遗传性痉挛性截瘫spastin、atlastin和paraplegin基因突变分析

目的探讨遗传性痉挛性截瘫(HSP)spastin、atlastin和parap legin基因的突变特点。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)结合DNA序列分析方法对24个常染色体显性遗传HSP家系和14例散发患者进行spastin基因和atlastin基因突变分析;对12个常染色体隐性遗传HSP家系和14例散发患者进行parap legin基因突变分析。结果在5个不同的常染色体显性遗传HSP家系中发现4个spastin基因新突变(1223 insCTCA、1258T→A,1293A→G和1668delCTA),在2例散发患者中发现2个spastin基因多态(IVS1-31C→G和IVS2-47A→G);在常染色体显性遗传HSP家系和散发患者中未发现atlastin基因突变或多态;在常染色体隐性遗传HSP家系和散发患者中未发现致病突变,仅在2例散发患者中发现2个parap legin基因多态(2063G→A及2066G→A)。结论我国遗传性痉挛性截瘫患者中spastin基因突变较常见,atlastin和parap legin基因的突变率可能较低。     

中国人共济失调毛细血管扩张症ATM基因突变研究

目的　探讨中国人共济失调毛细血管扩张症(ataxia- telangiectasia,AT) ATM基因的突变特点。方法　应用聚合酶链反应、逆转录-聚合酶链反应、聚丙烯酰胺凝胶电泳结合DNA序列分析方法对2例中国人临床诊断AT的患者ATM基因进行突变的筛选与检测。结果　在1例患者中发现第11外显子的1346 (G>C)的错义突变,为一种纯合突变;在另1例患者中发现第6外显子的6 10 (G>T)的无义突变和第4 7外显子的6 6 79(C>T)的错义突变,为一种复合性杂合突变。突变位点均位于ATM基因功能域。结论　在2例中国人AT患者中发现了3种新的ATM基因突变。     

电刀与一层吻合在胃大部切除术中的应用

无论胃及十二指肠的良性疾病或恶性肿瘤需行胃大部切除术时，我们往往担心的是术后吻合口出血、吻合口瘘等近期并发症。自2005年4月至2009年2月，我们采用电刀切断胃、切开空肠、胃肠一层吻合方法行幽门侧胃大部切除术68例，取到了很好的效果。     

原发性红斑肢痛症一家系排除与2q24．1-32区间连锁分析

【目的】研究原发性红斑肢痛症与2亏染色体长臂2q24．1-32区间的连锁情况。【方法】收集一个原发性红斑肢痛症家系成员的血样抽提DNA,选用2号染色体长臂2q24．1-32区间内7个微卫星标记对该家系成员进行基因扫描,并对基因分型结果进行连锁分析及单倍型分析。【结果】连锁分析所得两点LOD值结果（重组率0—0时）〈-2,单倍型分析发现该疾病表型与基因型不共分离。【结论】排除该家系与2号染色体体长臂2q24．1-32区间连锁,提示原发性红斑肢痛症具有遗传异质性。该家系可能有新的致病基因位点。     

GJB2基因在湖南地区非综合征耳聋患者中的突变分析

目的：为明确湖南地区人群中非综合征性耳聋(NSHL)患者发病的遗传学基础,分析患者间隙连接蛋白2(GJB2)基因突变的情况,并探索其发病的分子机制。方法：经过详细的病史询问和临床检查,收集符合要求、无亲缘关系的NSHL患者140例。PCR扩增患者GJB2基因的编码序列全长,纯化回收扩增产物,直接双向测序,用DNAStar软件分析测序结果,统计患者GJB2基因突变情况。设计1对错配引物并酶切以证实该新发现的突变。结果：在140名无亲缘关系的NSHL患者中,共有56例检测到GJB2基因突变,检出率达40%（56/140）;其中29例患者发现2个GJB2等位基因突变,另27例患者只有1个GJB2等位基因突变,等位基因突变率为30.4%（85/280）。总共发现10种不同的碱基变异,包括7种致病突变和3种多态。7种致病突变分别是无义突变c.139G>T,移码突变c.176_191del16和c.235delC,错义突变c.109G>A,c.344T>G,c.550C>T和c.571T>C。c.344T>G是1个新报道的错义突变。最常见的突变是c.235delC, 共有27名患者检测到该突变,达19.3%（27/140）。c.109G>A突变频率仅次于c.235delC, 有25名患者检测到该突变,检出率达17.9%（25/140）。结论：GJB2突变是导致湖南地区人群NSHL的最常见的基因突变,其c.235delC突变是湖南地区人群NSHL最常见的突变类型,发现1个GJB2基因的世界首次报道的新突变c.344T>G（F115C）。     

