抗IgM非μ链血清与μ链血清检测抗—HAVIgM的比较

本文报告用抗人IgM(非μ链)血清与μ链血清分别包被的固相酶标记双夹心法,检测38例急性甲型肝炎患者血清中的抗甲肝病毒IgM(抗-HAVIgM),阳性率分别为94.7％(36/38)与100％(38/38),两者的符合率为94.7％;用同法检测正常输血员血清标本10例,两者结果均为阴性,符合率100％。     

GFP-ICP0融合蛋白在巨噬细胞中的表达与定位

目的 构建GFP—ICP0融合蛋白真核表达载体pEGFP／ICP0，并在巨噬细胞中表达，为研究ICP0对巨噬细胞分泌活性的影响提供实验依据。方法 将ICP0片段亚克隆入载体pEGFP—Cl，构建GFP-ICP0融合蛋白真核表达载体。将质粒pEGFP／ICP0转染巨噬细胞，Western blot鉴定表达产物，荧光显微镜观察GFP—ICP0融合蛋白在细胞内的表达与定位。结果 成功构建了GFP—ICP0融合蛋白真核表达载体pEGFP／ICP0，GFP-ICP0融合蛋白在巨噬细胞中表达并定位于细胞核。结论 pEGFP／ICP0在巨噬细胞中即时高表达GFP-ICP0融合蛋白并定位于细胞核。     

钩端螺旋体LipL21基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/LipL21的构建与鉴定

目的构建钧端螺旋体外膜脂蛋白LipL21基因片段的真核表达载体，寻找新的预防钧端螺旋体感染的候选疫苗。方法应用PCR技术从钧端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组模板中扩增LipL21基因，纯化回收后克隆入pUCm-T载体，再亚克隆入真核表达载体pcDNA3．1（＋）。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建了LipL21真核表达载体pcDNA3．1（＋）／LipL21，DNA测序显示重组质粒含有561bp的目的基因片段，读码框架正确，无碱基错配及移码突变。测序后结果经与GenBank登录的序列做blast比较，载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的LipL21基因序列完全一致。结论成功构建了钧端螺旋体LipL21基因真核表达载体pcDNA3．1（＋）／LipL21。     

循环HBsAg-IgM复合物的检测与临床意义的探讨

本文以固相放射免疫方法检测了急性乙肝病人34例,HBsAg—IgM阳性者20例(58.82％);慢活肝10例,HBsAg—IgM阳性者2例(20％);HBsAg阳性无症状者11例,HBsAg—IgM阳性4例(33.33％),甲型肝炎(抗-HAVIgM阳性)及输血员各10例,其HBsAg—IgM均为阴性。从而说明循环HBsAg_IgM复合物的存在,可作为急性乙型肝炎的诊断依据之一。此外,还发现循环HB5Ag-IgM复合物与HBeAg有一定关系,可作为HBV复制的标志,有传染意义。     

沙眼衣原体外膜蛋白2重组蛋白的表达纯化和免疫性鉴定

目的表达沙眼衣原体外膜蛋白2,纯化表达产物,并对其免疫性进行鉴定。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术获得沙眼衣原体D型外膜蛋白2第167～434位氨基酸的编码基因片段,将此片段克隆于表达载体pET28b(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDSPAGE、蛋白印迹试验分析表达产物,亲和层析法纯化重组蛋白;重组蛋白免疫家兔以检测其免疫原性。结果重组质粒酶切分析及DNA测序证实成功构建pET28b(+)/Omp2aa167～aa434表达质粒;通过优化表达和纯化条件,获得了相对分子质量约为35.0×103纯化蛋白产物,蛋白印迹试验证实该重组蛋白能与Ct感染者阳性血清反应;ELISA法测定免疫血清特异性抗体效价在1∶1280以上。结论表达的重组外膜蛋白2aa167～aa434具有良好的免疫性。     

