小青龙汤对TSLP诱导DCs表达IL-4、IL-12、IFN-γ、IL-10的干预作用

目的:当代研究表明胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)可以活化树突细胞(以下简称DCs),通过改变DCs分泌的细胞因子,形成有利于Th0向Th2优势分化的微环境,从而诱发过敏性鼻炎。临床发现小青龙汤治疗过敏性鼻炎疗效确切,关于其抗过敏的作用机制目前尚不明确。实验在体外用小青龙汤对TSLP-DCs体系进行干预,观察小青龙汤能否改变Th2优势分化的微环境。方法:从C57小鼠获取骨髓前体细胞,体外诱导培养生成DCs,设置空白组、TSLP刺激组、小青龙汤大中小3个剂量干预组,结合酶联免疫吸附实验(以下简称ELISA)在12、24、48 h 3个时间点分别检测IL-4、IL-12、IFN-γ、IL-10的表达。结果:与空白组相比,各TSLP刺激组IL-4的表达均明显升高(P0.01),而IL-10、IFN-γ的表达均明显降低(P0.01)。与TSLP刺激组相比,大中小三个剂量的小青龙汤干预组IL-4的表达量均明显降低(P0.01),降低最为明显的是4μg/m L小青龙汤组;与TSLP刺激组相比,大中小三个剂量的小青龙汤干预组IFN-γ、IL-10的表达量均升高(P0.01),升高最为明显的是4μg/m L小青龙汤组;IL-10的表达量随时间增加呈现降低趋势并在48 h时表达量达到最低;IFN-γ、IL-10的表达量随时间增加呈现先升高后降低的趋势并在24 h时表达量达到最高。结论:小青龙汤可以降低TSLP-DCs体系IL-4的表达,升高IL-10、IFN-γ的表达,改变Th2优势分化的微环境起到抗过敏作用,在剂量为4μg/m L时作用最为明显。     

复方人参健脑液对大鼠缺血再灌注脑细胞损伤的作用

目的:观察复方人参健脑液对脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法:大鼠随机分为正常对照组,脑缺血再灌注模型组,复方人参健脑液高剂量组(10 g·kg-1),复方人参健脑液低剂量(5 g·kg-1),维生素E组(1 g·kg-1).采用颈动脉结扎法构建大鼠脑缺血再灌注损伤模型,硫代巴比妥酸法测定脑细胞脂质过氧化物含量,比色法测定还原型谷胱甘肽含量,氧电极法测定脑细胞耗氧量.结果:模型组大鼠脑脂质过氧化物含量明显增加(P ＜0.001),还原型谷胱甘肽含量减少(P＜0.001),脑细胞耗氧量增加(P＜0.01).复方人参健脑液高剂量、低剂量组与模型组比较,脑脂质过氧化物水平降低(P＜0.001),还原型谷胱甘肽含量增加(P＜0.001),脑细胞耗氧量减少(P ＜0.001).结论:复方人参健脑液对脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用.     

鹌鹑高尿酸血症模型建立及菊苣提取物对其影响的实验研究

目的：塑造与人类代谢类似的高尿酸血症动物模型，观察中药菊苣取物对其影响。方法：选择鹌鹑作为模型动物，以酵母饵为造模剂，塑造高尿酸血症模型，动态检测鹌鹑血清尿酸等生化指标，观察菊苣提取物对该模型动物血表尿酸水平等的影响。结果：饲酵母食饵（15g/kg)7天，鹌鹑血清酸水平明显升高，持续5周。菊苣提取物小剂量给药7天可明显降低酵母诱发的鹌鹑血尿酸升高和抗其一过性血糖的增高，给药14天其作用优于阳性对照药苯溴马龙。结论：（1）该模型是筛选防治高尿酸血症中药及研究其机制较理想的动物模型。（2）菊苷提取物有明显的降尿酸作用。（3）造模机制和药物作用机理有待进一步深入研究。     

大鼠拟“血管性痴呆”模型的改进

随着社会进入老龄化 ,作为老年病的脑血管病 ,已成为人类三大死亡原因之一。近年来由于医疗水平的提高和防治知识的深入 ,脑血管病死亡率有所下降 ,而脑血管病造成的各种功能和智力障碍却有增高的趋势。血管性痴呆的防治日益受到人们的关注。目前虽建立了数种脑缺血动物模型 ,但脑缺血晚期学习记忆功能障碍的动物模型较少并不够完善 ,在一定程度上影响了对其机理及治疗的研究。本工作在前人实验的基础上加以改进 ,建立了一种拟“血管性痴呆”的动物模型 ,为研究脑缺血后学习、记忆功能障碍的发生机理及防治提供实验基础。材　料　和　方　法…     

