感觉神经33.1kDa特异蛋白二级结构及其神经营养活性探讨

目的纯化大鼠脊神经感觉纤维33．1kDa特异蛋白(SSP-33．1)，并分析其二级结构及其神经营养活性。方法采用双向电泳技术比较了大鼠脊髓背根神经纤维和腹根神经纤维中蛋白质表达差异，用DEAE-Sephacel阴离子交换层析和高效液相凝胶过滤的方法纯化了其中一种蛋白质，并通过圆二色谱初步分析了该蛋白质的二级结构；又通过经典的神经营养活性的模型-鸡胚背根节(DRG)体外培养模型，测定该蛋白的生物学活性。结果纯化的蛋白质分子量为33．1，等电点为5．52，其二级结构中α螺旋占20．8％，β片层占54．8％，转角占7．3％，无规卷曲占17．1％。体外实验表明该蛋白质能促进鸡胚背根神经节突起的生长。结论纯化了大鼠感觉神经33．1kDa特异蛋白，该蛋白质二级结构以β片层为主，体外实验表明该蛋白质对体外培养的鸡胚背根神经节有神经营养活性。     

阿嗪米特对豚鼠胆囊胆固醇结石的治疗作用

目的:研究阿嗪米特(azintamide)对豚鼠胆囊胆固醇结石的治疗作用。方法:用高胆固醇饮食诱发豚鼠胆囊胆固醇结石模型,进行胆囊结石计数;测定胆囊体积和胆囊胆汁量;测定血清总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、胆固醇(TCHO)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、碱性磷酸酶(ALP);测定胆汁TCHO,TBA和TBIL。观察阿嗪米特(20和80mg·kg~(-1))对胆囊胆固醇结石的治疗作用。为探讨阿嗪米特抗胆囊胆固醇结石的作用机制,对胆囊壁组织进行了黏液素(mucin)的免疫组化实验。结果:与模型组比较,阿嗪米特20和80mg·kg~(-1)组成石率明显下降;胆囊体积和胆囊胆汁量显著减少;血清TCHO及LDL-C明显降低(P＜0．05);胆汁TBA升高(P＜0．05),胆汁TCHO及TBIL降低(P＜0．05)。黏液素免疫组化实验中可观察到,模型组黏液素表达水平较高,而阿嗪米特组黏液素表达水平较低。已知利胆药熊去氧胆酸(UDCA)亦有显著效果。结论:阿嗪米特对高胆固醇饮食诱发的豚鼠胆囊胆固醇结石模型具有明显的治疗作用。     

两种血脑屏障模型通透性指示剂使用效果比较

目的比较辣根过氧化物酶(HRP)和荧光黄(lucifer yellow,LY)在血脑屏障模型(blood brain barrier model,BBBM)通透性测定中的使用效果。方法将Wistar乳鼠脑毛细血管内皮细胞(brain capillary endothelial cells,BCECs)和星型胶质细胞(astrocytes,As)进行共培养建立非接触BBBM;利用通透性试验进行HRP和LY对BBBM通透系数(permeability coefficient,Pe)的测定。结果建立分别与12孔和24孔板相匹配的非接触BBBM。通透性测试显示,HRP组Pe值(12孔和24孔板模型)低于LY组。HRP和LY对BBBM的Pe分别为(0.64±0.05)×10-3、(1.67±0.07)×10-3cm/min(12孔、24孔模型)和(1.08±0.16)×10-3、(3.03±0.13)×10-3cm/min(12孔、24孔模型)。结论 HRP和LY作为指示剂均能用于BBBM通透性定量测定。但LY使用简便性,安全性较高,实际中可作为优先选择。     

