组织激肽释放酶、绿色荧光蛋白双基因共表达载体的构建及其对平滑肌细胞增殖的影响

目的构建人组织激肽释放酶（HKl）和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的逆转录病毒双基因共表达载体并探讨其对血管平滑肌细胞（SMCs）增殖的影响。方法采用聚合酶链反应（PCR）技术扩增人HKl基因，通过基因重组构建HKl和EGFP逆转录病毒双基因共表达载体，经酶切及测序鉴定正确后，包装成为重组逆转录病毒rRV-HKl-IRES-EGFP，病毒感染SMCs细胞后，荧光显微镜和Western blot检测HKl基因的表达情况。结果成功构建了带有EGFP的HKl基因的逆转录病毒表达载体，并将其转入SMCs细胞，感染后SMCs增殖受到抑制。结论构建的HKl基因逆转录病毒可在体外高效表达，为HKl基因治疗的研究奠定了基础。     

一种新的大鼠同种主动脉瓣异位移植模型

目的 探讨建立一种主动脉瓣异位移植动物模型，用于研究同种心脏瓣膜的保存。方法 受体供体均采用雌性Wistar大鼠，各40只。整块切取受体心脏。保留完整的t动脉瓣、少量心室肌和部分二尖瓣前叶，构建移植物。将移植物与受体腹主动脉端一侧吻合。结果 术后28d，80％受体存活，无下肢瘫痪，移植物搏动良好，切开移植物肉眼观未见血栓，主动脉瓣位于正常位置且活动良好。受体死亡原因有血栓栓塞（12．5％）、术中出血（5．0％）和麻醉意外（2．5％）。结论 此模型可广泛应用于同种心脏瓣膜保存方法等研究，是较理想的模型。     

缺血对移植心脏冠状血管的影响

目的 探讨缺血对移植心脏远期冠状血管的形态学影响。方法 雄性Wistar大鼠为供者和受者，建立大鼠腹部异位心脏移植模型。实验分为4组，即假手术对照组、立即移植组、供心缺血3h移植组和缺血6h移植组。每组术后均用环孢素A(CsA)灌胃20d，抗排斥反应。20d时，取出供心，观察心脏冠状血管病理改变及超微结构变化。结果 假手术对照组心脏和立即移植组的供心冠状血管内皮超微结构均无明显损害；随着供心缺血时间的延长，移植后冠脉小血管内皮细胞肿胀，冠状动脉的内皮细胞增生，内膜增厚；缺血6h移植组供心冠状血管内膜超微结构改变非常明显。结论 供心缺血可导致移植后冠状血管内皮损伤，是心脏移植术后冠状血管病理改变的重要因素。     

利钠多肽对高血压患者并发心房纤颤和左室肥厚的预测价值

目的探讨利钠多肽对高血压患者并发心房纤颤(房颤)和左室肥厚的预测价值。方法选择高血压患者110例,根据是否合并房颤分为3组:A组为高血压并发持续性房颤40例,B组为高血压并发阵发性房颤30例,C组为高血压不伴房颤患者40例,检查3组患者的超声心动图、N端B型利钠多肽(Nt-proBNP)水平并进行比较。降压药物治疗1年后将110例患者列入D组即左室肥厚消退组62例和E组即未消退组48例,比较两组患者的Nt-proBNP、左房大小、房颤发生率和服药差异等。结果 A组与B组、C组患者的年龄、Nt-proBNP水平、左房内径(LAD)、室间隔厚度(IVST)、左室心肌质量指数(LVMMI)间差异有统计学意义(P<0.05);房颤的发生与Nt-ProBNP水平、IVST、左室后壁厚度(LVPWT)、LVMMI、LAD、左室舒张末内径(LVEDD)及年龄均呈正相关。D组与E组的Nt-ProBNP、LAD、LVEDD、IVST及阵发性房颤发生率间差异有统计学意义(P<0.05);D组与E组患者的ACEI和ARB的使用率间差异有统计学意义(P<0.05)。结论高血压伴左室肥厚、左房扩大是房颤的危险因素;降压治疗可使左室肥厚消退和左房缩小从而减少房颤的发生;Nt-proBNP水平与左室肥厚、房颤的发生相关。     

