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目的探讨人蛔虫体腔液(Ascaris body fluid,ABF)对人肠上皮细胞株(HCT-8)的毒性作用及作用浓度和时间的关系。方法以体外细胞培养方法观察ABF对HCT-8细胞的毒性作用.比较不同浓度ABF作用下不同时间HCT-8细胞的死亡率和形态结构。结果HE染色显示,当ABF浓度为800μg/ml时,HCT-8细胞的毒性作用最大,除浓度为12.5μm/ml的实验组,各实验组(25~800μg/ml)的毒性均高于对照组。结论ABF对HCT-8细胞所产生毒性作用在一定程度上表现出浓度和作用时间的依赖关系,并诱导细胞凋亡的发生。 相似文献
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目的构建高效、安全、可用于基因治疗的反转录病毒载体G1NaCⅨ。方法用限制性内切酶Bg1Ⅱ和HindⅢ将CMV-FⅨcDNA从质粒pCMVⅨ-10上切下,将该片段与BamHⅠ和HindⅢ双酶切后的G1Na连接,连接后的载体经鉴定连接正确后即为新载体G1NacⅨ,将G1NaCⅨ通过包装细胞PA317导入小鼠成纤维细胞NIH3T3、小鼠成肌细胞C2C12和人纤维肉瘤细胞HT1080中,选择培养两周后分别测定G1NaCⅨ在上述细胞中的Ⅸ因子表达量。结果(1)经酶切电泳鉴定,G1NaCⅨ连接正确;(2)G1NaCⅨ在N1H3T3中的Ⅸ因子表达量为60ng/106细胞·天-1,在C2C12中的Ⅸ因子表达量为1580ng/106细胞·天-1,在HT1080中的Ⅸ因子表达量为3600ng/106细胞·天-1,其中80%~90%的Ⅸ因子具有凝血活性。结论构建成功的反转录病毒载体G1NaCⅨ在C2C12和HT1080细胞中均能高效表达。 相似文献
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目的:通过研究雷公藤内酯醇(TP)对COC1/DDP体外活性的影响,初步探讨雷公藤内酯醇促进COC1/DDP细胞凋亡的机制,为TP成为治疗晚期或耐顺铂卵巢癌药物提供实验依据。方法:采用MTT法检测顺铂(DDP)、TP及两者联用对COC1/DDP的生长抑制作用;用透射电镜观察TP作用24h后细胞超微结构的变化;采用流式细胞术分析不同浓度TP对COC1/DDP细胞周期和细胞凋亡的影响;用DNA电泳分析用药后细胞基因组DNA断裂状况;以免疫组化分析TP对Caspase-7蛋白表达的影响。结果:DDP在24h、48h和72h三个时间段对COC1/DDP细胞的半数抑制量(50%concentration of inhibi-tion,IC50)分别为5.567μg/ml、2.866μg/ml和1.161μg/ml,其对COC1/DDP细胞增殖表现出浓度-时间依赖性的抑制作用(P<0.05);TP可抑制COC1/DDP细胞增殖,其抑制率呈浓度-时间依赖性(P<0.05);TP作用细胞24h后,电镜下可见凋亡小体形成;流式细胞术分析表明,各浓度TP组G1期细胞明显升高,细胞凋亡率呈浓度依赖性(P<0.05);DNA电泳分析可见细胞凋亡特有的DNA断裂形成的"梯形"条带;免疫组化表明Caspase-7参与了TP诱导COC1/DDP细胞凋亡过程。结论:TP对COC1/DDP具有明显的杀伤和促凋亡作用,凋亡机制与Caspase-7蛋白表达上调有关。 相似文献
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目的探讨人参皂甙Rg3对淋巴细胞的免疫刺激作用及其对胃癌细胞MKN-45的影响。方法采用梯度密度分离法分离正常人淋巴细胞,经人参皂甙Rg3刺激后流式细胞术检测人参皂甙Rg3对正常人淋巴细胞CD4表达的影响;用MTT法测定人参皂甙Rg3对MKN-45抑制作用;HE染色法观察人参皂甙Rg3诱导MKN-45的凋亡作用。结果人参皂甙Rg3促进正常人淋巴细胞CD4表达明显高于正常对照组(P<0.05);人参皂甙Rg3对MKN-45抑制率、凋亡率与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3具有刺激淋巴细胞CD4上调的作用以及抑制MKN-45细胞生长的作用。 相似文献
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细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡(Programmed celldeath,PCD),是不同于坏死(Necrosis)的另一种细胞死亡形式。它是由基因控制的、细胞自主的有序死亡。凋亡与组织器官的发育和机体正常生理活动的维持密切相关。在正常情况下,机体通过凋亡清除衰老或异常的细胞,并控制细胞的数量,调节组织器官的大小、形状,以维持正常的生理平衡。过度凋亡或正常凋亡的过程被抑制,均可导致组织或器官发生病理改变甚至死亡[1]。自1972年Kerr等[2]提出凋亡的概念后,细胞凋亡现象成为医学生物学各学科共同关注并极为活跃的研究领域。细胞凋亡常见的诱… 相似文献