手术室空气消毒管理

在手术室管理工作中,加强手术室空气消毒是保证手术成功,防止感染的重要措施,也是手术室管理中的重要一环.1 影响手术室空气消毒效果的因素1.1 手术室的建筑设置 手术室的建筑设计不符合无菌原则要求.具体讲,房间不干燥,墙壁未用磁瓦砌成和油漆刷墙,地面达     

CD80鼠-人嵌合抗体的CHO细胞表达及体外生物学功能的初步研究

目的:CHO细胞表达抗人CD80鼠-人嵌合抗体ch4E5,并研究其在体外阻断CD80介导的共刺激信号转导的生物学功能.方法:构建含有嵌合重、轻链基因的表达载体pIRES/ch4E5;表达载体先转染293T细胞,FCM检测到ch4E5抗体的瞬时表达后,表达载体再转染CHO细胞,构建稳定表达细胞株CHO-ch4E5;Protein G亲和层析法从CHO-ch4E5细胞无血清培养上清中纯化ch4E5抗体,FCM检测ch4E5抗体对膜型CD80的识别;以丝裂霉素处理的正常人外周血单核细胞PBMCs为刺激细胞,以异体正常人外周血淋巴细胞PBLs为反应细胞,用MTT法分析ch4E5抗体的阻断作用.结果:ch4E5抗体在293T细胞的瞬时表达于48小时达到高峰,上清与L929-B7-1细胞结合率为96.0%;CHO-ch4E5细胞持续表达ch4E5抗体,其培养上清与L929-B7-1细胞结合率为95.7%;3天培养上清中,ch4E5抗体的产率约为5.56 mg/L;ch4E5抗体和L929-B7-1、Daudi、Sub-T细胞结合率分别为94.1%、25.7%、23.5%;ch4E5抗体可以阻断CD80介导的共刺激信号转导,抑制异体PBLs的体外增殖.结论:在CHO细胞中成功表达了抗人CD80鼠-人嵌合抗体ch4E5,在体外该嵌合抗体具有亲本抗体阻断CD80介导的共刺激信号的生物学活性.     

人重组sIL—6R的纯化与鉴定

采用免疫吸附亲和层析，将抗ｓＩＬ－６Ｒ的单克隆抗体交联于ＣＮＢｒ活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ。收集ｓＩＬ－６Ｒ转基因细胞的培养上清。经预处理后上亲和柱，获得高纯度的ｓＩＬ－６Ｒ重组蛋白。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳后出现一条区带，分子量为５５ｋＤ。     

IL-6免疫放射检测方法的建立及其应用

采用B淋巴细胞杂交瘤技术，建立分泌抗人IL—6单抗的杂交瘤细胞株；诱生腹水法制备单抗；Protein G免疫亲合层析法纯化单抗；改良的氯胺T法进行单抗的^125I标记；在对单抗识别抗原位点鉴定的基础上，建立了稳定、可靠的IL—6免疫放射检测方法(Immunoradio assay，IRA)。其灵教度为5pg／m1，检测范围为5—200pg／m1。采用该法分析的多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)患者血清中IL—6的含量平均为356pg／m1，明显高于正常对照组的16．9pg／m1(P＜0．01)。     

胡椒碱抑制C57BL/6小鼠胆囊结石形成的研究

目的 观察胡椒碱对实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响.方法 将C57BL/6鼠30只,随机分为3组.对照组10只,普通饮食;结石组10只,喂含1%的胆固醇饮食;胡椒碱组10只,喂含1%的胆固醇饮食和胡椒碱(30 mg/kg体重).4周后,分别利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及化学方法检测肝组织固醇载体蛋白(Scp2)mRNA水平和胆酯的变化,胆固醇饱和指数用Carey表计算.结果 结石组9只出现胆囊结石,10只出现胆固醇结晶;胡椒碱组和对照组无结石和结晶形成,与结石组相比,胡椒碱组肝Scp2 mRNA水平和胆囊胆汁CSI明显降低.结论 胡椒碱在明显抑制实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的同时,能显著降低肝Scp2 mRnNA水平和胆汁胆固醇饱和指数.     

