胃肠道间质瘤相关PDGFRA基因突变体功能的研究

目的 探讨胃肠道间质瘤中一个新的PDGFRA基因突变位点L839P在肿瘤发生发展中的恶性转化作用.方法 采用脂质体法,将重组质粒稳定转染中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO).应用Western blot法,检测PDGFRA蛋白的表达情况.应用细胞计数法,描绘细胞生长曲线;应用流式细胞仪榆测细胞周期及细胞凋亡,并观察稳转突变型重组质粒CHO细胞在裸鼠体内的成瘤性.将PDGFRA突变型与kit野生型重组质粒共同瞬时转染CHO细胞,用Western blot法检测kit蛋白的表达及其磷酸化状态.结果 阴性对照组、实验组及阳性对照组细胞中均有PDGFRA蛋白表达.实验组和阳性对照组较阴性对照组和空白对照组细胞生长速度加快;空白对照组、阴性对照组、实验组和阳性对照组处于增殖期的细胞比例分别为28.4%、24.5%、43.8%和40.9%,凋亡率分别为1.8%、1.9%、1.5%和1.6%.接种阳性对照组及实验组稳转细胞的裸鼠,3周后均见肿瘤生长.PDGFRA突变型质粒与kit野生型质粒共转染CHO细胞后,磷酸化kit蛋白表达明显增强.结论 PDGFRA基因L839P点突变为功能获得性突变,对正常细胞有较强的恶性转化作用,并口丁激活kit蛋白,导致肿瘤发生.     

人源幼虫巨大致死性基因Hugl-1在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨人源幼虫巨大致死性基因Hugl-1在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法利用实时荧光定量RT-PCR和原位杂交技术检测31例卵巢癌组织及其相应的癌旁组织中Hugl-1 mRNA的表达量,并结合卵巢癌的临床病理特点进行分析。结果 Hugl-1 mRNA在卵巢癌组织中的表达量高于癌旁卵巢组织[(0.051±0.029)vs(0.026±0.043),P0.01]。Hugl-1 mRNA的表达量与卵巢癌患者的年龄、血清CA125、肿瘤病理特征及临床分期无关。结论 Hugl-1在卵巢癌的发生发展中起着一定作用。     

胃肠道间质瘤中干细胞因子的表达及与其细胞增殖的关系

目的研究干细胞因子(SCF)在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达,及其与GIST细胞增殖的关系。方法收集GIST标本共68例,包括石蜡组织47例和新鲜组织21例,免疫组织化学及Western blot方法检测GIST组织中SCF表达,分析SCF表达与肿瘤部位、大小、病理性核分裂象/50HPF、危险度分级及Ki-67指数的关系。检测GIST标本中c-kit基因的突变状态,分析其与SCF表达的关系。结果 68例GIST组织中,SCF表达率为76%(52/68)。SCF表达阳性的GIST组织中,Ki-67增殖指数和病理性核分裂象明显增高、增多。SCF的表达与c-Kit基因的突变状态无明显相关。结论 GIST组织中存在SCF的自分泌,SCF表达可能促进肿瘤细胞增殖。     

乳腺癌HER2基因扩增检测方法——显色原位杂交法的应用及优化

目的:应用显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization,CISH)检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)基因扩增情况,并对操作方法进行优化.方法:选择免疫组织化学(IHC)EnVision法检测结果2 及以上的60例乳腺癌组织作为研究对象,应用CISH技术检测其HER2基因扩增情况,分析二者结果的相关性;总结CISH操作经验,优化操作方法.结果:44例标本IHC检测HER2蛋白表达为3 ,其中40例CISH检测呈现HER2基因高倍扩增,4例无扩增;基因扩增与蛋白表达的符合率为91%.16例IHC检测HER2表达为2 标本基因扩增与蛋白表达的符合率为50%.IHC与CISH符合率为80%(48/60),二者明显相关(P＜0.01).操作过程中应严格控制切片厚度,一般要求4～5 μm;杂交变性一定要彻底,杂交后的洗涤温度和时间也很重要,最好控制在70～75℃;要严格控制苏木精衬染时间;每次实验最好有阳性对照片,可以有效进行质量控制.结论:CISH检测乳腺癌HER2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果符合率较高,可作为乳腺癌HER2基因检测的一项新技术;但在具体操作时,应注意严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间以及苏木精衬染时间等因素.     

HE退行性染色及其在改良美蓝染色中显示幽门螺杆菌的应用

正随着免疫组化和分子病理学技术的迅猛发展,特殊染色技术在病理诊断工作中已被日渐忽略。然而在临床病科理诊断工作中,经常遇到HE染色难以明确诊断情况,由于组织病变微小、组织本身微小或会诊白片数量有限,而又无有效组织或白片继续进一步染色来辅助病理诊断时,需将现有的HE切片褪色后再行其它染色以明确诊断,因此特殊染色便有了不可或缺的地位。幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)     

探讨病理学实习课SPOC混合教学模式

随着5G网络科技、云计算、人工智能、移动通信等前沿科技不断发展和迭代, 为各种课程的教学实现线上学习提供了支撑平台。加之近年来新型冠状病毒感染在全球的不断蔓延, 各种形式的线上教学或学习得以普及和迅猛发展。本文结合本校线上教学实践的经验重点讨论采取SPOC混合模式进行病理实习课教学是否能满足该课程的专业要求和顺应线上教学发展。可以看出病理实习课采用SPOC混合教学模式能最大限度利于优质教学资源, 提升病理教学识图与新技术的融合, 对改革和提升病理学教学质量大有裨益。     

