氧化修饰的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白对单核细胞MCP-1表达的影响

为了研究氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ┐ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ┐ＶＬＤＬ）对单核细胞的单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ┐１）ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。在单核细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的ＬＤＬ、ＯＸ┐ＬＤＬ、ＶＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ，培养２４小时后分别收集单核细胞及其条件培养基。参照异硫氰酸胍法提取单核细胞总ＲＮＡ，并用γ３２Ｐ末端标记ＭＣＰ┐１寡核苷酸探针，进行ｓｌｏｔｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析。同时用夹心ＥＬＩＳＡ检测其条件培养基中ＭＣＰ┐１蛋白含量。结果显示单核细胞能表达ＭＣＰ┐１，ＯＸ┐ＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ能明显增强单核细胞表达ＭＣＰ┐１。而ＬＤＬ和ＶＬＤＬ的作用却很轻微。说明单核细胞能通过表达ＭＣＰ┐１，从而进一步招引其它的单核细胞迁入内皮下间隙，而ＯＸ┐ＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ能加强这种作用。     

陈旧褪色病理教学HE切片颜色恢复技术探讨

在病理学实习教学中,病理常规HE切片是重要的教学工具.对病理学教学切片要求所选病例典型,组织切片应完整、无皱褶、无摺叠、无破损,并且切片染色鲜艳,红蓝对比鲜明.由于时间的关系,一些教学切片发生褪色,其中主要是苏木精颜色的减退,有些切片甚至完全褪色,整张切片呈现一片红色,从而严重影响了教学效果.本文旨在在原有HE染色的基础上,探索一种促染方法,改善这些褪色教学切片的颜色,恢复其鲜艳的红蓝对比颜色,使其发挥正常的教学作用.     

联胺诱导培养的人内皮细胞表达血管细胞黏附分子-1

细胞黏附分子涉及许多生理和病理过程 ,如动脉粥样硬化 (AS) [1] 。有些因素可能诱导细胞黏附分子的表达 ,如氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)诱导培养的内皮细胞表达血管细胞黏附分子 1(VCAM 1) [2 ] 。这提示细胞黏附分子可能是导致AS的一种重要因素。我们拟用氧化剂联胺处理培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,诱导其脂质过氧化损伤 ,观察其VCAM 1mRNA和蛋白表达 ,为抗氧化剂防治AS提供实验依据。一、材料与方法1 HUVEC培养与分组 :用胰酶消化法获取HUVEC ,培养于M199培养基 (Gibco公司产品 ) ,含 5 %新生牛血清、10 %胎牛血清、5 …     

平滑肌细胞源性趋化因子的研究

以兔主动脉平滑肌细胞条件培养基作为趋化因子的来源,用微孔滤膜法检测其对平滑肌细胞及NIH 3T3纤维母细胞的趋化活性。结果表明,该条件培养基对培养的平滑肌细胞有明显的趋化活性,而对NIH 3T3纤维母细胞则否;该条件培养基对平滑肌细胞的迁移作用是一种趋化作用而非化学促动作用。     

脱氢表雄酮通过抑制血管细胞粘附分子1的表达发挥抗动脉粥样硬化作用

目的研究脱氢表雄酮能否通过抑制血管细胞粘附分子1的表达发挥抗动脉粥样硬化作用以及维甲酸受体激动剂对这一作用有无影响。方法高脂饮食构建兔动脉粥样硬化模型并加脱氢表雄酮干预,10周后检测各组兔血清脂质水平及主动脉斑块情况。采用免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应方法观察脱氢表雄酮对高脂喂饲兔主动脉壁血管细胞粘附分子1表达的影响。体外培养THP-1单核细胞,采用免疫细胞化学及逆转录聚合酶链反应方法观察不同浓度脱氢表雄酮对氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1细胞表达血管细胞粘附分子1的影响。结果脱氢表雄酮干预的高脂喂饲兔主动脉内膜厚度及粥样斑块面积相对动脉粥样硬化模型组兔分别降低59%和48%;同时兔主动脉血管细胞粘附分子1蛋白的表达在脱氢表雄酮干预后(0.1920±0.0034)较高脂喂饲兔(0.3846±0.0198)显著减弱,血管细胞粘附分子1 mRNA的表达(0.6856±0.0286)与高脂喂饲兔(1.0893±0.1089)相比也明显减少。体外培养的THP-1细胞中,加入不同浓度的脱氢表雄酮均可降低氧化型低密度脂蛋白诱导细胞的血管细胞粘附分子1表达,在脱氢表雄酮浓度为5μmol/L时THP-1细胞中血管细胞粘附分子1 mRNA的表达(0.2988±0.0312)较氧化型低密度脂蛋白诱导组(0.6236±0.0237)下降明显。加入全反式维甲酸对脱氢表雄酮的作用没有显著影响(P>0.05)。结论脱氢表雄酮能够抑制高脂喂饲兔主动脉壁及氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1细胞内血管细胞粘附分子1的表达,这可能是其发挥抗动脉粥样硬化作用的机制之一,而补充维甲酸受体激动剂对这一过程中血管细胞粘附分子1的表达没有明显影响。     

