稳定高表达RORα基因的人胃癌MGC803细胞系的构建与鉴定

目的 构建维甲酸相关孤核受体α(RORα)基因的真核表达载体,并建立稳定高表达RORα的人胃癌MGC803细胞,为研究RORα的功能奠定基础。方法根据RORα基因的cDNA全序列,设计一对带有限制性酶切位点的引物。从人胃癌MGC803细胞中提取mRNA作为模板合成RORα cDNA第一链,并用上述引物扩增目的基因全序列,然后经双酶切插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),转化大肠杆菌DH5α;用氨苄青霉素筛选pcDNA3.1(+)-RORα的阳性菌株,双酶切和测序进行鉴定。用经鉴定的重组质粒pcDNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞,G418筛选获得RORα/MGC803细胞株;Real-time PCR和Western blot检测该细胞株RORα的表达情况。结果经双酶切鉴定,构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)-RORα包含有大约1 640 bp的插入片段,与预期大小一致;表达载体经测序鉴定,其插入片段碱基序列与RORα基因的cDNA序列完全一致。用构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞后,筛选到可稳定传代的RORα/MGC803细胞株。Real-time PCR与Western blot检测显示,RORα/MGC803细胞RORα mRNA和蛋白表达增高。结论成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-RORα和建立高表达RORα基因的RORα/MGC803细胞。     

宫腔镜下宫腔粘连分离术后患者妊娠情况调查分析

目的分析宫腔粘连患者宫腔镜下宫腔粘连分离术后妊娠情况及相关影响因素。方法随访2014年9月至2016年9月102例有生育要求的宫腔粘连患者宫腔镜下宫腔粘连分离术后患者的妊娠情况,并回顾性分析患者临床资料,分析影响术后妊娠的相关因素。结果纳入研究的102例患者均完成随访。102例宫腔粘连患者术后,妊娠54例,妊娠率52.9%。其中,成功分娩32例,活产率59.3%,其中采取剖宫产26例(81.3%);待产5例,均孕12周以上;流产17例,流产率31.5%。流产患者中,晚期流产4例(23.5%),稽留流产10例(58.8%),胎盘异常3例(17.7%)。妊娠患者与未妊娠患者年龄、病程、粘连程度、复发情况、术后月经均存在显著性差异(P0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、粘连程度、术后月经情况是影响宫腔粘连术后妊娠的独立危险因素。结论宫腔粘连患者宫腔镜下宫腔粘连分离术后妊娠率较高,年龄、粘连程度、术后月经情况是影响术后妊娠的主要因素。     

Cdc25C cyclin B1在二烯丙基二硫化物诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用

目的：研究二烯丙基二硫化物（DADS）对人胃癌BGC823细胞的增殖及细胞周期的影响以及Cdc25C、cyclin B1的作用。方法：采用MTT法检测BGC823细胞的生长活性；流式细胞术分析DADS对细胞周期分布的影响；Western blot观察DADS对Cdc25C蛋白、cyclin B1蛋白表达的影响。结果：MTT比色实验结果显示，DADS对人胃癌细胞具有明显的生长抑制作用，且呈显著的剂量-效应依赖关系（P〈0．05）。流式细胞分析发现，DADS作用12h时，G2/M期细胞增加到30．1％；24h时增加到58．1％；36h达50．2％（P〈0．05）。Westernblot结果表明，DADS呈时间依赖性抑制人胃癌BGC823细胞周期Cdc25C磷酸酶的表达，cyclin B1表达在DADS处理24h后开始下降（P〈0．05）。结论：DADS可抑制人胃癌BGC823细胞增殖，其增殖抑制与细胞周期G2/M期阻滞有关；DADS可能是通过抑制Cdc25C、cyclin B1表达使部分BGC823细胞停滞在G2／M期。     

白细胞介素-1B 基因多态性、幽门螺杆菌感染与胃癌发生的相关性

 目的 探讨湖南衡阳地区白细胞介素-1B（IL-1B）基因多态性与胃癌的关系以及幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染后胃癌发生的易感基因型。方法 52例胃癌患者癌旁正常胃粘膜组织和55例慢性胃炎患者胃粘膜组织,均经快速尿素酶和PCR检测HP,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析技术,进行基因型检测,并对C/C、T/T进行测序,比较各基因型在胃癌组和胃炎组中的分布差异。结果 IL-1B-31T、IL-1B-511T等位基因和IL-1B-31T/T、IL-1B-511T/T基因型在胃癌组的分布频率高于胃炎组（P〈0.05）,OR值分别为1.97（95%CI=1.15-3.59）、2.52（95%CI=1.45-4.39）和2.71（95%CI=1.10-6.66）、3.33（95%CI=1.14-9.73）。在伴有HP感染的群体中进行比较,IL-1B-31位点各基因型未见明显差异;但IL-1B-511T等位基因和IL-1B-511T/T基因型在胃癌组的分布频率高于胃炎组（P〈0.05）,OR值分别为2.16（95%CI=1.10-4.23）和3.43（95%CI=1.01-11.62）。结论 在湖南衡阳地区IL-1B-31T/T、IL-1B-511T/T基因型与胃癌发病风险相关,在HP被感染后IL-1B-511T/T基因型可能为湖南衡阳地区胃癌易感基因型。     

