SCL基因重组慢病毒上调高糖环境下Cajal间质细胞中c-kit蛋白表达

目的：探讨含人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因重组慢病毒对高糖环境下受损Cajal间质细胞 (interstitial cells of Cajal,ICC)中酪氨酸激酶受体(c-kit)蛋白表达的影响。方法：分离ICC,培养24 h贴壁,经倒置显 微镜、免疫荧光鉴定后,将ICC细胞分为对照组、高糖组,对照组加入含5 mmol/L葡萄糖的培养基,高糖组加入含 20 mmol/L葡萄糖的培养基,培养48 h后;对照组不变,高糖组分成空白组、空慢病毒组和实验组3个亚组,3组分别 加入PBS、空慢病毒和含SCL基因重组慢病毒5 mmol/L葡萄糖的培养基,继续培养24和48 h,采用Western印迹法检测 两个时段各组中ICC中c-kit 蛋白表达情况。结果：24或48 h后,空白组、空慢病毒组中ICC的c-kit蛋白表达水平均明显 低于对照组,实验组中ICC中c-kit蛋白的表达水平明显均高于空白组和空慢病毒组,但是仍低于对照组(均P<0.05)。 结论：SCL基因重组慢病毒可以上调高糖环境下功能受损ICC中c-kit蛋白表达量。     

多媒体技术在泌尿外科教学中的应用

本文通过分析多媒体技术在泌尿外科教学中的应用特点,总结多媒体技术在泌尿外科教学中的经验,指出泌尿外科教学中多媒体技术应用的优势以及存在的问题和解决对策.     

人SCL基因pDC315-EGFP真核表达载体的构建及意义

目的构建含有人SCL基因的pDC315-EGFP真核表达载体,为糖尿病膀胱病变（DCP）的治疗提供新思路。方法从含有人SCL基因的质粒中,采用PCR方法扩增SCL基因,将目的载体pDC315-EGFP进行酶切后交换,其产物转化细菌感受态细胞,对克隆产物进行菌落PCR鉴定,对阳性克隆产物进行测序和比对分析,比对正确的克隆即为构建成功的质粒。结果 PCR扩增的基因片段长度为1 036 bp,测序结果以及重组质粒pDC315-EGFP-SCL阳性克隆凝胶电泳鉴定均证明SCL基因成功克隆到真核表达载体中。结论成功构建了真核表达载体pDC315-EGFP-SCL,该载体有望用于DCP的治疗。     

维生素D受体Apa1位点基因多态性与新疆南部维吾尔族泌尿系结石患者的相关性研究

目的:探讨维生素D受体(VDR) Apa1位点多态性与新疆南部维吾尔族泌尿系结石之间的关系.方法:收集90例维吾尔族泌尿系结石患者和90例维吾尔族正常对照者.采用聚合酶链反应(PCR)和限制性酶切法研究VDR的Apa1位点多态性与草酸钙尿结石之间的关系.结果:Apa1酶切位点病例组和正常对照组AA、Aa、aa 3种基因型频率的差异有统计学意义(χ2=14.22,p<0.001),基因型Aa在病例组占63.3%,明显高于对照组(35.6%),差异亦有统计学意义.结论:维生素D受体基因多态性与泌尿系结石有关,Aa基因型可能是泌尿系结石的易感基因,VDR- Apa1位点有望成为筛选和检测泌尿系结石的一个指标.     

P21活化激酶6在前列腺癌组织中的表达及意义

目的：探讨P21活化激酶6（PAK6）在前列腺癌（PCa）中的表达和意义。方法：应用免疫组织化学的sP法,检测前列腺癌（PCa）组织及前列腺增生（BPH）组织中PAK6的表达,探讨PAK6蛋白表达与PCa的关系。结果：PAK6在BPH组织和PCa组织中均有阳性表达。二者中PAK6阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）。后者PAK6表达阳性率随分化程度升高。结论：PAK6阳性表达程度与PCa分级有关,捉示它在PCa的发病中可能扮演重要角色,检测PAK6变化对判断PCa生物学行为有参考价值。     

