ACTN3基因R577X多态性与如皋地区汉族老年人群血脂水平的关联研究

 目的 探讨中国汉族老年人群中ACTN3基因R577X多态性位点与血脂水平的关联。方法 本研究基于如皋长寿及衰老队列研究(Rugao Longevity and Ageing Study, RuLAS)的衰老子队列人群。基因分型采用Taqman MGB方法。血脂检测指标为总胆固醇(total cholesterol, TC)、三酰甘油(triglyceride, TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C),其切点依据NCEP ATPIII标准。通过协方差分析和Logistic回归分析,探究R577X多态性位点与血脂异常之间的关联。结果 本研究共纳入1 618例样本(男性741例,女性877例)。协方差分析发现:在女性中RR、RX、XX基因型间TC和LDL-C水平差异均有统计学意义(TC:5.13、5.29、5.43 mmol/L,P=0.004;LDL-C:2.76、2.88、3.00 mmol/L,P=0.004);在总人群中RR、RX、XX基因型间TG水平(1.34、1.43、1.37 mmol/L)差异有统计学意义(P=0.024)。Logistic回归分析发现,在总人群和女性中X等位基因的拷贝数增加与TC水平和LDL-C水平异常升高具有显著关联,总人群TC:OR=1.184,95%CI为1.030~1.361,P=0.018;总人群LDL-C:OR=1.332,95%CI为1.101~1.588,P=0.003;女性TC:OR=1.334,95%CI为1.102~1.616,P=0.003;女性LDL-C:OR=1.549,95%CI为1.208~1.986,P=0.001。调整其他协变量之后,以上关联仍然显著。结论 在如皋地区汉族女性老年人群中,ACTN3基因R577X多态性与血浆TC、LDL-C水平相关。     

EBV即刻早期基因BZLF1腺病毒表达载体的构建及初步应用

目的 构建EBV即刻早期基因BZLF1的重组腺病毒表达载体，探讨其表达诱导潜伏状态EBV进入裂解期增殖的作用。方法采用AdEasy系统构建携带BZLFl的重组腺病毒载体padBz，脂质体法转染人胚肾293细胞，包装产生重组腺病毒vAd-BZ。vAd-BZ感染EBV阳性细胞NEC后，采用RT-PCR、Westemblot、流式细胞术和MTT等方法检测目的基因表达，以及目的基因表达对EBV阳性细胞的影响。结果 PCR、序列测定以及限制性酶切证实BZLFI基因正确插入穿梭质粒，并与病毒骨架质粒pAdEasy-1重组，重组腺病毒表达载体构建成功。经293细胞包装获得具有稳定感染性的重组腺病毒vAd-BZ，感染重组腺病毒的NEC靶细胞可以检测到BZLF1基因的表达，进而诱导EBV从潜伏期进入裂解期。结论 重组腺病毒vAd-BZ可有效感染EBV阳性细胞NEC，诱导潜伏状态的EBV活化．讲而特异件杀伤EBV阳件肿瘤细胞。     

人疱疹病毒7型被膜蛋白pp85的原核表达及应用

目的构建人疱疹病毒7型(HHV7)被膜蛋白pp85编码基因(ORF U14)的原核表达载体,并进行原核表达。方法应用HHV7标准株Glasgow感染SupT1细胞,PCR技术扩增HHV7ORFU14基因的主要抗原决定簇编码区(328~533AA),目的基因与原核表达载体pThioHis A连接后,转化宿主菌E.coliBL21,IPTG诱导融合蛋白表达,经镍-螯合物琼脂糖树脂柱亲和层析纯化获得重组抗原。重组蛋白电泳后转至PVDF膜,与HHV7阳性血清进行免疫印迹反应。结果DNA序列分析表明,目的基因序列与HHV7标准毒株Glasgow相应序列完全一致,SDS-PAGE可观察到相对分子质量(Mr)为35.7×103融合蛋白的表达,免疫印迹反应显示重组抗原具有较高的特异性。结论HHV7重组抗原具有较好的抗原性,进一步完善后可用于HHV7抗体的检测。     

