四甲基偶氮唑盐比色法细胞株细胞数量的选择

四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法由于具有快速简便、无同位素污染等优点而被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性试验[1] 。但不同细胞其生物学性状不同 ,所用细胞数量也应不同。我们以PC12和CHO细胞株为模型 ,于 2 0 0 3年 8— 9月对MTT比色法的条件及影响因素进行了探讨 ,寻求最佳条件。1　材料与方法1.1　试剂　RPMI— 16 4 0培养基 ,DMEM培养基 ,马血清(GIBCOBRL ) ;四甲基偶氮唑盐 (AmericanBiotecholog ,MTT) ;二甲基亚砜 (SigmaDMSO) ;无水乙醇 (天津北辰骅跃化学试剂厂 ) ;十二烷基硫酸钠 (BIOMOL ,SDS) ;胎牛血清 ,新生小…     

重复经颅磁刺激对帕金森病鼠纹状体生长相关蛋白和突触素表达的影响

目的 探讨重复经颅磁刺激 (repetitive transcranial magnetic,rTMS)对帕金森病(PD)模型鼠纹状体生长相关蛋白(Growth activty protein-43,GAP-43)和突触素(synaptophysin,p38)表达的影响.方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组,PD模型组,假磁刺激(srTMS)组,rTMS组,每组10只.小鼠皮下注射MPTP(15 mg·kg-1·2 h-1·次-1,注射4次)复制PD模型,rTMS干预,利用免疫组织化学染色技术检测GAP-43和p38的表达变化,并借助图像分析系统对其进行定量分析.结果 PD模型组、srTMS组及rTMS组GAP-43阳性产物较对照组明显增多,以rTMS组GAP-43表达升高最为明显,且着色深,PD模型组和srTMS组校正光密度值(COD)均明显高于对照组(P＜0.05),rTMS组COD显著高于对照组(P＜0.01)及PD模型组和srTMS组(P＜0.05).PD模型组和srTMS组及rTMS组p38表达较对照组反应产物明显减少,PD模型组和srTMS组 COD均显著低于对照组(P＜0.01),rTMS组 COD值明显低于对照组(P＜0.05),但rTMS组p38表达较PD模型组和srTMS组增多,COD显著高于PD模型组和srTMS组(P＜0.05).结论 rTMS可诱导受损的纹状体区GAP-43和p38的表达上调,从而推测rTMS可能通过促进轴突再生和突触重塑,进而对受损的多巴胺转运通路起修补作用,增加多巴胺转运,从而达到治疗作用.     

PINCH蛋白在垂体腺瘤中的表达及其意义

目的探讨垂体腺瘤中PINCH蛋白的表达程度及其与垂体腺瘤侵袭性的相关性。方法选取2005年1月—2007年1月50例垂体腺瘤患者,应用免疫组织化学技术检测37例侵袭性垂体腺瘤(侵袭组)、13例非侵袭性垂体腺瘤(非侵袭组)及15例正常脑组织(对照组)中PINCH蛋白的表达,并对结果进行分析。结果 3组的PINCH蛋白的阳性表达程度比较,差异有统计学意义(Hc=14.06,P<0.05)。Ⅲ～Ⅳ级垂体腺瘤中PINCH蛋白的阳性表达程度与Ⅰ～Ⅱ级比较,差异有统计学意义(χ2=6.05,P<0.05)。不同性别、年龄及肿瘤组织学分型的患者的PINCH蛋白在垂体腺瘤中的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PINCH蛋白的表达程度与垂体腺瘤Knosp分级呈正相关(r=0.9974,P<0.01)。结论 PINCH蛋白在侵袭性垂体腺瘤组织中呈现高表达,其阳性表达程度可能与垂体腺瘤的侵袭性和预后相关,但与患者的性别、年龄及肿瘤组织学分型无明显相关性。     

经颅磁刺激对海马原代神经元突起生长的影响

目的 观察经颅磁刺激(transcranial magnetic stimulation,TMS)对体外培养的海马原代神经元突起生长及形态的影响,并初步探讨磁刺激对细胞生长发育的影响机制.方法 体外培养的海马原代神经元分为正常培养组(C组),假刺激组(S组),40%最大刺激强度组(M1组),60%最大刺激强度组(M2组),培养细胞24 h后开始磁刺激,每天固定时间刺激,刺激的频率为1 Hz,磁刺激最大输出强度为1.9 T,每天刺激3次,每次20序列,每个序列间隔1 s,每次间隔1 min,连续刺激5 d,刺激源距离细胞1.0 cm.刺激结束后进行免疫荧光染色,观察原代神经元突起形态学改变,比较突起生长数目的 改变及SYN-I表达的改变.结果 TMS 5 d后观察细胞生长状态良好,细胞与细胞间联系较多,部分细胞表现为多突起生长.M1、M2组2个突起的神经元占总神经元的比例分别为(45.6±14.9)%和(45.2±15.6)%,较C组和S组明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05);3个及3个以上突起的神经元占总神经元的比例分别为(30.3±10.8)%和(29.3±11.5)%,较C组和S组亦明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05).M2组的SYN-I mRNA的表达较C、S两组增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TMS可以促进体外培养的海马原代神经元突起的生长.     