Partial Purification of Smooth Muscle Cell Derived Growth Factor

ＰａｒｔｉａｌＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＳｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅＣｅｌｌＤｅｒｉｖｅｄＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＹＡＮＧＳｈｉｌｉｎ（杨仕林），ＤＥＮＧＺｈｏｎｇｄｕａｎ（邓仲端），ＱＵＺｈｉｌｉｎｇ（瞿智玲）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏ...     

PPARα激动剂对培养的人单核细胞表达MIP-1α的影响

目的　探讨过氧化物酶体增殖剂激活受体α (PPARα)的激活对单核细胞处于正常状态或脂质过氧化损伤时表达巨噬细胞炎性蛋白 1α (MIP 1α)的影响。方法　将培养的单核细胞分为 :①对照组 ;②联胺组 ;③不同浓度的Wy14 6 4 3组 ;④不同浓度的Wy14 6 4 3 联胺组 ;⑤不同作用时间Wy14 6 4 3组 ;⑥不同作用时间Wy14 6 4 3 联胺组。免疫细胞化学法检测各组细胞MIP 1α蛋白的表达。结果　暴露于联胺后 ,人单核细胞MIP 1α蛋白的表达增强(P <0 0 1) ;PPARα的激动剂在有或无脂质过氧化损伤时均能明显诱导人单核细胞MIP 1α蛋白的表达 (P <0 0 1) ,但随着时间的延长可有下降。结论　PPARα参与了MIP 1α蛋白在单核细胞中表达的调节从而参与了动脉粥样硬化的发生。     

人参皂甙对内毒素致血管内皮细胞表达TF和PAI-1的影响

目的:研究人参皂甙对内毒素脂多糖(LPS)致血管内皮细胞组织因子(TF)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的影响,探讨人参皂甙对心血管疾病的保健及防治机制。方法:用酶消化法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC);ELISA方法检测HUVEC条件培养液PAI-1蛋白量;用一步凝固法检测HUVECTF活性;Northernblot检测HUVECTF和PAI-1的mRNA表达。结果:LPS能使HUVECPAI-1蛋白和TF活性及其mRNA表达显著增强,人参皂甙则明显抑制LPS对HUVEC的这种作用。结论:通过拮抗LPS致HUVECTF和PAI-1的表达,人参皂甙可维持血管内皮功能稳定,而发挥其心血管疾病的保健与防治作用。     

TGF-β1-induced LPP expression dependant on Rho kinase during differentiation and migration of bone marrow-derived smooth muscle progenitor cells

Lipoma preferred partner(LPP) has been identified as a protein which is highly selective for smooth muscle progenitor cells(SMPCs) and regulates differentiation and migration of SMPCs,but mechanisms of LPP expression are not elucidated clearly.The aim of the present study was to discuss the mechanisms by which LPP expression is regulated in the differentiation and migration of SMPCs induced by TGF-β1.It was found that TGF-β1 could significantly increase the expression of LPP,smooth muscle α-actin,smooth muscle myosin heavy chain(SM-MHC),and smoothelin in SMPCs.Moreover,inactivation of Rho kinase(ROK) with ROK inhibitors significantly inhibited LPP mRNA expression in TGF-β1-treated SMPCs and mouse aortic smooth muscle cells(MAoSMCs).At the same time,LPP silencing with short interfering RNA significantly decreased SMPCs migration.In conclusion,LPP appears to be a ROK-dependant SMPCs differentiation marker that plays a role in regulating SMPCs migration.     

内皮细胞脂质过氧化损伤与平滑肌细胞增殖的关系

用联胺作用于培养的人脐静脉内皮细胞引起其脂质过氧化损伤，用抗碱性纤维母细胞生长因子单克隆抗体和抗血小板源性生长因子ＢＢ多克隆抗体进行免疫组织化学染色，以检测内皮细胞暴露于联胺前后和ＰＤＧＦ－ＢＢ的表达，以及其条件培养基对平同细胞内ｂＦＧＦ表达的影响。用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察内皮细胞暴露于联胺后其条件培养基对ＳＭＣ是否有增殖活性，结果显示，联胺引起内皮细胞脂质过氧化损伤后，其ＰＤＧＦ－ＢＢ和ｂＦＧ