基质金属蛋白酶组织抑制因子3基因转染血管平滑肌细胞移植对急性心肌梗死后早期心肌重塑的影响

目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3（tissue inhibitor-3of matrix metalloproteinases,TIMP-3）基因转染血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）移植,对急性心肌梗死（acute myocardialinfarction,AMI）后早期心脏结构变化的影响,并探讨其可能的机制。方法取Wistar大鼠胸主动脉采用组织块贴壁法培养VSMCs。另取61只Wistar雌性大鼠建立左冠状动脉远端结扎的AMI动物模型,将存活的54只大鼠模型随机分为三组,每组18只。于冠状动脉结扎后立即向缺血部心室壁内注射含有1×10^6个TIMP-3基因转染VSMCs（A组）、1×10^6个VSMCs（B组）或不含细胞的PBS液（C组）各0.5ml。术后1周,进行心脏形态学检测观察大鼠心脏结构变化,免疫组织化学染色验证TIMP-3基因转染VSMCs在缺血心肌中的存活情况,Western blot法测定大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase9,MMP-9）蛋白的含量。结果成功分离、培养VSMCs,纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中。术后1周,A组大鼠梗死心肌面积占左室游离壁面积的百分比为28.73%±1.56%,小于B组39.63%±1.84%和C组46.32%±2.16%（P〈0.01）;B组小于C组（P〈0.01）。A组大鼠左室容积指数为5.27±0.21mm3/g,小于B组6.69±0.34mm3/g和C组9.67±0.88mm3/g（P〈0.01）;B组小于C组（P〈0.01）。免疫组织化学染色见TIMP-3基因转染VSMCs被成功植入缺血心肌并在其中存活。Western blot法示A组大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白含量为300704.8±3692.8,高于B、C组的195548.8±3014.2及177991.1±2502.1（P〈0.01）;B组高于C组（P〈0.01）。A组MMP-9蛋白含量为594827.4±5708.5,低于B、C组的921461.4±8887.4及1044445.0±8788.6（P〈0.01）;B组低于C组（P〈0.01）。结论将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制AMI后早期心肌重塑。     

运用近红外光谱法建立肠虫清的一致性检验模型

目的 应用近红外光谱法对肠虫清（即中美天津史克制药有限公司生产的阿苯达唑片）进行一致性检验.方法 将收集的 10批肠虫清扫描近红外光谱图和进行预处理,建立一致性检验方法.结果 一致性检验模型可以显著区分与该厂家样本主成分相同的其他厂家样本.结论 本方法快速简便,结果准确,适用于假劣药品的快速筛查.     

经典干细胞标志物CD34、PDGF-βR、VEGF-R_2在早孕蜕膜组织中的表达研究

目的研究经典干细胞标志物CD34、PDGF-βR、VEGF-R_2在早孕6～8周蜕膜组织中的表达。方法提取6～8周早孕期人工流产术蜕膜组织(n=16),消化后选用CD34、PDGF-βR、VEGF-R_2单克隆抗体进行荧光染色,分别采用单染、双染及三染法,应用流式细胞仪技术分析上述经典干细胞标志物的表达及其相互关系。结果 6～8周早孕期蜕膜组织细胞中,(1)单染法证实CD34~+细胞为(0.81±1.07)%,PDGF-βR~+细胞为(9.94±7.36)%,VEGF-R_2~+细胞为(0.90±1.19)%;(2)双染法证实CD34~+/VEGFR2~-细胞(0.59±0.61)%,CD34~+/VEGF-R2~+细胞(0.16±0.10)%;(3)三染法证实CD34~+/VEGFR2~+/PDGF-βR~+细胞(0.09±0.06)%,CD34~+/VEGFR2~-/PDGF-βR~+细胞(0.15±0.13)%。结论早孕6～8周蜕膜组织中存在经典干细胞标志物CD34、PDGF-βR、VEGF-R_2阳性表达的细胞,存在少量的双阳性表达及三阳性表达的细胞。早孕蜕膜组织中存在干细胞参与其发育过程。