HHV6和HHV7感染与类风湿性关节炎的相关性

目的 探讨人疱疹病毒6型（HHV6）和7型（HHV7）感染在类风湿性关节炎（RA）病因学中作用。方法 用巢式PCR技术，检测62例类风湿性关节炎病人和138例健康献血员外周血单个核细胞（PBMCs）和血浆中HHV6和HHV7DNA。结果 类风湿性关节炎病人组PBMCs中HHV6和HHV7DNA阳性率与正常对照组比较均无显著性差异（P〉0．05）；部分类风湿性关节炎病人血浆中可检出HHV6和HHV7DNA，而对照组血浆中则为阴性。结论 类风湿性关节炎病人中可能存在HHV6或HHV7的活动性感染，与类风湿性关节炎的发生发展有一定关系。     

表观遗传学药物影响乳腺癌细胞系抑癌基因BRCA1及CHD5表达的研究

目的 明确表观遗传学药物对乳腺癌细胞系抑癌基因BRCA1及CHD5表达的作用,探讨此类药物在乳腺癌临床治疗中的合理应用。方法 采用去甲基化制剂5 AZA和组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA分别作用于乳腺癌细胞系T47D、MCF-7及乳腺正常上皮细胞HBL-100,5 AZA终浓度分别为0、0.5、1.0、2.5、5.0和10.0μmol/L,TSA终浓度分别为0、0.25、0.5、0.75、1.0和1.5μmol/L。荧光定量RT PCR检测各浓度5 AZA作用12、24、48及72h,各浓度TSA作用6、12、24、48及72h BRCA1和CHD5的表达水平,并行甲基化特异PCR（MSP）检测两基因的甲基化状态。结果 2.5μmol/L AZA和0.5μmol/L TSA作用可提高乳腺癌细胞系BRCA1及CHD5的表达,而10μmol/L AZA和1.0、1.5μmol/L TSA作用反致表达降低,且对乳腺正常上皮细胞呈毒性作用。MSP未能发现AZA和TSA对MCF 7细胞两抑癌基因及T47D细胞BRCA1甲基化状态的影响,而两种药物均可逆转T47D细胞CHD5的甲基化状态。结论 表观遗传学药物对乳腺癌细胞抑癌基因表达的影响具有给药剂量及时间限制性,本研究可为此类药物在乳腺癌治疗中的科学应用提供实验依据。     

老年脑梗死患者认知功能下降的特点及危险因素分析

目的 探讨老年脑梗死患者认知功能下降的特点及其影响因素。方法 采取横断面研究,在2014年11月13日至2014年12月21日对江苏省如皋市江安镇人群进行调查。样本来自“如皋衰老纵向研究”,纳入31个村的1 788名对象,年龄70~84岁,均为汉族,其中男830名,女958名。确认脑梗死病史根据二级以上医院神经科诊断或头部CT证实。认知功能的评价采用改良长谷川痴呆量表,对该人群的定向力、记忆力、近记忆力、计算力及常识5个维度进行评价,总分21.5为无认知功能障碍,≤21.5为有认知功能障碍。采用多因素Logistic回归分析老年脑梗死患者认知功能下降的危险因素。结果 (1)1 788名受检者中,合并脑梗死病史133例(7.4%),无脑梗死1 655名。合并脑梗死患者高血压的比例高于无脑梗死组[63.9%(85例)比41.7%(690例)],高密度脂蛋白胆固醇水平低于无脑梗死组[(1.40±0.29)mmol/L比(1.47±0.33)mmol/L],差异均有统计学意义(均P0.05)。(2)合并脑梗死患者在定向力和计算力方面存在部分受损,总体认知功能评分为(20±7)分,较无脑梗死患者的(21±6)明显下降,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。(3)133例脑梗死患者中,存在认知功能障碍的76例,发生率为57.1%,其中女性59例。认知功能障碍患者血肌酐平均值为(59±15)μmol/L,较无认知障碍者(66±14)μmol/L明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。(4)多因素Logistic回归分析显示,小学以下教育程度(OR=2.86,95%CI:2.19~3.72)、女性(OR=1.85,95%CI:1.50~2.28),是老年脑梗死患者认知功能下降的独立危险因素,较高血肌酐浓度(OR=0.96,95%CI:0.95~0.97)是保护因素。结论 脑梗死后的老年人总体认知功能下降,尤其是定向力和计算力方面受损明显。小学以下文化程度和女性是发生认知障碍的独立危险因素,较高水平血肌酐可能具有一定的保护作用。     

