Construction of Eukaryotic Expression Plasmid of bFGF Gene in Rats and Its Expression in Tenocytes

The bFGF plays an important role in embryonic development of tendons and ligaments and in the healing of injuried tendons and ligaments. The eukaryotic expression plasmid of rat basic fibroblast growth factor (bFGF) gene was constructed in order to further investigate the bFGF func-tion in molecular regulatory mechanism in the repair of tendons and ligaments and to provide the foundation for the clinical application. The cDNA fragments of bFGF were cloned from the skin of rats by RT-PCR, and recombinated to the pMD18-T vector. The cDNA encoding bFGF was cloned from the pMD18-T vector by RT-PCR, digested with restriction enzyme EcoRⅠ, PstⅠ and bound to eukaryotic expression plasmid pIRES2-EGFP to construct eukaryotic expression plasmid pIRES2-EGFP-bFGF. The pIRES2-EGFP-bFGF was transfected into the tenocytes by lipid-mediated ransfection technique. MTT test was used to detect the biological activity of bFGF in supernatants after the transfection. The expression of type Ⅰ and Ⅲ collagen genes was detected by using RT-PCR. It was verified that the pIRES2-EGFP-bFGF was successfully constructed, and its transfec-tion into tenocytes could significantly enhance the biological activity of bFGF, and increase the ex-pression of type Ⅰ and Ⅲ collagen mRNA, suggesting that pIRES2-EGFP-mediated bFGF gene therapy was beneficial to the repair of tendons and ligaments.     

广东省电白县2002～2004年狂犬病流行病学分析

电白县是狂犬病的高发地区，每年均有病例发生。为进一步揭示狂犬病的流行规律，为更好地开展狂犬病控制工作提供参考依据，我们对电白县2002～2004年发生的狂犬病进行流行病学分析。现报告如下。     

Shwachman-Diamond综合征合并急性双系列白血病1例北大核心CSCD

报道1例急性双系列白血病,因化疗后血象难以恢复伴胰腺重度脂肪化,行基因检测诊断Shwachman-Diamond综合征。该病临床特征表现为骨髓功能衰竭,胰腺外分泌功能障碍,骨骼异常,恶性肿瘤转化风险,是一种累及多系统的罕见遗传病,需临床医生提高对该病的认识。     

K点刺激辅助痴呆患者置入胃管的应用研究

目的 研究K点刺激辅助置入胃管在痴呆患者中的应用效果。方法 选取神经内科收治的痴呆患者90例,将其随机分为对照组和观察组,对照组44例采用常规胃管置入法;观察组46例采用冰酸K点刺激辅助置胃管法,比较2组置管成功率、平均置管时间及不良反应发生率。结果 观察组一次性置管成功率明显高于对照组(χ²=45.970,P<0.001),平均置管时间及置管时患者的不良反应发生率均低于对照组(P＜0.05)。结论 冰酸K点刺激辅助置管法可以提高痴呆患者胃管置入的成功率和操作效率,减少不良反应。     

新型冠状病毒感染者脊柱外科急诊手术的围手术期管理专家共识

自2019年12月以来,已有200余个国家和地区相继报道了新型冠状病毒感染病例,世界卫生组织（WHO）于2020年3月12日宣布新型冠状病毒全球大流行,截至6月18日,全球已累计有824万余人感染,44万余人死亡,对全世界医疗、政治和经济领域影响巨大^［1-2］。WHO将其命名为“2019冠状病毒感染性疾病”（COVID-19）,病原体被命名为重症急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）^［3-6］。按照《中华人民共和国传染病防治法》,COVID-19被纳入乙类传染病,采取甲类传染病的预防控制措施^［7］。     