非综合征性语前聋人群中α-盖膜蛋白基因突变检测

目的 探讨中国人非综合征性语前聋患者α-盖膜蛋白基因突变频率和特性。方法 收集非综合征性语前聋家系34个，大部分来自湖南地区，共计65例，散发患者31例，健康对照组100例。聚合酶链反应扩增α-盖膜蛋白基因的部分外显子，单链构象多态分析初筛可疑突变者，发现异常构象带后再行DNA测序。结果 在α-盖膜蛋白基因9号和18号外显子的SSCP检测中发现多个患者有异常构象带，测序证实为多态性改变。未发现导致非综合征性语前聋的突变。结论 目前在国人非综合征性语前聋患者中尚未检测到α-盖膜蛋白基因的致聋突变，该基因的其它外显子有待进一步的研究。     

非综合征性语前聋人群中肌球蛋白15a型基因突变检测

目的检测中国人非综合征性语前聋患者肌球蛋白15a型基因(myosin 15a基因)的突变。方法收集非综合征性语前聋家系34个，大部分来自湖南地区，共计65例，散发患者31例，健康对照组100例。聚合酶链反应扩增myosin 15a基因的部分外显子，单链构象多态分析初筛可疑突变者，发现异常构象带后再行DNA测序。结果在2个患者中检测出myosin 15a基因3号外显子的3658号核苷酸G—A杂合突变，在家族中的正常人也发现了该突变，但在对照组未发现该突变。该新突变发生在myosin 15a分子运动区，导致编码的myosin 15a蛋白运动区1220位的甘氨酸改变为精氨酸(G1220R)。序列分析表明该基因突变很可能是myosin 15a基因一个与耳聋无关的多态现象。结论目前我们未能在中国非综合征性语前聋患者中检测到myosin 15a致聋突变，该基因的其它外显子有待进一步的研究。     

超声监视下水压灌肠复位治疗小儿肠套叠20例报告

我院自2003年1月￣2005年12月开展超声监视下生理盐水灌肠复位治疗小儿肠套叠20例,疗效满意,现报告如下。1临床资料1.1一般资料本组男17例,女3例,年龄4个月￣6岁,发病至就诊时间5￣48小时。多为健康肥胖的患儿,临床表现为阵发性哭闹不安,可伴有呕吐及果酱样血便,腹部体检可触及腊肠形肿块,没有严重的脱水、腹胀、腹膜炎等并发症。全部病例均经超声检查提示有“同心圆征”或“套筒征”而确诊。1.2操作方法使用GE Logiq7彩色超声诊断仪,线阵或凸阵式探头,频率3.5￣10MHz。患儿术前肌肉注射解痉镇静药物。灌肠桶内注入温生理盐水2000ml备用,…     

高度近视家系ZNF644基因突变筛查

目的明确10个高度近视家系是否与ZNF644基因突变有关。方法收集符合常染色体显性遗传的10个高度近视家系,对同意参加本研究的99例成员进行详细的临床检查,提取所有成员外周血白细胞DNA,采用PCR方法,对家系先证者ZNF644基因的外显子各片段进行扩增,并对PCR产物进行正、反双向测序。结果 10个高度近视家系先证者ZNF644基因测序发现3个已知单核苷酸多态性,分别为rs358691、rs17131232和rs76101054,未发现ZNF644基因突变。结论高度近视存在遗传异质性,遗传性高度近视发病可能只部分与ZNF644基因突变相关。     

腓骨肌萎缩症伴神经性耳聋一家系临床和分子遗传学分析

目的探讨一个X连锁腓骨肌萎缩症(CMTX)伴常染色体隐性遗传的神经性耳聋家系的临床特点并研究其分子遗传学病因。方法对9名家系成员进行详细的临床检查，先证者进行了神经肌电图、听觉诱发电位和神经活检，3名耳聋患者进行电测听检查。运用聚合酶链反应一单链构象多态性分析技术(PCR-SSCP)结合直接测序法进行间隙连接蛋白32(eonnexin32)的突变分析，直接测序法进行间隙连接蛋白26(connexin26)的突变分析。结果家系中3名腓骨肌萎缩症患者为X连锁显性遗传，3名神经性耳聋患者为常染色体隐性遗传，其中1名患者同时出现腓骨肌萎缩症和神经性耳聋的临床症状。CMTX由connexin32错义突变C223T(Arg75Trp)引起。耳聋症状与connexin32点突变无共分离现象，对connexin26直接测序亦未发现突变，耳聋的致病基因有待进一步探讨。结论该家系腓骨肌萎缩症和耳聋分别由不同基因突变引起，这种在一个家系中同时出现两种不同遗传方式，不同致病基因的遗传病罕有报道。