小青龙汤对单纯型和复合型变应性鼻炎豚鼠模型Th1/Th2失衡的影响

目的:建立单纯型和肾阳虚复合型2种不同变应性鼻炎模型,探讨小青龙汤对2种变应性鼻炎模型Th1/Th2失衡作用的异同。方法:将105只雄性豚鼠随机分7组,每组15只:空白对照组(A组),单纯模型对照组(B1组),小青龙汤干预单纯模型组(B2组),息斯敏干预单纯模型组(B3组),肾阳虚复合模型对照组(C1组),小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组),息斯敏干预肾阳虚复合模型组(C3组)。B1、B2、B3组进行单纯变应性鼻炎造模;C1、C2、C3组在单纯变应性鼻炎的模型上进行肾阳虚复合模型造模。造模成功后,模型组进行用药观察,记录各组局部过敏反应;ELISA法(酶联免疫吸附试验法)检测血清中IFN-γ、IL-4、IL-2和IL-10等细胞因子含量;荧光定量PCR法测脾组织中IFN-γmRNA、IL-4mRNA、T-bet mRNA、GATA-3 mRNA等转录因子的相对含量。结果:变应性鼻炎单纯模型和肾阳虚复合模型均出现IFN-γ降低(P0.01),IL-4升高(P0.01),IFN-γ/IL-4比值降低(P0.01),IFN-γmRNA降低(P0.01),IL-4 mRNA升高(P0.01),IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值降低(P0.01),T-bet mRNA降低(P0.01),但可使GATA-3 mRNA升高(P0.01),因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对降低(P0.01)。小青龙汤可使单纯模型IFN-γ升高(P0.01),IL-4降低(P0.01),IFN-γ/IL-4比值升高(P0.01);升高IFN-γmRNA(P0.01),降低IL-4 mRNA(P0.01),使IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值升高(P0.01);使T-bet mRNA升高(P0.01),但可使GATA-3 mRNA降低(P0.01),从而使T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对升高(P0.01)。小青龙汤可降低肾阳虚复合模型中IL-4的含量(P0.01),对IFN-γ作用不明显,升高IFN-γ/IL-4比值(P0.01);可使IFN-γmRNA升高(P0.01),但对IL-4 mRNA变化不大,IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值升高(P0.01);对T-bet mRNA作用不明显,但可使GATA-3 mRNA降低(P0.05),因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对升高(P0.01)。结论:小青龙通过调节IFN-γ/IL-4比值、IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值和T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值,来调节Th1/Th2平衡,对单纯变应性鼻炎模型的过敏反应的改善更为明显。     

菊苣提取物对高脂模型小鼠肝脂水平和 NO 的影响

目的：进一步探讨菊苣提取物对模型动物肝脂水平的影响。方法：将快速塑造大鼠高脂血症模型的方法用于小鼠,塑造了小鼠高脂血症引起的肝高脂模型。结果：高脂１５ｄ时,血清ＴＣ水平明显升高,脂质在肝内蓄积,致使肝内ＴＣ、ＴＧ、ＮＯ、ＬＰＯ明显升高,ＳＯＤ活性则明显降低。而不同剂量菊苣可明显减少由高脂饮食引起的小鼠肝脂质蓄积,降低肝ＴＣ、ＴＧ、ＮＯ、ＬＰＯ水平,提高ＳＯＤ活性。结论：菊苣对高脂饮食引起的高脂血症     

脾虚四号方含药血清对功能性腹泻脾虚证大鼠离体结肠平滑肌细胞的影响

目的从细胞水平角度,观察脾虚四号方含药血清干预离体培养功能性腹泻脾虚证模型大鼠的结肠平滑肌细胞的变化。方法对功能性腹泻脾虚证模型大鼠进行提取离体结肠平滑肌细胞并原代培养,将其分为6组:空白对照组、模型组、脾虚四号方低、中、高剂量组、蒙脱石散组,各组分别5%含药血清干预48 h,用细胞增殖和毒性检测(CCK-8)法测定细胞增殖活性,实时荧光定量PCR检测各组相关脑肠肽的基因表达。结果 CCK-8法检测结果显示:与空白对照组相比,模型组结肠平滑肌细胞OD值极显著降低(P0.01);与模型组相比,各含药血清干预组结肠平滑肌细胞OD值极显著升高(P0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示:与空白对照组相比,模型组胆囊收缩素(CCK)、血管活性肠肽(VIP)、生长抑素(SS)mRNA表达均显著降低(P0.05)。与模型组相比,各含药血清干预组均有表达升高趋势,脾虚四号方低剂量组较模型组CCK mRNA表达显著升高(P0.05),脾虚四号方低、中、高剂量组较模型组VIP mRNA表达极显著升高(P0.01)。结论脾虚四号方含药血清能够有效促进模型结肠平滑肌细胞的增殖活性,脑肠肽CCK、VIP、SS mRNA表达变化可能有利于进一步阐释功能性腹泻脾虚证在脑肠肽胃肠激素方面发病机制。     