老龄帕金森病模型小鼠氧化应激相关基因的表达差异

目的：探讨老龄帕金森病( PD)模型小鼠行为学改变及黑质纹状体系统氧化应激相关基因的表达差异。方法10月龄快速老化P8系( SAMP8)小鼠16只,随机均分为对照组和模型组。模型组小鼠背部皮下注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶( MPTP)制成急性损伤模型,对照组小鼠给予同量生理盐水。给药后72 h进行行为学测试,高效液相色谱法检测黑质多巴胺( DA)含量,PCR Array检测其纹状体氧化应激相关基因的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠DA水平下降,行为学成绩下降,差异有统计学意义( P<0．01);环氧化酶-2、可诱导型一氧化氮合酶2、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸( NADPH)氧化酶基因表达上调;而谷胱甘肽过氧化物酶3、6、8等9种基因明显下调(改变倍数>2)。结论老龄PD模型小鼠氧化应激相关的基因发生上调或下调,导致氧化应激反应的发生。     

超声双功扫描在脑血管病临床的应用

本文应用超声双功扫描(Du)捡查了20例正常人及19例缺血性脑血管病(ICVD)患者的颅外颈动脉(CCA),24例做血管造影(AG)对照,结果如下。     

骨髓基质细胞对神经-干细胞分化为神经元的影响

采用细胞共培养方式和免疫化学染色方法,研究骨髓基质细胞对神经干细胞分化为神经元、星形胶质细胞和寡突胶质细胞的影响.实验发现,体外培养的中脑神经干细胞在与成年大鼠骨髓基质细胞共培养7 d后,在神经干细胞后代中神经元比例可达38.6%±10.8%,明显高于自然分化组20%,提示骨髓基质细胞提供的微环境可明显提高神经干细胞后代中神经元的比例.     

不同类型震颤的临床特点、发生机制及影响因素

目的：总结并分析各类震颤的特点及其机制和影响因素，为临床上各类震颤的鉴别及防治提供依据。 资料来源：应用计算机检索Medline 1998-01／2005-05关于震颤的文章。检索词“tremor”并限定文章的语种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库1994-01／2005-05的相关文章，限定文章语言种类为中文＋检索词“震颤”。 资料选择：对资料进行初审，纳入标准：①关于震颤的分类、病因、影响因素。②对具体事件的回顾调查研究。排除标准：排除重复性研究。 资料提炼：共收集到符合上述要求的文献48篇，排除31篇重复性研究。17篇符合纳入标准：其中9篇关于震颤的调查研究，8篇关于震颤的具体案例。 资料综合：震颤的分型主要有依据震颤表现形式及根据基础疾病的病因学分类。其中机械性震颤、中枢神经系统的反射、中枢性振荡器是震颤的发生机制。依据震颤表现形式分为静止性震颤、运动性震颤、特定性震颤、姿势性震颤、无定型震颤。依据震颤的不同病因又分为增强的生理性震颤、特发性震颤综合征（经典的特发性震颤、直立性震颤、任务和姿位特异性震颤、不能分类的震颤）、肌张力障碍性震颤、帕金森病震颤、小脑性震颤、红核震颤、周围神经病性震颤、药物及有毒物质诱发的震颤和心因性震颤＋临床上应根据不同的病因采取不同的治疗措施。 结论：震颤虽表现形式类似，但发生原因各不相同，临床上应根据不同的病因采取不同的治疗措施。     

血糖与卒中

高血糖是卒中的危险因素之一,脑缺血和脑出血急性期血糖增高提示预后不良。糖尿病患者发生卒中与脑实质内血管病变相关。文章就糖尿病和无糖尿病患者高血糖对卒中前后的影响及卒中后治疗高血糖的意义作进一步讨论。     

造影剂诱发重症肌无力危象一例报告

造影剂诱发重症肌无力危象一例报告刘亚玲，王铭维，卜晖病例摘要：患者男性、３３岁、农民．主因颈部肌无力４０天，吞咽困难、视物成双１个月于９５—８—２８入院。根据（１）晨轻幕重的骨髂肌无力的表现，（２）疲劳试验阳性，（３）新斯的明试验阳性，（４）肌电图重...