人神经元性AADC基因的克隆、测序及其对帕金森病的治疗作用

背景：帕金森病患者脑内黑质多巴胺能神经元变性导致芳香族氨基酸脱羧酶(aromatic L-amino acid decarboxylase，AADC)活性水平的降低及波动是产生帕金森患者临床症状和在L-dopa替代治疗时“症状波动”等不良反应出现的重要原因之一。目的：探讨AADC基因脑内移植对帕金森病的治疗作用及其在左旋多巴治疗过程中的地位，并探讨阳离子脂质体介导的基因治疗方法的有效性。设计：2&;#215;2析因设计。地点和材料：中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心，材料主要包括人嗜铬细胞瘤组织，TRlzol，真核表达载体质粒pCDNA3，阳离子脂质体，6-OHDA，阿朴吗啡，AADC单克隆抗体，SD大鼠。干预：使用基因克隆、亚克隆技术构建pCDNA3-AADC真核表达载体；将帕金森病模型的sD大鼠随机分为实验组与对照组，分别以pCDNA3-AADC重组体和pCDNA3空载体进行阳离子脂质体包裹后，注射于帕金森病SD大鼠纹状体内，并在该基础上对两组大鼠分别采用一定浓度的L-dopa进行治疗。采用免疫组化方法确定AADC的表达。主要观察指标：①AADC基因脑内移植后两组大鼠的旋转行为。②采用一定浓度的L-dopa进行治疗对大鼠旋转行为的影响。结果：①阳离子脂质体包裹的pCDNA3-AADC重组体脑内注射后，在3，7，14，21，28d时大鼠的旋转行为获得了一定的改善(P&;lt;0．05)，分别改善了56．0％，62．6％，49．4％，36．3％，27．4％，以1周时最为明显，在第5周时，其旋转行为则于移植前无明显差异(P&;gt;0．05)。②使用同等浓度的左旋多巴(L-dopa，10mg／kg体质量&;#183;d)治疗后，在上述相同的时间点时，实验组较对照组明显改善模型大鼠的旋转行为(P&;lt;0．05)，以1周时最为明显，其旋转行为改善达93．4％，在第5周时，两组间差异无显著意义(P&;gt;0．05)。③免疫组化方法确定AADC在纹状体区的稳定表达。结论：增加脑内AADC基因表达可有效改善帕金森病大鼠的旋转行为，并可增加L-dopa治疗效果，有助在低剂量上长期维持L-dopa的疗效；阳离子脂质体介导的裸基因脑内移植技术为基因治疗帕金森病提供一种手段。     

数字矩阵建模在寰椎椎弓根螺钉通道研究中的应用

目的 观察寰椎椎弓根通道在不同水平面角(TSA)、矢状面角(SSA)的变化规律,以及使用不同规格螺钉的变化规律,探讨数字矩阵建模在术前设计寰椎椎弓根螺钉进钉方案中的作用. 方法 将9位健康成人受试者(男5例,女4例;年龄26 ～ 70岁,平均45岁)的寰椎CT连续断层扫描数据导入Mimics 10.0l软件,三维重建后用.dwg文件导入3dnax2009.确定三维参照坐标和进钉点,用3dmax中参考建模命令建立17×17×2,间距2.5°,TSA 0 ～ 40°、SSA 0～40°,共578个元素模拟椎弓根螺钉矩阵模型,观察当模拟螺钉进钉角度、直径、长度变化时椎弓根螺钉通道的变化规律. 结果 TSA、SSA均明显影响左、右侧螺钉进钉长度,差异有统计学意义(P＜0.05).TSA=0°、SSA=10°时螺钉长度最佳[左侧平均为(1.91 ±0.26) mm,右侧平均为(1.51±0.29)mml.直径为3.5 mm、长为22 mm的螺钉在寰枢椎进钉数目较直径为3.5 mm、长度为26 mm的螺钉多,直径为3.5mm、长度为22mm螺钉在寰枢椎进钉数目较直径为4.0 mm、长度为22 mm的螺钉多,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 利用数字矩阵建模能够简化复杂逆向建模可以全方位观察不同TSA、SSA、螺钉规格变化时椎弓根通道的变化规律.术前设计时不仅需要综合考虑椎弓根螺钉本身的TSA、直径及长度,而且要考虑SSA,以确定个性化的进钉方案.     

2种血液标签的使用情况比较

正在《血站质量管理规范》10.条款血液的标识及可追溯性中对血液标签质量、内容、技术上均做了明确要求。在血液采集阶段,我站多年一直采用如图1标签1所示的血液标签对血液进行标识。但检验科在工作中会时常发现这种血液标签的血型标识格式(1张标签同时有A、B、O、AB 4种血型信息)容易产生一些问题,如出现同源标本血型标识不一致、血型录入错误以及血型标识错误等情况。在集体献血活动中这种错误更容易发生。当然,这些问题出现的根本原因     

颈椎微创术后椎间盘内压力与临床疗效关系的研究

目的探讨颈椎间盘突出症的微创治疗术后椎间盘内压力与临床疗效的关系。方法应用射频消融髓核成形术治疗颈椎间盘突出症47例,测定术后椎间盘内压力,观察其与临床疗效改善率的相关性。结果所有患者均在压力监测下顺利完成手术。47例患者获得1～25个月随访,根据日本骨科协会(JOA)评分法,采用术后改善率（Hirabashi公式）评定疗效。优25例,良19例,好转3例,优良率为93.6％(44/47)。术后椎间盘内压力与术后改善率有显著相关性(P＜0.05)。结论射频消融髓核成形术是治疗颈椎间盘突出症安全、有效的微创技术,术后椎间盘内压力若在3 kPa时,则效果更佳。