随机引物多态性DNA及其在微生物分型中的应用

用于微生物分型的现代技术包括表型和基因型方法。随机扩增我态性ＤＮＡ是在ＰＣＲ技术基础上发展起来的一种新的基因分型法。主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组ＤＮＡ片段，进而通过弟胶电泳分析其批纹图特征借以显示不同菌株间存在细微差别，这种方法简单、快速，现已在许多微生物分型中得到运用。     

真菌血症18例微生物学及临床分析

近年来由于机会致病菌的医院感染包括真菌感染有增加趋势［１］,因而真菌血症也有增加的趋势［２］。鉴于此,我们对１８例真菌血症,从微生物学及临床进行分析,现报道如下。一、材料与方法１．标本来源：主要来自本院各科需做血培养的住院患者。２．分离方法：按常规血...     

阿米卡星和头孢唑啉对大肠埃希菌的体外抗生素后效应实验观察

抗生素后效应 ( Postantibiotic effect,PAE)是抗生素与细菌短暂接触后再清除抗生素 ,细菌生长在一定时间内受抑制的现象。此现象的机制解释为药物持续占据细菌结合部位所致的非致死性损伤 [1,2 ] ,药物作用后细菌胞内 ATP浓度的恢复需要一定时间 [3 ] ,并出现 DNA合成的变化[4 ] 等。国外学术界在 PAE机制、意义和方法学等领域的相关研究十分活跃。国内亦有方法学和金黄色葡萄球菌的实验报告[2 ] ,但对于临床病原菌及结合临床用药实际所进行的研究尚不多见。鉴于氨基糖苷类和 β-内酰胺类的联合抗菌方案较为常见 ,我们以阿米卡星( AM…     

一例溶组织梭菌血液感染的培养及鉴定分析

患者 ,男 ,6 3岁 ,经本院检查确诊贲门癌 ,现有发热 ,体温 39 2℃畏寒 ,C反应蛋白 (CRP)为 33g/L ,提示感染存在 ,做血培养 2次 ,细菌鉴定均阳性 ,经鉴定为溶组织梭菌 ,现报告如下。培养特征 :抽取患者静脉血 5ml于血培养瓶中 ,经Bact/Alert12 0自动监测培养仪培养 ,36h仪器显示结果阳性 ,然后复种血平板 ,35℃培养 2 4 ,4 8,72h在血平板上均不生长(即无菌落出现 ) ;于是我们再次复种哥伦比亚琼脂血平板 ,巧克力平板 ,普通平板且放置于 10 %CO2 环境中 ,继续培养 ,结果在 2 4、4 8、72h之后 ,所有平皿上均未长出菌落。通过数次多种固体…     

大肠埃希菌耐消毒剂基因的检测分析

目的检测临床分离的65株大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE-su l1的存在情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测65株大肠埃希菌及1株ATCC 25922的qacE-su l1基因。结果65株大肠埃希菌的qacE-su l1基因的阳性率为58.46%。结论大肠埃希菌耐消毒剂的qacE-su l1基因携带率较高,可能是该菌引起院内感染的重要原因,应引起我国医院消毒界的重视。     

铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性监测

铜绿假单胞菌(P.aeruqinosaPA)是临床常见的条件致病菌,在医院感染中占有非常重要的位置,近年来随着多重耐药铜绿假单胞菌检出率不断上升,临床治疗较为辣手,为了有效地为临床用药提供可靠的依据,本文观察了2001年1月～2003年12月从临床各类标本分离的239株铜绿假单胞菌药物敏感结果,报告如下。1材料与方法1.1菌株来源239株铜绿假单胞菌来自2001年1月～2003年12月临床各类标本。其中痰液136株,分泌物42株,脓液21株,胆汁18株,血液13株,尿液4株,腹水3株,胸水2株。这些菌株主要来自呼吸科,重症监护病房,烧伤科,儿科及老年科。1.2菌株鉴定利用V…     

血浆肺特异性X基因mRNA检测对诊断肺癌的意义

摘要：目的：探讨肺特异性X基因（lung-specific X gene,LUNX）mRNA检测在肺癌辅助诊断中的意义。 方法：荧光定量PCR法检测肺癌患者、肺良性疾病患者、肺外肿瘤特异性对照患者及体检健康者血浆LUNX mRNA,评估循环LUNX mRNA对肺癌的诊断意义。 结果：肺癌患者血浆LUNX mRNA相对含量（0.287±0.106）显著高于健康组（0.045±0.018）（q=30.34, P<0.01）、肺良性疾病组（0.064±0.041）（q=24.33,P<0.01）和特异性对照组（0.032±0.024）（q=30.44,P<0.01）。肺癌组血浆LUNX mRNA相对含量在不同性别、年龄段及病理类型的患者中无显著性差异（P>0.05）,Ⅲ~Ⅳ期患者该基因含量（0.334±0.096）显著高于Ⅰ期（0.253±0.081）（q=4.09,P<0.05）和Ⅱ期（0.271±0.083）（q=3.49,P<0.05）患者。 结论：血浆LUNX mRNA检测对肺癌有特异的辅助诊断价值。     

肝炎后肝硬化患者血清可溶性细胞间黏附分子-1和肿瘤坏死因子-α检测的临床意义

目的探讨可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在肝炎后肝硬化发展过程中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定73例肝炎后肝硬化患者血清sICAM-1和TNF-α水平。结果肝硬化患者血清sICAM-1和TNF-α水平分别为(943.4±99.8)ng/mL、(53.4±12.8)ng/L,均明显高于健康对照组[分别为(224.1±32.7)ng/mL、(6.7±2.3)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01)。血清sICAM-1水平与TNF-α呈显著正相关(r=0.893 2,P<0.01),与清蛋白呈显著负相关(r=-0.910 8,P<0.01),与丙氨酸氨基转移酶呈显著正相关(r=0.856 6,P<0.01)。结论 sICAM-1和TNF-α在肝硬化的发生、发展过程中发挥重要作用,其升高程度与肝硬化严重程度密切相关。     

多药耐药鲍曼不动杆菌抗菌剂外排泵基因研究

目的 了解多药耐药鲍曼不动杆菌(MDR-ABA)抗菌剂外排泵基因存在状况与细菌耐药关系.方法 采用PCR方法检测4种抗菌剂外排泵基因(adeB、mdfA、qacE△1、tehA),PCR阳性产物采用PCR直接全自动荧光法测序.结果 20株MDR-ABA有18株检出同时携带adeB、mdfA、qacE△1基因,阳性率为9...     

微波固相吸附法制备临床标本中DNA和RNA

众所周知,PCR技术的应用是当今生物学研究领域的热点。将PCR用于感染性疾病的临床诊断,使医学微生物检验技术产生了新的飞跃。然而,如何保证PCR免受临床样品多样性、复杂性的影响,而获得准确的诊断结果乃是国内外同行正在致力解决的难题。对于临床标本处理好坏的结果是保证PCR质量的前提和基础。采用经典的酚-氯仿方法从临床标本中提取核酸,操作复杂费时,且增加标本间的交叉污染的机会。因此,简化PCR模板制备,探讨一种适用于临床诊断的简便和高效的核酸提取方法具有实际意义。本文根据文献报道建立并改进了微波固相吸附法快速提取核酸…