大蒜、大蒜绿茶合剂对MNNG诱发实验性胃癌及癌前病变PBL微核率的影响

 本文研究大蒜、大蒜绿茶合剂对MNNG诱发大鼠胃癌及癌前病变过程中PBL微核率的影响。结果显示，MNNG组（MG）MNF在10月与16月时无明显差异，但较对照组（CG）始终显着增高（P<0.001）,胃癌及癌前病变均高于CG（P<0.001）,癌前病变明显低于胃癌（P<0.001）,预防组（PG）、治疗1（TGⅠ）与Ⅱ组（TGⅡ）皆低于MG（P<0.001）,PG在16月较10月时显着降低（P<0.001）,与TGⅠ无明显区别，而TGⅡ较PG10月时差异明显（P<0.005）,但与PG16月时和TGⅡ无差异。证明MNNG的致突变、致癌变性可持续作用，大蒜、绿茶具有明显的抗突变、抗癌变效果，微核先于胃癌出现于癌前病变，从而检测PBL微核可作为胃癌危险和早期的新标志。     

胃癌DNA甲基化差异片段的筛选与分析

目的筛选和分析胃癌和正常胃组织间DNA甲基化差异片段。方法通过甲基化敏感性代表性差异分析法(methylation-sensitive-representationaldifferenceanalysis,MS-RDA),筛选胃癌和正常胃组织间DNA甲基化差异片段,经克隆、测序后进行生物信息学分析。结果获得3个甲基化差异片段CRS1308、CRS1309、CRS1310序列。其中CRS1309和CRS1310已被GenBank收录,登陆号分别为AY887106和AY887107。CRS1309序列与LOC440683基因、LOC440887基因的3'端、DRD5基因均有很高的相似性;CRS1310序列与1999年MinoruToyota在人类结肠癌中分离出的核糖体RNA上的甲基化差异性CpG岛有很高的相似性。结论胃癌和正常胃组织间DNA甲基化存在差异,LOC440683、LOC440887、DRD5基因的异常甲基化可能与胃癌的发生相关,胃癌中CRS1310序列所在核糖体RNA上的CpG岛易发生甲基化。     

Menetrier氏病(弥漫性肥厚性胃炎)

Menetrier氏病是一种少见的疾病,在国内文献中仅见三例报告。最近,我们发现一例典型的Menetrier氏病,报告如下: 患者男,40岁。因上腹疼痛8年,腹泻7年,半年加剧于1978年6月4日入院。诉自1970年开始饭后上腹部胀痛,1971年起伴有腹泻,为粘液白冻     

DADS诱导人白血病细胞分化中的代谢变化

目的 研究二烯丙基二硫诱导人髓性白血病HL-60细胞分化过程中蛋白质组的差异表达.方法 运用蛋白质组学方法(双向凝胶电泳、质谱分析、生物信息学方法)分析鉴定DADS诱导HL-60细胞分化的差异表达蛋白质.结果 初步鉴定的差异表达蛋白质点中二型碳酸酐酶、磷酸丙糖异构酶、醛缩酶A在处理组中均表达下调,其功能与细胞代谢调节有关.结论 DADS可通过抑制二型碳酸酐酶表达和抑制糖酵解途径,抑制HL-60细胞增殖,诱导其分化.     

血清抗结核抗体与结核菌素试验对肺结核诊断的价值比较

〔摘 要〕 目的：探讨血清抗结核抗体检测（TB–Ab）、结核菌素试验（PPD）对肺结核患者的诊断价值。方法：在焦 作市疾病预防控制中心 2017 年 6 月至 2018 年 8 月诊治的肺结核患者中选取 80 例作为观察组,另选取同期在门诊诊治的 非肺结核疾病患者中选出 80 例作为对照组,两组患者均进行 TB–Ab 和 PPD,比较两种方法的诊断效能。结果：PPD 对肺 结核的诊断灵敏度、准确率均高于 TB–Ab,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）,特异度与 TB–Ab 比较差异无统计学意义 （P ＞ 0.05）。结论：PPD 在肺结核诊断中准确率、灵敏度高,有助于早期检出肺结核,但是其特异度低,因此临床应用 时需结合体格检查、其他实验室检验方法、影像学技术等综合诊断,以提高诊断准确率。     

早期腹膜透析患者心理状况与新发合并症的调查

随着当代医学模式的转变，心理因素在一些疾病的发生、发展和预后中起着重要作用。经过多年的临床实践，我们发现，腹膜透析患者存在明显的心理问题，焦虑占44．3％，抑郁占56．8％。我们认为，稳定透析后尿毒症患者食欲及营养状态改善，水负荷状况减轻是否促进了其心理状况的改善是值得探讨的问题。本研究对2004年1-12月透析治疗（CAPD）的31例患者的焦虑抑郁状况进行调查，提出了有效的护理对策，改善了患者心理状况，现报道如下。