间充质干细胞来源外泌体对视网膜光感受器细胞PI3K/AKT通路及Ang-1蛋白水平作用的研究

目的 探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)下外泌体对视网膜光感受器细胞PI3K/AKT通路及Ang-1蛋白水平的影响。 方法 应用免疫印迹检测人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)外泌体表面标志蛋白CD63及CD90 ,应用流式细胞仪检测光损伤661W细胞凋亡,应用免疫荧光检测Ang-1,应用免疫印迹检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。 结果 形态学及免疫印迹检测CD63、CD90表达结果证实h UCMSCs外泌体。线粒体膜电位检测结果以及细胞形态学鉴定661W细胞建立光损伤模型成功。流式细胞仪、免疫荧光检测结果显示,与正常组比较模型组细胞凋亡率及Ang-1阳性表达增加,在经过h UCMSCs干预后有所降低,且呈现出明显的浓度依赖性（P<0.05）。免疫印迹结果显示,与正常组比较,模型组PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT表达降低,经过h UCMSCs干预后有所升高（P<0.05）,且高浓度组PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT表达水平与激动剂组比较无差异（P>0.05）,模型组PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT表达水平高于抑制剂组（P<0.05）。 结论 间充质干细胞下外泌体可能是通过激活PI3K/AKT通路,抑制了视网膜光感受器细胞的凋亡以及Ang-1的水平,从而对光损伤视网膜起保护作用。     

唐山山区野生药用双子叶植物资源及其多样性研究

目的：研究唐山山区野生药用双子叶植物资源的种类与多样性,为药用植物资源的开发利用提供依据。方法：深入各代表性样地进行药用植物资源调查,采集、鉴定标本,查阅文献资料等。结果：初步调查结果显示唐山山区有野生药用双子叶植物92科251属321种。结论：唐山山区野生药用双子叶植物资源丰富并具多样性,具有较好的开发利用前景。     

唐山地区野生药用植物资源开发利用价值评价初步研究简

目的：评价唐山地区的野生药用植物资源的开发利用价值,为药用植物资源的综合开发利用提供依据。方法：在药用植物资源调查的基础上,采用系统工程论中的层次分析法定量评价唐山地区野生药用植物资源的开发利用价值,筛选出可供开发利用的药用植物资源。结果：初步调查及评价结果显示唐山地区可供开发利用的药用植物资源有62种。结论：唐山地区可供开发利用的野生药用植物资源丰富,应制定综合开发利用及保护规划,综合开发利用各药用植物资源,并保持生态资源的可持续发展。     

荷载甘草酸EL100-55/PLGA肠溶纳米粒的制备及其对葡聚糖硫酸钠诱导结肠炎的治疗作用

目的 制备荷载甘草酸Eudragit L100-55/聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物肠溶纳米粒[glycyrrhizic acid loaded Eudragit L100-55/poly （lactic-co-glycolic acid） enteric nanoparticles,GA@EL100-55/PLGA NPs],并考察其对葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate,DSS）诱导结肠炎模型小鼠的治疗作用。方法 采用复乳化溶剂蒸发法制备GA@EL100-55/PLGA NPs,并对其形貌、粒径大小、表面ζ电位等理化性质进行表征;以体质量及结肠长度变化为指标,考察其对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗效果。以细胞膜红色荧光染料1,1''-dioctadecyl-3,3,3'',3''-tetramethylindodicarbocyanine,4-chlorobenzenesulfonate salt （DiD）为探针,探讨纳米粒在肠道的滞留情况。结果 GA@EL100-55/PLGA NPs外观呈圆球状,平均粒径为（166.0±3.4） nm,ζ电位为（-7.17±0.22） mV;包封率及载药量分别为（91.51±0.26）%和（5.35±0.01）%。体外释放结果提示,GA@EL100-55/PLGA NPs具有pH值响应特性及缓释效果。药效学实验证明GA@EL100-55/PLGA NPs能够对DSS诱导的溃疡性结肠炎模型小鼠具有保护作用。结论 GA@EL100-55/PLGA NPs为甘草酸在治疗溃疡性结肠炎提供新的递送形式。     