SMARCA4缺失型非小细胞肺癌12例临床病理特征

目的 探讨SMARCA4缺失型非小细胞肺癌的临床病理学特征。方法 回顾性分析12例SMARCA4缺失型非小细胞肺癌的临床病理学特征,行HE及免疫组化染色,并复习相关文献。结果 12例标本中根治标本6例,穿刺标本6例,患者平均年龄65岁,男性11例,女性1例。其中9例有长期吸烟史。眼观：肿瘤最大径1～6.8 cm,均为灰白色肿物,伴有坏死和出血。镜下见肿瘤均由弥漫一致的大圆细胞构成,成片分布,填充肺泡腔式生长,可见坏死及核分裂象。免疫表型：肿瘤细胞CK及CK7均弥漫阳性,vimentin、TTF-1、NapsinA、CgA、CD34、ALK、ROS1、NUT均阴性,INI-1均阳性,Hep Par1均不同程度阳性。除1例腺鳞癌(鳞状细胞癌区域SMARCA4阳性)外,其余11例肿瘤细胞SMARCA4均完全阴性。1例肿瘤细胞CD56、Syn少量阳性,1例SALL4少量阳性,其余肿瘤细胞上述标志物均阴性。3例部分肿瘤细胞p63及p40阳性,余肿瘤细胞均阴性。4例肿瘤细胞SOX2阳性。2例p53为突变型,其余为野生型。7例CK5/6不同程度阳性。9例Ki-67增殖指数>70%,3例增殖指数...     

原发性网膜、肠系膜间质瘤的临床病理及免疫组织化学研究

为探讨网膜，肠系膜间质瘤临床病理，免疫组织化学特征，对8例网膜，肠系膜间质瘤作了临床病理形态学观察和免疫组织化学分析，而且所有肿瘤均获得随访资料。结果表明，肿瘤为单发结节，体积大，组织学上主要由具有哮酸性胞浆及核两端存在细胞浆空泡的梭形细胞构成，部分肿瘤可见上皮样细胞等平滑肌分化证据，免疫表型特特为：8例（100％）肿瘤C－kit均性，7例（87．5％）CD34阳性，6例（75％）SMA呈局灶性或散在阳性，2例恶性间质瘤p53,PCNA表面阳性，良性病例中1例PCNA低水平表达，结果提示，网膜，肠系膜间质瘤有其独立临床病理特征，免疫组化C-kit,CD34标记物对网膜，肠系膜间质瘤具有重要意义。     

第420例——发热、腹水、贫血

 患者男性,53岁,行政人员。因发热伴腹泻、贫血11 d,于2011年6月19日入院。2011年6月8日患者无明显诱因出现发热,腋下体温38.5℃,后波动于37～38℃之间,多于傍晚开始升高,凌晨可自行降至正常。伴盗汗、腹泻,腹泻每日2～3次,为糊状、不成形稀便,无腹痛、黑便、黏液脓血便、果酱样便。在当地医院就诊,查白细胞计数9.27×10⁹/L,中性粒细胞百分比为75.4%,Hb 98 g/L;C反应蛋白（CRP）86.97 mg/L;ESR 115 mm/1h;便常规阴性;抗核抗体（ANA）、抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）均阴性,肿瘤标志物（具体不详）阴性。胸部CT未见明显异常。肠镜：慢性结肠炎。予左氧氟沙星、奥硝唑抗感染（具体治疗剂量不详）治疗,效果欠佳,为进一步诊治收入我院。既往史：2010年9月17日在当地医院行右腹股沟斜疝修补术,术后疝囊病理报告：疑似恶性间皮瘤。病理切片经某医科大学附属医院会诊并行免疫组化检测,报告：间皮组织反应性增生。进一步行荧光原位杂交技术（FISH）检测,见图1,根据9号染色体上短臂21区（9p21）未出现缺失,故排除恶性间皮瘤。否认外伤史、输血史,否认结核、肝炎等传染病史,否认食物、药物过敏史,否认家族遗传病史。否认吸烟、饮酒史。     

重组腺病毒介导的血管生成素改善缺血性心脏病的实验研究

目的观察重组腺病毒介导的血管生成素促进慢性缺血心肌血管生成,并改善心肌血流灌注和心功能的有效性。方法置Ameriod环建立猪慢性心肌缺血模型,并随机分为3组,血管生成素腺病毒组,空病毒组,对照组。分别心内注射腺病毒介导的血管生成素基因、空病毒和生理盐水。通过冠状动脉造影、心脏超声、核磁心肌灌注成像、病理学观察等评价血管生成素的治疗效果。结果置环后的猪均为有效的动物模型。注射血管生成素的缺血心肌模型侧支血管增生明显,血管计数增加,Rentrop分数、面积变化分数改善,梗死区缩小,缺血区血管密度增高尤其是内皮细胞、平滑肌细胞增加,凋亡细胞减少、细胞之间的黏附性增加。结论腺病毒介导的血管生成素基因治疗缺血性心脏病可明显改善心功能,使局部血液循环明显改善。