~(131)I标记抗CD80单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的放射免疫显像

目的探讨放射性核素131I标记抗CD80单克隆抗体及标记物在荷淋巴瘤裸鼠体内的放射免疫显像。方法采用Iodogen法进行抗CD80单克隆抗体4E5的131I标记,并对标记抗体的免疫活性及稳定性进行分析。经荷淋巴瘤裸鼠模型尾静脉注入剂量为7.4 MBq/0.2 ml的131I-4E5抗体,分别于注药后24 h、48 h和72 h进行SPECT平面显像,采用感兴趣区(ROI)技术进行半定量分析,计算肿瘤与非瘤组织的放射性计数比值(T/NT)。显像结束后处死荷瘤裸鼠,分别取肿瘤、血等14种脏器或组织称重并测量其放射性计数,计算各脏器或组织的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。结果131I标记单克隆抗体4E5的标记率为(78.3±2.4)%,放射化学纯度为(95.7±1.8)%;131I-4E5抗体与Raji细胞的最大结合率为(36.1±2.6)%,131I-4E5抗体加入到血清中放置3天后放化纯度仍90%;荷瘤裸鼠注入131I-4E5抗体后,随时间的延长,肿瘤部位放射性浓聚逐渐增加,在72 h时肿瘤显影最为清晰,T/NT值此时最大达到3.2。结论131I-4E5抗体在荷淋巴瘤裸鼠体内具有靶向定位能力,可获得良好的放射免疫显像图像,为进一步利用131I-4E5进行淋巴瘤CD80为靶点的放射免疫治疗奠定了基础。     

阻断共刺激信号在异种小动物心脏移植中诱导免疫耐受的研究

目的在非协调性异种小动物豚鼠-大鼠心脏移植模型当中,通过单克隆抗体阻断T细胞B7/CD28及CD40/CD40L激活通路途径来探讨T细胞在异种移植延迟性免疫排斥中的作用,探索诱导异种移植T细胞外周耐受的可能性。方法将供体三色豚鼠和受体SD大鼠随即分成四组：A组（对照组）,在移植前一天大鼠腹腔内注射CVF 0.4mg/kg;B组（B7mAb组）,在移植当天大鼠腹腔内注射B7单抗0.1mg,余处理同A组;C组（CD40LmAb组）,在移植当天大鼠腹腔内注射CD154单抗0.1mg,余处理同A组;D组（联合组）,在移植当天大鼠腹腔内注射B7单抗0.1mg、CD154单抗0.1mg,余处理同A组。观察各组供心存活的时间,并行移植心脏的常规病理和免疫组化检查。结果对照组移植心脏的存活时间为（19.5±2.7）h,与对照组比较,B7组、CD40L组和联合处理组的移植心脏存活时间均得到了显著的延长,但联合处理组延长最为明显。移植心脏组织病理学检查均呈急性血管排斥反应改变,且以CD8＋T细胞浸润为主。结论联合阻断CD28/B7与CD40/CD40L共刺激通路可延长异种移植心脏存活时间。     

2株重组弓形虫P30抗原单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备重组P30抗原单克隆抗体,研究其生物活性。方法重组质粒pET28b-P30经BL21（DE3）表达,纯化、复性后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA筛选阳性克隆,经亚克隆建株。体内诱生腹水法制备抗体,测定其亚类、效价,Western blot分析其特异性,双单抗夹心-ELISA测定其敏感度。双单抗夹心-ELISA法检测弓形虫感染鼠血清中的CAg。结果筛选出2株抗重组P30的单克隆抗体9D7、2H9,抗体重链分别为IgG2a、IgG1,轻链均为κ链,Western blot显示2株单抗均能识别弓形虫速殖体天然P30抗原。双单抗夹心-ELISA检测抗原量为0.5μg/ml;同法检测鼠血清中的CAg,感染第4、6、8 d的阳性率分别为20%、60%、60%。结论制备的P30抗原单克隆抗体具有较高的敏感性和特异性,为其应用研究打下了基础。     

尿路感染的预防和管理

在医院尿路感染中与导尿有关的菌尿症可占３７．３％～５６％，是医院感染的主要危险因素。１密切观察病情观察患者有无尿路感染的症状，如排尿困难、尿急、尿频和血尿等，特别要注意观察并发症。尿管菌尿症的主要并发症是菌血症和败血症。２尿液培养及诊断采集尿标本方法...     

鼠抗人sIL—6R单克隆抗体的制备及sIL—6R检测方法的建立

以重组人ｓＩＬ－６Ｒ蛋白作为抗原，获得３株分泌特异性ＭｃＡｂ的杂交瘤株，分别命名为ＳＩ１０，ＳＩ１１和ＳＩ１２。３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。竞争抑制试验的结果表明，３株ＭｃＡｂ识别两个不同的抗原表位，将杂交瘤细胞注入同系小鼠腹腔诱生的ｃＡｂ腹水，经ｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ纯化后用生物素标记，建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ法，该法用于血清ｓＩＬ－６Ｒ的特异性检测，灵敏度为５０μｇ／Ｌ。