艾叶水提物及其发酵物对小鼠白色念珠菌性阴道炎的治疗作用

目的:观察艾叶水提物及其发酵物对白色念珠菌性阴道炎的治疗作用。方法:采用小鼠阴道内接种1×107cfu/mL白色念珠菌悬液20μL,建立白色念珠菌阴道炎模型。将成模小鼠随机分为模型对照组、艾叶水提物组[(生药,下同)20g·L-1]、艾叶发酵物低、中、高剂量组[(生药,下同)10,20,40 g·L-1]及氟康唑组(2 g·L-1),另设空白对照组,每组15只。镜检各组小鼠阴道灌洗液白色念珠菌及脱落上皮细胞,并计算其转阴率,测定阴道灌洗液菌落形成单位(CFU),HE染色观察各组小鼠阴道组织病理改变。结果:模型对照组各小鼠阴道灌洗液均可见白色念珠菌感染,但空白对照组未见。与模型对照组比较,给药后第5,8天艾叶发酵物各剂量组及氟康唑组均能显著增加白色念珠菌孢子及脱落细胞转阴率,降低CFU数量,减轻阴道组织损伤(P<0.05,P<0.01),且艾叶发酵物于给药第8天,中、高剂量组上述指标结果更显著(P<0.01);而艾叶水提物组与模型对照组比较上述各指标无差异。结论:艾叶发酵物对白色念珠菌阴道炎小鼠具有显著治疗作用,艾叶水提物疗效较艾叶发酵物差。     

银耳多糖对实验性2型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响

目的:观察银耳多糖对链脲佐菌素(STZ)和高能量饲料诱发的2型糖尿病模型大鼠血糖、血脂的影响。方法:取Wister雄性大鼠65只,随机分为正常组、糖尿病和模型对照组、银耳多糖低中高剂量治疗组及罗格列酮治疗组,除正常组外,其他各组均采用高能量饮食4周后小剂量腹腔注射STZ的方法建立2型糖尿病大鼠模型。持续给药8周后测空腹血糖、血脂的含量。结果:采用高能量饮食加STZ诱发的2型糖尿病大鼠空腹血糖、血清TG(甘油三酯)、TCH(总胆固醇)、LDL(低密度脂蛋白)水平明显高于正常对照组(P<0.05),HDL(高密度脂蛋白)明显下降(P<0.05);银耳多糖可降低2型糖尿病模型大鼠的血糖、TG、TCH及LDL水平,升高HDL水平,与模型组比较有明显改善(P<0.05),与罗格列酮药物治疗组无显著性差异(P>0.05)。结论:银耳多糖能有效地降低2型糖尿病模型大鼠的血糖,调节血脂。     

血清FPG 及HbA1c 水平检测对2 型糖尿病继发干眼症的预测价值研究及危险因素分析

目的　探讨血清空腹血糖（fasting blood glucose,FPG）及糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin,HbA1c） 水平检测对2 型糖尿病继发干眼症的预测价值研究及危险因素分析。方法　选择唐山市眼科医院2017 年8 月～ 2019 年8 月收治的60 例2 型糖尿病继发干眼症患者为干眼症组,另外纳入同期于该院治疗的60 例2 型糖尿病患者为糖尿 病组。对比两组基础资料（年龄、性别、病程、泪腺功能、胰岛素分泌以及FPG,HbA1c 水平）,采用ROC 曲线分析 FPG,HbA1c 水平预测2 型糖尿病患者发生干眼症价值;采用Logistic 回归分析模型,明确2 型糖尿病患者发生干眼症 的危险因素。结果　经单因素分析,两组年龄、性别以及病程比较,差异无统计学意义（t=0.134, χ2=0.186,t=0.223, 均P ＞ 0.05）;干眼症组存在泪腺功能障碍、胰岛素分泌不足患者显著多于糖尿病组,差异有统计学意义（χ2=5.829,8.336, 均P ＜ 0.05）;干眼症组FPG,HbA1c 水平显著高于糖尿病组,差异有统计学意义（t=2.922,5.925,均P ＜ 0.05）。 经ROC分析FPG 和HbA1c 的曲线下面积分别为0.738 和0.701,标准差分别为0.045 和0.047,95%CI 分别为0.651 ～ 0.825 和0.609~0.794,最佳截断值分别为8.765mmol/L 和6.875%,敏感度分别为0.567 和0.933,特异度分别为0.750 和0.400。 经Logistic 回归性分析证实存在泪腺功能障碍、胰岛素分泌不足、FPG ＞ 8.765mmol/L 以及HbA1c ＞ 6.875% 是2 型糖 尿病患者发生干眼症的危险因素。结论　影响2 型糖尿病患者发生干眼症的危险因素较多,如存在泪腺功能障碍、胰岛 素分泌不足以及FPG,HbA1c,其中FPG ＞ 8.765mmol/L 和HbA1c ＞ 6.875% 是预测2 型糖尿病患者发生干眼症的最佳 截断值,在预防2 型糖尿病患者发生干眼症的过程中具有一定的参考价值,临床应当关注。     

