使IL-2、IL-10分泌明显升高,但对IL-2升高效能更显著。加入PD098059的各组IL-2、IL-10值均低于正常对照组(P<0．05或0．01)。Herbimycin能显著降低烫伤12 h Herbi- mycin组及烫伤96 h Herbimycin组IL-2的分泌,对IL-10亦有明显抑制。烫伤12 h A21387组中IL-2、IL-10含量为(2417±39)、(2793±25)pg／ml,烫伤96 h A21387组为(921±50)、(2633±35) pg／ml均明显高于烫伤12 h组[(1542±40)、(2390±15)pg／ml]和烫伤96 h组[(328±19)、(1618±21)pg／ml(P<0．05或0．01)]。结论PKC、Ca2 、MAPKK和PTK在严重烫伤小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL-2、IL-10的功能紊乱中起重要作用,其中PKC和PTK主要作用于IL-2的分泌而MAPKK影响IL-10的分泌。TPA和A21387均能显著提高烫伤后IL-2的分泌,并明显纠正伤后IL-2／IL-10分泌比值的失调。     

树突状细胞与移植免疫耐受的研究

目前认为，诱导对供者特异性免疫耐受，控制器官移植后的排斥反应，是最终克服异体(种)排斥的有效途径。起源于骨髓造血干细胞的树突状细胞(dendritic cell，DC)是激活特异性免疫反应的专职抗原递呈细胞(antigen-presenting cell，APC)，数量甚少，但分布广泛、迁徙力强，加之树突状所赋予     

凝炼内涵提升课堂引力

当今，全国各地高校纷纷掀起本科教学评估（简称本评）的热潮．而提高教师教学能力和教学效果是本评的核心内容。笔者就医学检验专业的教师如何凝练内涵，提升课堂引力，达到以评促教、提高教师的自身素质，提出以下建议。     

猪骨髓树突状细胞的体外扩增及鉴定

目的：建立体外大量扩增猪树突状细胞（Dendritic cells,DC）的方法，并进行形态学的免疫学性质鉴定。方法：制备猪骨髓细胞，分离单个核细胞，以猪重组GM－CSF诱导培养，2周后收集悬浮细胞，进行形态学观察和免疫细胞表面分子鉴定，以及功能检测。结果：体外培养富集的猪DC达70％－80％，具有典型的形态、表型及功能。结论：成功地建立了体外大量扩增猪骨髓DC的方法，为研究其在异种移植及诱导免疫耐受中的作用打下基础。