肿瘤浸润性树突状细胞与粘蛋白MUC1在前列腺癌与前列腺增生中的表达研究

目的 :探讨上皮特异性肿瘤蛋白 (MUC1)与肿瘤浸润性树突状细胞 (TIDC)在前列腺癌及前列腺增生组织中的表达。　方法 :采用免疫组织化学SP法检测MUC1和TIDC在 30例前列腺癌、2 0例前列腺增生组织的表达。结果 :MUC1在前列腺癌、前列腺增生组织中均表达 ,MUC1的染色分型同肿瘤的病理分级密切相关 (P <0 .0 0 1)。TIDC的数量在高分化与低分化前列腺癌间差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。　结论 :MUC1的表达模式和TIDC数量的监测可以作为前列腺癌恶性程度和预后的判断指标。TIDC的减少可能是肿瘤免疫逃逸和耐受的重要环节 ,肿瘤细胞表面高密度的MUC1可能参与前列腺癌侵袭转移和激素耐受机制。     

双氢青蒿素对前列腺癌细胞PC-3M生长的影响及其机制探讨

目的:观察双氢青蒿素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3M细胞凋亡和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:不同浓度(0、25、50、100μmol/L)的双氢青蒿素分别作用于PC-3M细胞48 h,MTT法检测细胞生长活性;流式细胞仪测定细胞凋亡率;分光光度法检测细胞凋亡过程中caspase-3、caspase-8活性变化;半定量RT-PCR法检测PC-3M细胞内VEGF mRNA的表达;Western印迹法检测细胞VEGF蛋白表达。结果:双氢青蒿素能显著抑制PC-3M细胞的增殖,与对照组(0μmol/L)的细胞凋亡率(2.92±0.45)%相比,各剂量组(25、50、100μmol/L)的细胞凋亡率[(8.85±0.74)%,(12.83±0.84)%,(18.65±1.24)%]显著增加,caspase-8[(0.47±0.05)U/μg vs(1.22±0.15)U/μg,(1.76±0.07)U/μg,(2.91±0.24)U/μg]、caspase-3[(0.44±0.07)U/μg vs(0.95±0.08)U/μg,(1.48±0.14)U/μg,(2.92±0.45)U/μg]活性显著增加,呈剂量依赖性(P<0.01)。PC-3M细胞内VEGF mRNA的表达和蛋白表达呈剂量依赖性降低。结论:双氢青蒿素能显著抑制体外PC-3M细胞的生长,并促进其凋亡,机制可能与增加凋亡蛋白酶和抑制VEGF表达有关。     

c-Kit和n-NOS2双重染色在豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的表达

目的 研究c-Kit与n-NOS2在豚鼠膀胱caial样间质细胞的共表达情况.方法 采用培养成年豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,c-Kit免疫荧光和n-NOS2免疫荧光双重染色.结果 豚鼠膀胱内Cajal样间质细胞体为梭形或卵圆形,常见2～3个细长的突起.c-Kit和n-NOS2免疫荧光双重染色发现两种抗体在Cajal样间质细胞共表达.结论 本研究结果提示在豚鼠膀胱Cajal样间质细胞内c-Kit和n-NOS2共存,Cajal样间质细胞具备产生NO的功能,Cajal样间质细胞存在调节膀胱自律活动的结构基础.     

17β-雌二醇对大鼠肾缺血再灌注损伤肾小管细胞凋亡及炎症的影响

目的探讨17β-雌二醇对肾缺血再灌注损伤大鼠肾小管细胞凋亡及炎症的影响及机制。方法将所有去卵巢处理后的雌性SD大鼠随机分为正常组(Control)、假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)及缺血再灌注雌激素治疗组(E2+I/R)(每组8只)。切除右肾,夹闭左侧肾动脉45 min,再灌注24 h后留取各组大鼠血和肾脏标本。全自动生化分析仪测定血尿素氮(BUN)及血肌酐(Cr)水平,采用HE染色观察肾组织病理学形态,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管细胞凋亡率,Western blot法检测肾组织Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平,肾组织病理学观察炎性反应及免疫荧光法检测各组肾组织CD4+T淋巴细胞的浸润数量。结果与Sham组相比,I/R组血BUN和Cr水平升高(P0.05),肾组织病理学损伤明显(P0.05),凋亡细胞数增加(P0.05),Cleaved-Caspase-3蛋白表达显著升高(P0.01),炎症反应加重(P0.05),CD4+T淋巴细胞浸润增加(P0.05);与I/R组相比,E2+I/R组血BUN和Cr水平降低(P0.05),肾组织病理学损伤减轻(P0.05),凋亡细胞数减少(P0.05),Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平降低(P0.01),炎症反应减轻(P0.05),CD4+T淋巴细胞浸润减少(P0.05)。结论雌激素可抑制缺血再灌注损伤后肾组织Cleaved-Caspase-3蛋白表达,减少肾小管细胞凋亡,并且可以减轻炎症反应和CD4+T淋巴细胞浸润,对肾缺血再灌注损伤发挥保护作用。