某儿童医院3 089例0~16岁儿童维生素D水平回顾性分析

目的 了解本地区0~16岁儿童25(OH)D的水平,为本地区0~16岁儿童合理补充维生素D提供科学依据。 方法 回顾性分析2019年1月—2020年10月在本院儿童保健科进行健康体检的3 089例儿童血清25(OH)D水平,并分析其与性别、年龄、季节之间的关系。 结果 3 089例0~16岁儿童的25(OH)D平均水平为(30.80±13.31)ng/ml,其中25(OH)D严重缺乏者29例(0.94%),血清25(OH)D水平为(7.80±1.26)ng/ml;缺乏者570例(18.45%),25(OH)D水平为(16.41±2.66)ng/ml;不足者1 098例(35.55%),25(OH)D水平为(24.87±2.86)ng/ml;充足者1 392例(45.06%),25(OH)D水平为(41.85±11.56)ng/ml。不同性别间25(OH)D的水平差异也有一定的统计学意义。随着年龄增加维生素D水平逐渐下降,充足率逐渐降低,严重缺乏、缺乏、不足率升高,差异有统计学意义。不同季节中以夏、秋季水平较高,春季较低、冬季最低,差异有统计学意义。 结论 本地区0~16岁儿童血清25(OH)D水平充足比率偏低,应注意增加维生素D的补充及户外活动时间。     

滨州地区铜绿假单胞菌耐药性分析

目的：分析我院铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药情况,为临床预防感染及合理选用抗生素提供实验依据。方法收集本院2011-2013年间各临床科室送检的标本,按常规方法对其进行细菌的分离、培养后,采用BD PHOENIX-100全自动微生物鉴定仪、K-B法进行细菌鉴定和药敏试验。药敏试验结果判定标准按2012年版《抗微生物学药物敏感性试验执行标准》规定执行。结果铜绿假单胞菌的检出率为4.26％。结论铜绿假单胞菌的耐药率较高,应加强药敏监测,指导临床合理用药。     

老年高血压患者血同型半胱氨酸水平与肾功能损伤的相关性

目的 探讨老年高血压患者血同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）水平与肾功能损伤的相关性。方法本研究数据来自于“如皋衰老队列研究”第2次横断面调查。共纳入Hcy、肾小球滤过率资料均完整的老年高血压患者1295例,年龄70～87岁,平均年龄(77.2±4.3)岁,其中男性582例,女性713例。以血肌酐估算的肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate, eGFR）<90mL/(min·1.73m2)定义肾功能损伤。采用Pearson相关性分析高血压人群中Hcy水平与eGFR的相关性,Logistic回归分析Hcy水平升高与肾功能受损的风险比（OR）。结果 在老年高血压人群中,Hcy平均水平(14.77±6.39)μmol/L,eGFR(89.44±11.96)mL/(min·1.73m2)。Pearson相关性分析显示,血Hcy水平与eGFR相关（r=-0.398,P<0.001）。线性回归分析结果显示,Hcy水平增高与eGFR降低相关（β=-0.745,P<0.001）;Logistic回归分析表明,Hcy每增加1μmol/L,发生肾功能损伤的风险增加0.16倍（P<0.001）。与正常组相比,Hcy轻度升高组（10μmol/L≤Hcy<15μmol/L）,中度升高组（15μmol/L≤Hcy<30μmol/L）,重度升高组（Hcy≥30μmol/L组）发生肾功能损伤的OR（95%CI）分别为2.65(1.53～4.58)、8.00(4.45～14.38)和11.87(3.23～43.63),校正多因素后,差异仍具有统计学意义（P<0.001）。结论 在老年高血压人群中,Hcy升高与eGFR降低相关。Hcy升高增加了老年高血压人群发生肾功能损伤的风险。