体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的初步研究

目的：5-氮胞苷作为分化诱导剂，初步探讨其单独或联合全反式维甲酸应用时对小鼠胚胎干细胞（mESC）分化为心肌细胞的影响，旨在建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的实验方法。方法： 采用 MTT法确定5-氮胞苷的非细胞毒性参考剂量。设计不同条件培养基（5-氮胞苷单独或配伍全反式维甲酸应用）对mESC 进行诱导分化，并通过免疫组化技术及RT-PCR方法等对分化细胞进行鉴定。结果： 5-氮胞苷的非细胞毒性参考剂量为8 μmol/L，能够诱导mESC分化为心肌合胞体（与阴性对照组比较，P<0.01），诱导分化率可达50%。配伍全反式维甲酸持续诱导的结果等同于单独应用全反式维甲酸的作用效果（P>0.05）：即对ESC向心肌细胞的诱导分化没有促进作用。结论：5-氮胞苷能够诱导mESC分化为心肌合胞体，从而得以建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的方法。     

碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞生长与c-fos表达的影响

以重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rb- b FGF)刺激体外培养的大鼠成骨细胞 ,发现 :经过 1～ 2 d的刺激 ,成骨细胞产生很长的突起 ,细胞数量和活力较对照均有显著升高 ;经 rb- b FGF 1h的刺激后 ,c- fos基因的表达即明显高于对照 ,刺激 1～ 2 d后 c- fos基因的表达也明显高于对照。这表明 b FGF可促进大鼠成骨细胞增殖 ,提高c- fos基因的表达量。 c- fos表达量的提高 ,可能是各种刺激在促进细胞增殖的信号转化过程中的重要一步     

PKH26标记原代大鼠肝细胞的实验研究

目的建立一种简单有效的肝细胞标记方法。方法原代分离的成年大鼠肝细胞,按PHK26标记程序进行标记。标记的肝细胞与胶原凝胶复合后植入体内观察植入细胞的成活情况。采用荧光显微镜对标记的细胞进行观察。结果肝细胞经PKH26染料标记后,荧光显微镜下可见红色荧光均匀的分布在整个细胞膜上。皮下植入后1周,植入的肝细胞成活,可通过标记的荧光直接探测到。连续切片显示这些细胞在成三维立体生长,形成类肝样的组织。结论用PHK26对肝细胞进行荧光标记提供了一种追踪细胞转归的方法。     

胶原包埋人胃癌微小癌巢体外模型的建立

目的 建立胶原包埋人胃癌微小癌巢体外模型.方法 利用组织工程技术,以胶原为支架材料,人胃低分化腺癌BGC-823细胞为种子细胞,构建胶原包埋人胃癌微小癌巢体外模型.倒置显微镜观察模型中肿瘤细胞的生长状态;噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖曲线;苏木素-伊红(HE)染色进行组织学观察,并与平面培养模型、胶原铺板培养模型比较.结果 胶原包埋人胃癌微小癌巢体外模型中,肿瘤细胞呈立体生长,彼此聚集成球状;能够较长时间维持细胞活性,第7天平面培养模型、胶原铺板培养模型和胶原包埋人胃癌微小癌巢体外模型A496值分别为0.608、0.584和0.728,胶原包埋人胃癌微小癌巢体外模型与其他模型比较差异均有统计学意义(P<0.05);组织切片可见基质中较多微小癌巢形成.结论 胶原包埋人胃癌微小癌巢体外模型能较好地模拟体内肿瘤生长状态,可用于抗肿瘤药物及免疫活性细胞的体外筛选.