不同血脑屏障模型的建立及其功能特点

目的比较不同类型体外血脑屏障模型(blood brain barrier model,BBBM)的建立及其屏障功能特点,为构建血脑屏障(BBB)毒性筛检模型提供选择依据。方法以Wistar乳鼠脑毛细血管内皮细胞(brain capillary endothelial cells,BCECs)和星型胶质细胞(astrocytes,As)共培养构建BBBM;以渗漏试验、跨内皮细胞阻抗(transendothelial electrical resistance,TEER)测量和荧光黄(lucifer yellow,LY)通透性试验评判模型的屏障功能。结果建立分别与12孔和24孔板相匹配的各4种BBBM:单细胞模型、接触模型、非接触模型和间接模型。镜下细胞融合完整的模型,渗漏试验结果呈阳性;各模型TEER于细胞融合完整后的2～4 d到达峰值。其中以接触模型和非接触模型的TEER最为突出,12孔、24孔接触模型TEER值分别为(241±4.5)、(297±5.6)Ω/cm2;12孔、24孔非接触模型TEER值分别为(233±5.6)、(273±4.6)Ω/cm2。4种模型中,12孔接触模型和非接触模型具有较低的通透系数(permeability coefficient,Pe),其值分别是(0.92±0.07)×10-3cm/min和(1.06±0.05)×10-3cm/min。结论 12孔BBB非接触模型的建立周期短、屏障特征明显,且易于实施通透性测试操作,可作为构建BBB毒性筛检模型的优先选择。     

经颅多普勒在外伤性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的应用

目的:探讨经颅多普勒(TCD)在重型颅脑损伤患者蛛网膜下腔出血(SAH)致脑血管痉挛的应用。方法:对61例重度颅脑损伤患者,于伤后1,3,5,7,10d进行TCD检测,对CVS组和非CVS组进行对照分析。结果:重度颅脑损伤后,CVS组大脑中动脉(MCA)血流速度变化特点是伤后1周内收缩峰血流速度迅速达高峰,然后逐渐回落,但仍明显高于正常值;而非CVS组的血流速度伤后3d内维持正常范围,伤后5d略有升高,随后回落接近正常。结论:TCD检测能实时检测SAH后CVS的动态血流变化,对CVS的早期发现和治疗二次脑损害有一定意义。     

抗晚期黑色素瘤新药易普利姆玛的药理与临床研究进展

易普利姆玛(ipilimumab)是一种人细胞毒性T淋巴细胞抗原4(cytotoxic T lymphocyte antigen4,CTLA-4)的单克隆抗体,2011年3月被美国FDA批准用于治疗晚期黑色素瘤。本品可显著延长患者的总生存期,具有重要的临床意义。本文通过文献检索,对其药理作用、药代动力学、临床研究和安全性等进行了综述。     

中药提取物CTE对MPTP所致帕金森病小鼠模型的神经保护作用

目的:研究中药提取物CTE对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病小鼠模型是否具有神经保护作用。方法:首先建立MPTP所致帕金森病小鼠模型,连续4 d给予MPTP(30 mg.kg-1,qd,ip)。用高低剂量(50和100 mg.kg-1,qd,ig)中药提取物CTE预处理MPTP所致帕金森模型小鼠。之后进行行为学检测,包括一般行为学检测和滚筒实验。最后,用HPLC-EC法测定纹状体中多巴胺(DA)及其代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量。结果:在MPTP所致的帕金森病小鼠模型,中药提取物CTE能显著改善小鼠的行为能力;且能显著提高小鼠纹状体内多巴胺含量。结论:中药提取物CTE对MPTP所致帕金森病小鼠模型有神经保护作用。     

神经干细胞抗帕金森病的实验治疗学进展

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)具有高度的自我更新能力、多向分化潜能(包括神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞)和迁移能力.主要来源于哺乳动物胚胎期的大部分脑区以及成体脑组织的两个区域:海马齿状回的颗粒下层和侧脑室的室管膜下区.目前,应用NSCs治疗帕金森病(Parkinson's diseas...     

帕金森病小鼠和大鼠模型黑质纹状体中胆绿素还原酶B的表达

目的探讨胆绿素还原酶B(biliverdin-Ⅸβreductase,BVRB)在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phe-nyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)帕金森小鼠模型和6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)帕金森大鼠模型黑质-纹状体内的表达。方法通过高效液相色谱的方法检测纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量,通过免疫印迹的方法检测黑质纹状体内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达,以确认模型的成功建立。对黑质纹状体BVRB的表达进行免疫印迹分析。结果与正常对照组相比,MPTP小鼠及6-OHDA大鼠模型纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量均明显下降(P<0.01),黑质纹状体内TH表达水平也明显下降(P<0.05),而黑质纹状体BVRB的表达水平在两种模型中均明显增高(P<0.05)。结论黑质纹状体BVRB的高表达可能与帕金森病的氧化应激机制相关。