艾叶发酵物治疗系统性白念珠菌感染

目的：观察艾叶发酵物对系统性白念珠菌感染的治疗作用,并探讨其可能机制。方法建立免疫抑制小鼠系统性白念珠菌感染模型。将模型小鼠随机分为模型对照组,艾叶发酵物小、中、大剂量组（100,200,400 mg·kg-1）及氟康唑组（20 mg·kg-1）,每组30只。小鼠灌胃给予相应治疗药物,bid,连续给药5 d。计算模型建立后21 d各组小鼠生存率,酶联免疫吸附（ELISA）法测定小鼠血清γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）水平,噻唑蓝（MTT）法检测小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性,平板计数法测定小鼠肝、肾组织活菌数目。结果与模型对照组比较,艾叶发酵物中、大剂量组和氟康唑组小鼠存活率,血清IFN-γ、IL-2水平及脾脏T淋巴细胞增殖活性均较高,而肝、肾组织白念珠菌数目较低（P〈0.01）;与艾叶发酵物小剂量组比较,中、大剂量组和氟康唑组上述各指标变化更显著（P〈0.05或P〈0.01）,但中、大剂量组与氟康唑组间比较,各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论艾叶发酵物200~400 mg·kg-1对系统性白念珠菌感染有一定治疗作用,其机制可能与其提高T淋巴细胞增殖活性及IFN-γ、IL-2水平相关。     

饲料n-3多不饱和脂肪酸含量对仔鼠脑神经元、胶质细胞和髓鞘发育的影响

【目的】探讨孕期及哺乳期饲料中n-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)含量变化对仔鼠脑组织结构的影响。【方法】使用6~8周龄清洁级C57BL/6J雌性小鼠,分别给予4种不同含量的鱼油n-3 PU-FAs(n-6/n-3 PUFAs比值分别为20∶1、10∶1、5∶1和1∶1)饲料和1种亚麻油n∶3 PUFAs饲料(n∶6/n∶3 PUFAs比值为1∶1)喂养6周;以n∶3 PUFAs缺乏饲料为对照。小鼠饲养至12~14周龄时雌雄合笼交配繁殖,新生仔鼠21日龄断乳时处死,取脑进行组织固定。采用免疫组织化学技术对脑组织神经特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)进行分析。【结果】与n∶3 PU-FAs缺乏组相比,n∶3 PUFAs饲料喂养组小鼠脑皮质30区及海马CA3区NSE阳性细胞平均光密度、海马CA1区GFAP阳性细胞平均光密度及面数密度、胼胝体及海马纤维MBP平均光密度均显著增加。上述指标在n-6/n-3 PUFAs(5∶1)和(1∶1)组之间未存在差异,但均显著高于(10∶1)和(20∶1)组。与亚麻油n-3 PUFAs饲料组相比,上述指标在n-6/n-3 PU-FAs(1∶1)鱼油饲料组明显升高。【结论】需要摄入较高含量的n-3 PUFAs(n-6/n-3 PUFAs比例在5∶1以下)才能更好地满足脑神经元、星形胶质细胞及髓鞘的发育需求;亚麻油来源的亚麻酸不如鱼油中的二十二碳六烯酸效果好。     

动物眼视网膜冰冻切片制作方法

目的探索动物眼视网膜的冰冻切片方法,以期得到高质量的切片。方法采用LeicaCM1900冰冻切片机,制作猪视网膜冰冻切片50余例,鼠视网膜冰冻切片130余例,观察其组织结构。结果去除其他组织及液体的影响是视网膜切片的关键,以保持良好的组织形态。结论所有组织和细胞切片的一个重要环节就是尽可能地保存组织和细胞以再现其生活状态,因此切片前固定、脱水及其他处理起着非常关键的作用。