胃癌组织中Survivin外显子1甲基化状态的分析

目的：研究胃癌组织Survivin外显子1去甲基化与Survivin mRNA表达以及临床病理参数之间的关系。方法：25例胃癌及与其配对的正常胃组织DNA经甲基化敏感性限制性内切酶HpaⅡ和MspⅠ处理后用SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR对Survivin外显子1进行检测，Survivin mRNA的表达水平采用实时荧光定量PCR的方法进行检测。结果：Survivin外显子1去甲基化率在胃癌组织和癌旁组织分别为96．0％（24／25）和20．0％（5／25），χ^2=29.639，P〈0．001。在25例胃癌组织中有22例（88．0％）发生Survivin mRNA过表达，并且表达与去甲基化呈正相关，rs=0．5528，P=0．00416。没有发现去甲基化与年龄、性别、肿瘤大小、病理分级、临床分期和转移与否等病理参数之间存在统计学上的相关性，P〉0．05。结论：Survivin外显子1去甲基化增强Survivin mRNA的表达，可能是胃癌发生和发展过程中的早期事件。     

p21对肝癌细胞中survivin转录的影响及调控机制的探讨

目的 研究细胞周期依赖性激酶抑制蛋白p21对人肝癌细胞survivin转录抑制的调控作用,并探讨其相应机制.方法 使用多柔比星处理人肝癌细胞株HepG2,采用脂质体法将质粒pEGFP-C2-p21导入HepG2细胞,用G418筛选转染后的HepG2-p21和HepG2-pEGFP细胞;采用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测p21、p53和survivin的mRNA表达;采用流式细胞仪分析转染后细胞周期的变化;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后E2F-1和p300的mRNA表达.结果 经多柔比星处理后,HepG2细胞中p21和p53 mRNA的表达先增高,然后逐渐降低;survivin mRNA的表达则相反.转染后,HepG2-p21细胞中p21 mRNA的表达明显增高,分别为HepG2和HepG2-pEGFP细胞的2100.1倍和980.9倍;survivin mRNA的表达却明显降低,分别为HepG2和HepG2-pEGFP细胞的0.5%和0.6%;p53 mRNA的表达差异无统计学意义.流式细胞仪检测显示,HepG2-p21细胞的细胞周期明显阻滞在G0/G1期.HepG2-p21细胞中E2F-1和p300 mRNA的表达水平分别为0.75±0.04和0.18 ±0.06,与HepG2和HepG2-pEGFP细胞比较,含量均明显减低(P＜0.05).结论 p21可能通过抑制survivin的转录调控因子E2F-1和p300 mRNA的表达,从而抑制细胞中survivin的表达,并导致细胞出现G0/G1期阻滞.     

郄穴治疗经脉和脏腑顽固性疾病的临床应用

经脉气血深聚之处的腧穴,称郄穴.自《针灸甲乙经》明确十六郄穴的名称,厘定其具体定位,详论其针灸法,阐明其主治病症以后,临床多应用郄穴治疗本经循行所过部位及所属脏腑的病症,主要体现在"阳经郄穴多治痛,阴经郄穴多治血",近人则常用于急症.笔者从事针灸临床和教学多年,运用郄穴治疗多种经脉和脏腑的顽固性疾病,尤其是神经系统疾病和脑血管疾病,常获良效,现结合临床病案介绍如下.     

Down-regulation of β-catenin Nuclear Localization by Aspirin Correlates with Growth Inhibition of Jurkat Cell Line

In this study, we examined the effects of aspirin on the growth rates, subcellar distribution of β-catenin protein, the expression of β-catenin/TCF signaling pathway target gene cyclinD1 mRNA, and cell cycle of Jurkat cell line （Human T-acute lymphoblastic leukemia）. Our results showed that the treatment with aspirin inhibited the growth of Jurkat cell line. Jurkat cells treated with 3 mmol/L of aspirin could significantly decrease nuclear localization of β-catenin, and at 5 mmol/L of aspirin, the nuclear localization of β-catenin was undetectable. QRT-PCR showed that the target gene cyclinDl mRNA expression was gradually decreased with the dosage of aspirin. Aspirin induced G0/G1 cell cycle arrest in Jurkat cells. We are led to conclude that aspirin acts through β-catenin-independent mechanisms. The effects of aspirin include down-regulation of β-catenin nuclear localization and G0/G1 cell cycle arrest, which might serve as a means of growth inhibition in aspirin-treated human Jurkat cell line.     

