靶向Survivin的siRNA联合吉西他滨抑制胰腺癌细胞增殖

Objective To construct the siRNA eukaryotic expression vector targeting Survivin gene, and investigate the chemotherapy sensitivity of pancreatic cancer line Panc-1 treated by gemcitabine. Methods The siRNA eukaryotic expression vector targeting Survivin gene was constructed. Panc-1 cells were transfected with negative control vector or siRNA vector and selected by G418, and the cell growth curve was drawn. The expression of Survivin mRNA and protein was detected by RT-PCR and Western blot respectively. Panc-1 cells or transfected cells were treated with gemcitabine for 24 h,and then the growth inhibition rate was measured by MTT assay, and cell apeptosis rate was measured by flow cytometry. Results The result of endonuclease digestion and DNA sequencing revealed that the recombinant plasmid psiRNA-Survivin was constructed successfully. Survivin mRNA and protein levels were reduced by 79.2% and 83.6% respectively in stably transfected Panc-1 cells as compared with control group, and the cell growth curve was much smoother, and the growth inhibition rate [ ( 24.6±4.5 ) % / (38.7±5.2 ) % ] and apoptosis rate of these cells [ ( 16.7±2.5 ) %/( 26.8±3.4 ) % ] were significantly increased after treatment by gemcitabine (P < 0.05 ). Conclusion The constructed siRNA eukaryotie expression vector targeting Survivin could decrease the Survivin expression,inhibit the growth of Panc-1 cells significantly,and increase the chemotherapy sensitivity to gemcitabine.     

肝损伤92例诊治体会

随着交通业及建筑业的发展，肝损伤的发病率呈增加趋势，占腹部创伤施行剖腹手术病人的25％～30％。因此，如何及时恰当治疗肝损伤，仍是外科医生感到棘手的问题。1999～2004年我们共收治肝损伤患者92例，现将其诊治体会结合文献进行讨论，报告如下。     

一种鉴别免疫筛选噬菌体克隆真、假阳性的方法

目的探讨及早鉴别用免疫学方法筛选cDNA文库得到的阳性克隆是否真实可靠的方法.方法将阳性噬菌体克隆与宿主菌按一定的比例诱导培养后,取沉淀做SDS-PAGE后行W estern b lot;同时取出一个阳性克隆进行亚克隆,直至3次亚克隆均为全部阳性.结果3次亚克隆均为全部阳性的噬菌体克隆,在W estern b lot鉴定中也呈阳性反应.结论可用W estern b lot方法来鉴别用免疫学方法筛选cDNA文库得到的阳性克隆是否真实可靠.     

腹腔镜配合胆道镜治疗胆总管结石

随着腹腔镜技术的日趋成熟．设备器械的不断完善．在腹腔镜下胆囊切除广泛开展的基础上．本院于2005年2月至2006年2月开展腹腔镜下配合纤维胆道镜（LCTD）治疗胆总管结石30例．取得满意疗效．对是否放置“T”管进行了10例的探索．现报告如下．     

红花治疗特发性肺纤维化19例

特发性肺纤维化 (IPF)是一种原因不明、以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱最终导致肺间质纤维化为特征的疾病 ,占间质性肺病的 6 5 %左右。预后不良 ,生存期一般≤ 5年。我院1997年 7月— 2 0 0 2年 7月用红花注射液治疗IPF 19例 ,疗效满意 ,报告如下。1　资料与方法1.1. 　一般情况　 19例均为我院呼吸内科住院患者 ,男 12例 ,女 7例 ,年龄 4 8～ 72岁 ,平均 6 0 .5岁 ,均符合临床诊断[1] ,主要临床表现为进行性呼吸困难、刺激性干咳、消瘦、乏力等 ,限制性通气功能障碍 ,X线胸片示两侧中下肺野网状阴影 ,高分辨率CT表现为双侧周围肺区斑片…     

髋关节骨折CT、X线诊断分析

目的:讨论髋关节骨折CT、X线诊断分析.方法:44例髋关节骨折CT扫描、X线片分析.结果:全部病历均较X线片、清晰显示不同类型CT图像.结论:CT能够为临床提供准确的治疗依据,在髋关节外伤,尤其是线状隐匿性骨折、粉碎性髋关节骨折的诊断中起到决定性作用.     

复方锡类散液灌肠治疗溃疡性结肠炎28例

溃疡性结肠炎是以血性黏液便、腹痛和腹泻为主要表现的结肠和直肠慢性疾病 ,随着对本病认识的加深和大肠镜检查的广泛开展 ,近年来国内报道例数明显增多 ,但对其治疗效果各医院报道不一。由于其反复发作 ,治疗较困难 ,2 0 0 1年 1月～ 2 0 0 2年 9月 ,我们采用复方锡类散液[1]     

冠状动脉介入治疗并发急性心包填塞的临床及超声心动图特点

目的 总结经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)治疗并发急性心包填塞的临床超声心动图特点。方法 对本院5例PTCA治疗后由超声心动图发现，最终经心包积液性质和(或)手术证实的冠状动脉穿孔并发急性心包填塞患者的临床资料进行回顾性分析。结果 5例患者在PTCA治疗后20分钟～2小时突发胸闷、出汗、血压降低，而心率、呼吸、心电图明显变化，经快速补液和多巴胺治疗血压难以纠正；床旁超声心动图提示心包内10～25mm心包积液；并指导紧急实施心包穿刺和持续引流术，4例经采取内科保守治疗成功；仍有活动性出血，而急诊实施了冠状动脉旁路移植术，并行冠状动脉缝合治疗。5例均康复出院。结论 PTCA术后疑有急性心包填塞，应急诊床旁超声心动图检查。一经确诊，应紧急实施心包穿刺和持续引流术，连续观察引流效果，持续活动出血应急诊冠状动脉旁路移植术治疗。     

7-甲氧基-4′-羟基-3′-二乙胺甲基异黄酮(MHDF)对大鼠血流动力学和主动脉的作用

本实验观察了MHDF对整体大鼠血流动力学和离体大鼠胸主动脉的作用。结果表明iv MHDF(3～12.8 mg/kg)能降低大鼠左心室±dp/dt_max,V_max,V_pm和LVSP,延长T-dp/dt_max,减慢心率。MHDF还能舒张大鼠胸主动脉,ED₅₀为6.5×10^-6mol/L;非竞争拮抗NA和CaCl₂致主脉收缩,pD₂′为3.11±0.21和3.73±0.07;抑制高K⁺致主动脉收缩,IC₅₀为1.76×10^-5mol/L。提示MHDF对血管的作用与α受体阻断剂不同,而可能与钙拮抗有关。     

正常与BPH前列腺生长因子的研究

收集正常的及良性前列腺增生症（ＢＰＨ）的前列腺组织，用细胞培养、同位素掺入法分别测定各例标本的组织液对Ｓｗｉｓｓ３Ｔ３细胞增殖的影响。结果表明，ＢＰＨ组织液促细胞增殖效应为正常前列腺的５倍。正常前列腺组织用硫酸铵分级沉淀、肝素亲和层析、ＮａＣｌ浓度梯度洗脱（收集１．３～１．７ｍｏｌ部分），分离纯化人前列腺生长因子（ｈＰＧＦ）。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定达电泳纯，分子量约为１７０００，纯化约８００倍。所得的ｈＰＧＦ对Ｓｗｉｓｓ３Ｔ３细胞的增殖刺激作用呈现浓度依赖性，ＢＰＨ组织ｈＰＧＦ活性显著高于正常前列腺