脑卒中后抑郁模型大鼠脑单胺递质变化及中药颐脑解郁方的干预作用

目的：观察脑卒中后抑郁模型大鼠脑内单胺神经递质水平变化，以及中药颐脑解郁方对其的影响。方法：实验于2004-01-15／05在北京中医药大学基础医学院科研中心实验室及中心实验室高效液相测试中心进行。取雄性Wistar大鼠60只，随机分为正常组、脑卒中组、模型组、氟西汀组、颐脑解郁方组，每组12只。正常组不干预，其他4组复制局灶脑缺血模型，除脑卒中组外复制大鼠脑卒中后抑郁模型。造模结束后第1天分别开始灌胃双蒸水、氟西汀、颐脑解郁方共6周。用高效液相-电化学法测定脑前皮质、海马去甲。肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺及其代谢物5-羟基吲哚乙酸含量。结果：60只大鼠全部进入结果分析。在大脑前皮质中：①5-羟色胺含量：正常组[(512．78&;#177;73．00)ng／g]及脑卒中组[(484．05&;#177;55．92)ng／g]高于模型组[(375．93&;#177;86．35)ng／g]，氟西汀组[(465．04&;#177;86．85)ng／g]和颐脑解郁方组[(459．41&;#177;68．24)ng／g]较模型组显著增加，但此两组间无差异。②去甲肾上腺素含量：模型组[(368．59&;#177;84．24)ng／g]较正常组显著降低[(438．82&;#177;63．21)ng／g]，颐脑解郁方组[(485．9l&;#177;58．98)ng／g]较模型组显著增加。③5-羟基吲哚乙酸含量：正常组[(615．68&;#177;65．01)ng／g]及脑卒中组[(600．67&;#177;41．17)ng／g]高于模型组[(501．78&;#177;82．88)ng／g]，氟西汀组[(590．05&;#177;86．45)ng／g]较模型组显著增加(P&;lt;0．05)。在脑海马组织中：①5-羟色胺含量：模型组[(167．97&;#177;36．71)ng／g]较正常组[(351．46&;#177;69．23)ng／g]和脑卒中组[(325．94&;#177;68．17)ng／g]显著降低，氟西汀组[(375.64&;#177;97．79)ng／g]和颐脑解郁方组[(248．73&;#177;58．99)ng／g]较模型组显著增加。②多巴胺含量：模型组[(18．49&;#177;5．17)ng／g]较正常组[(25．33&;#177;6．91)ng／g]显著降低，颐脑解郁方组[(27．94&;#177;7．22)ng／g]较模型组显著增加(P&;lt;0．01)。③去甲。肾上腺素含量：模型组[(368．62&;#177;51．48)ng／g]较正常组[(664．88&;#177;62．63)ng／g]显著降低，颐脑解郁方组[(428．52&;#177;39．24)ng／g]较模型组显著增加(P&;lt;0．05)。结论：脑卒中后抑郁大鼠存在脑单胺神经递质含量的减少，中药颐脑解郁方可增加其中枢5-羟色胺去甲。肾上腺素、多巴胺含量。     

不同内皮细胞条件培养液对皮层神经元线粒体功能的影响及通络救脑注射液的保护作用

目的探讨脑微血管内皮细胞条件培养液对损伤神经元线粒体功能的影响,以及通络救脑注射液对此过程的干预作用。方法制备（1）正常内皮细胞条件培养液（N—CM）：正常培养的内皮细胞不作任何处理;（2）正常用药内皮细胞条件培养液（NT—CM）：通络救脑注射液按1μl／ml浓度作用10h;（3）缺氧损伤内皮细胞条件培养液（I-CM）;（4）缺氧损伤用药内皮细胞条件培养液（IT—CM）：于损伤前4h,加入通络救脑注射液1μl／ml;分别作用于糖氧剥夺损伤的神经元模型,通过测定神经元线粒体活性、线粒体膜电位（MMP）及细胞色素C（CytC）,分析各个条件培养液对损伤神经元线粒体功能的影响。结果（1）与模型组比较,N—CM组与NT—CM组（P〈0．05）均可阻抑损伤神经元线粒体活性的下降,尤其是NT—CM保护作用更为明显。（2）与正常组比较,模型组MMP明显下降;I-CM使受损神经元的线粒体功能进一步下降;I-CM组可进一步降低受损神经元MMP,IT—CM可逆转神经元MMP下降,明显改善这种损伤状态。（3）N-CM组与NT—CM组均可降低损伤神经元的CytC释放,分别与模型组、I—CM组比较,差异均有显著性（P〈0．05）。结论脑微血管内皮细胞的旁分泌功能对损伤神经元的存活有重要的调节作用,该作用的实现可能与维持神经元线粒体功能有关,通络救脑注射液可促进该作用的发挥。