临床生物化学实验教学的改革与实践

临床生物化学的实验课程主要是针对医学检验专业的学生设立的,用于培养学生实验操作技能。在当前倡导素质教育的大环境下,传统的教育模式已经不能适应培养学生的综合素质及分析解决具体问题的能力,因此,我们对实验教学的内容、方法、考核方式及指标管理体系进行了改革,并适时开展了探索性实验,取得了良好的效果。     

一步抽提酶法快速测定红细胞内还原型三磷酸吡啶核苷

目的:还原型三磷酸吡啶核苷(NADPH)是体内重要的还原当量,测定NADPH可以评估机体的氧化-还原状态,文中旨在建立一种快速测定外周血红细胞内NADPH的方法. 方法:制备红细胞溶血液,谷胱甘肽还原酶(GR)能选择性将NADPH转化成其氧化形式(NADP+),而NADPH在340nm有特异吸收峰,利用GR处理前后吸光度的变化从NADPH标准曲线上即可对还原型NADPH进行定量,在此基础上对建立的方法进行初步评价. 结果:该法检测NADPH的灵敏度为0.003mmol/L,批内变异(CV)为6.93%,回收率为97.0%～104.3%,用该法制备的溶血液中NADPH可稳定180min;随机选择25例体检健康人员用本法与传统方法测定外周血红细胞NADPH水平,结果相关性好(r=0.9377,P＜0.01),2种方法测定结果无显著性差异(t=0.3903,P＞0.05),平均偏差为0.932%,平均NADPH水平为(0.1536±0.0306)μmol/gHb. 结论:该法简单、方便、快速,可批量用于活细胞内NADPH水平测定.     

中国人群白细胞介素-13基因多态性与哮喘易感性关系的Meta分析

目的评价白细胞介素-13基因多态性与中国人群哮喘易感性的关系。方法检索中文及外文数据库,全面收集2010年8月之前发表的研究中国人群IL-13基因多态性与哮喘相关性的病例对照研究,对采纳的数据进行Meta分析。结果9篇文献被纳入分析,其中涉及C1923T多态性的文献5篇、G2044A多态性的文献5篇。Meta分析计算合并比值比（95％可信区间）：TT／CC基因型为4．15（2．83～6．09,P=0．000）;CT／CC基因型为1．97（1．53～2．53,P=0．000）：AA／GG基因型为1．92（1．00～3．72．P=0．051）;GA／GG基因型为1．44（1．14～1．82,P=O．000）。TT／CC、AA／GG、GA／GG研究数据不存在发表偏倚（P值分别为0．175、0．968、0．633）;CT／CC研究数据存在发表偏倚（P=0．010）。结论当前的研究支持IL-13＋1923位点基因型1T和＋2044位点基因型GA是哮喘发病的危险因素．＋1923位点基因型CT和＋2044位点基因型AA与哮喘发病尚无明确关系。     

社区康复护理对中重度慢阻肺患者稳定期生活质量的影响

目的：探讨社区康复护理能否改善中重度慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期患者生活质量。方法：对社区内26例中重度COPD稳定期患者实施健康教育及规律的运动训练,实施前后分别对COPD患者生活质量评估问卷（CAT）,第一秒用力呼气量/用力肺活量（FEV 1/FVC）、第一秒呼气容积占预计值的百分比、6分钟步行距离（6MW D）进行测验,评价康复护理前后上述参数的变化。结果：康复护理后CAT、6MW D都有改善且存在统计学差异（P〈0.05）,FEV 1/FVC、FEV 1/预计值也有改善,但差异没有统计学意义。结论：社区康复护理能提高中重度COPD稳定期患者生活质量。     

Excel 2000软件在即刻法质控中的应用与改良

目的 在即刻法用于免疫学实验的质控中，探讨一种更简便、快速、准确且直观的操作方法。方法 应用Excel2000对质控数据的自动统计、分析及评价并绘制出即时累积的L—J质控图，将此改良的操作方法用于日常质控中进行评价。结果 改良后的即刻法能自动、快速地完成质控操作，结合即时的质控图能更准确的进行评价，效果明显优于单用即刻法。结论 Excel2000软件改良的即刻法质控图能更准确、高效地实现免疫实验的质控，并可以推广于现代检验医学各专业的质控，成为替代手工质控的一种必然趋势。     

凋亡细胞的清除与TIM基因家族的研究进展

快速有效清除体内的凋亡细胞对多细胞正常生长发育和维持内环境稳定起着至关重要的作用.目前研究发现体内吞噬细胞通过磷脂酰丝氨酸受体识别凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸而与之直接或者间接结合,从而使得凋亡细胞被吞噬清除.最新研究结果表明,T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白基因家族可能是一个新的磷脂酰丝氨酸受体家族,参与体内凋亡细胞的识别与清除的调控.因而研究TIM基因家族与凋亡细胞间的相互关系,为进一步了解TIM基因家族在凋亡细胞的识别与清除中扮演的角色及其作用奠定了基础.