医学微生物学精品课程建设的探索与实践

课程建设是教学质量的中心环节,是衡量学校办学水平和教学质量的重要标志,是实现培养目标的基本保证。为做好医学微生物学精品课程的建设工作,从师资队伍、教学科研相结合、教学内容、教材建设、教学方法和手段、实践教学等方面进行了探讨和实践,取得了显著的成效。     

不育患者解脲支原体和沙眼衣原体感染的研究

应用分离培养法和质粒ＰＣＲ法分别对３７５例不育患者（不育组）及２３１例正常生育者（对照组）进行解脲支原体（Ｕｕ）和沙眼衣原体（Ｃｔ）的检测，不育组Ｕｕ的检出率为５２．３％，Ｃｔ检出率为２８．８％，对照组各为１５．２％和１０．０％，两组有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。在不育组中，Ｕｕ或Ｃｔ单一感染和Ｕｕ、Ｃｔ混合感染分别为３７．９％、１４．４％和１４．４％；对照组分别为１０．４％、５．２％和４．８％。两组相比，均有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。应用代谢抑制试验（ＭＩＴ）对Ｕｕ进行分型研究，不育组以Ｕｕ４型感染居多（２６．７％），对照组则以Ｕｕ３型最为常见（２８．６％）。     

钩端螺旋体外膜蛋白Loa22免疫血清与不同血清型钩端螺旋体的交叉免疫反应

目的探讨钩端螺旋体(钩体)外膜蛋白Loa22免疫血清与不同血清型钩体间的交叉免疫反应作用,为筛选钩体候选疫苗分子提供依据。方法制备钩体重组Loa22蛋白、LipL32蛋白豚鼠免疫血清,以LipL32免疫血清为阳性对照,未免疫豚鼠为阴性对照,ELISA测定与我国常见的各血清型钩体株的交叉反应的Loa22蛋白免疫血清效价。结果与钩体犬群犬型56603株、致热群致热型56605株、澳洲群澳洲型56607株、波摩那群波摩那型56608株、流感伤寒群临海型56609株、七日群七日热型56610株及明尼群明尼型56655株反应的钩体Loa22蛋白免疫血清效价分别为1∶81 920、1∶20 480、1∶40 960、1∶40 960、1∶40 960、1∶10 240和1∶10 240。结论Loa22蛋白免疫血清与不同血清型钩体有良好的交叉免疫反应性。     

研究钩端螺旋体外膜脂蛋白Loa22的免疫原性

目的 研究钩端螺旋体外膜脂蛋白Loa22的免疫原性.方法 取健康豚鼠12只,分蛋白免疫组和PBS(磷酸盐缓冲液)对照组,每组6只.蛋白免疫组以Loa22重组蛋白50 μg加等量完全弗氏佐剂乳化一免,Loa22重组蛋白配以不完全弗氏佐剂乳化二免和三免;对照组注射PBS与佐剂混合物.分别检测血清中抗体和T淋巴细胞增殖水平.结果 在末次免疫后2周时血清抗体效价和T淋巴细胞增殖与对照组相比,均显著升高(P<0.05).结论 Loa22重组蛋白有较好的免疫原性.     

表皮葡萄球菌主动外排氟喹诺酮的实验研究

目的探讨耐药表皮葡萄球菌中是否存在主动外排系统,以揭示表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制.方法应用琼脂稀释法检测表皮葡萄球菌耐药株和敏感株在加入主动外排抑制剂利血平和碳酰氰间氯苯腙（CCCP）后,对环丙沙星、司帕沙星的最低抑菌浓度（MIC）变化情况.结果加入CCCP及利血平后,表皮葡萄球菌敏感株及多数耐药株对环丙沙星、司帕沙星的MIC变化不大,而利血平可以使耐药菌SR79对环丙沙星的MIC减低7倍.结论表皮葡萄球菌中可能存在针对氟喹诺酮药物的主动外排系统.