microRNA与肿瘤的关系

miRNA是一类分布广泛的非编码小分子RNA,其长度约为22个核苷酸,它的功能是通过负调控基因的表达从而调节细胞的生理过程,但当其表边异常时可能引起疾病甚至肿瘤的形成.过去肿瘤的研究大多数都集中于对原癌基因和抑癌基因突变的研究上.目前,发现许多肿瘤的发生很可能是受miRNA的影响,miRNA也可以起到抑癌基因或原癌基因的作用.miRNA表达的异常可能与其染色体脆性位点存在几率较高有关.本文对miRNA的结构、功能及其与肿瘤发生关系等方面进行了综述.     

STK15的表达对NIH3T3细胞的影响

目的构建pcDNA3.1-STK15表达质粒,探讨STK15基因对小鼠成纤维细胞(NIH3T3)的影响。方法构建pcDNA3.1-STK15质粒,将其转染NIH3T3,应用RT-PCR、免疫细胞化学和Western印迹方法检测STK15的表达;MTT法检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞侵袭能力。结果转染pcDNA3.1-STK15质粒的NIH3T3细胞在48 h有STK15的表达,而且该细胞的增殖速度和穿透Matrigel胶的细胞数均明显高于对照组(P0.05)。结论STK15基因具有增加细胞增殖和细胞侵袭力的功能,进而形成肿瘤。     

microRNA与肿瘤发生的关系

miRNA是一类分布广泛的非编码小分子RNA,其长度约为22个核苷酸,它的功能是通过负调控基因的表达从而调节细胞的生理过程,但当其表达异常时可能引起疾病甚至肿瘤的形成。过去肿瘤的研究大多数都集中于对原癌基因和抑癌基因突变的研究上。目前,发现许多肿瘤的发生很可能是受miRNA的影响,miRNA也可以起到抑癌基因或原癌基因的作用。miRNA表达的异常可能与其染色体脆性位点存在几率较高有关。本文对miRNA的结构、功能及其与肿瘤发生关系等方面进行了综述。     

一种改进的显微注射用DNA片段的纯化方法

目的显微注射用DNA的纯度是影响转基因动物制备成功与否的重要因素,本文建立一种可行的适用于普通实验室的纯化DNA方法,替代普遍使用的试剂盒纯化方法。方法分别使用酚-氯仿多次抽提法及常规的凝胶提取试剂盒纯化含有蚓激酶基因的DNA片段,通过显微注射技术将纯化的DNA片段导入小鼠受精卵的原核,制备转基因小鼠。根据转基因实验的结果对两种方法进行比较。结果使用两种方法纯化DNA均能获得转基因小鼠。在DNA纯度及注射卵的存活率上,两种方法无明显差别;在移植卵的出生率及转基因阳性率上,抽提法优于试剂盒法。结论本实验建立的抽提方法可以替代试剂盒方法纯化显微注射用DNA片段,在降低实验成本、简化实验条件及提高转基因阳性率方面具有优势。     

蚓激酶基因在山羊乳腺中的瞬时表达

构建了包括山羊β-酪蛋白基因启动子和蚓激酶基因cDNA的乳腺表达载体pβLK。通过直接注射将重组载体DNA导入山羊的乳腺组织,以纤维蛋白平板法测定乳汁中蚓激酶基因表达产物的活性。实验证实蚓激酶基因可以在山羊乳腺中瞬时表达。在进行山羊乳腺的瞬时表达时,适宜的注射剂量为500μg/ml。注射后6~9 h的表达量最高,达到2.0×105U/L,并持续表达至60 h。     

microRNA与肿瘤的关系

miRNA是一类分布广泛的非编码小分子RNA,其长度约为22个核苷酸,它的功能是通过负调控基因的表达从而调节细胞的生理过程,但当其表边异常时可能引起疾病甚至肿瘤的形成.过去肿瘤的研究大多数都集中于对原癌基因和抑癌基因突变的研究上.目前,发现许多肿瘤的发生很可能是受miRNA的影响,miRNA也可以起到抑癌基因或原癌基因的作用.miRNA表达的异常可能与其染色体脆性位点存在几率较高有关.本文对miRNA的结构、功能及其与肿瘤发生关系等方面进行了综述.     

microRNA与肿瘤的关系

miRNA是一类分布广泛的非编码小分子RNA,其长度约为22个核苷酸,它的功能是通过负调控基因的表达从而调节细胞的生理过程,但当其表边异常时可能引起疾病甚至肿瘤的形成.过去肿瘤的研究大多数都集中于对原癌基因和抑癌基因突变的研究上.目前,发现许多肿瘤的发生很可能是受miRNA的影响,miRNA也可以起到抑癌基因或原癌基因的作用.miRNA表达的异常可能与其染色体脆性位点存在几率较高有关.本文对miRNA的结构、功能及其与肿瘤发生关系等方面进行了综述.     

《关于善待实验动物的指导性意见》的研究

《关于善待实验动物的指导性意见》在全国实施。我校实验动物部项目组承担了文件的研究起草工作,为帮助读者理解文件精神,就其中所涉及的问题展开讨论。     

WNK4转基因小鼠的建立

目的制备WNK4转基因小鼠模型。方法通过显微注射法把线状WNK4基因注射入FVB小鼠受精卵雄原核中，然后将受精卵细胞移植于受体假孕母鼠输卵管内，发育产生子代小鼠。结果产生出112只F0代小鼠。鼠尾基因组DNA经PCR法检测1只阳性，并进行测序。结论通过显微注射法，外源基因WNK4在FVB小鼠基因组中得到整合，将对研究WNK4基因功能和与高血压疾病发病机制的作用和关系提供了有效的动物模型。     

促进重点实验室向高技术水平深层次发展的体会

本实验室进行了十几年的实验动物转基因技术应用的基础性研究。先后制备了裸鼠小鼠人喉癌移植瘤模型、裸杂鼠乳腺移植瘤模型。对人鼠移植与鼠间移植的异同，移植瘤的生物学特性，微波对移植瘤的影响等进行了研究。2003年经显微注射方法获得抗菌肽、人胰岛素和双基因转移FVB小鼠转基因模型建立取得成功，并经PCR和Southern检测，高阳性表达。