SCL基因重组慢病毒上调高糖环境下Cajal间质细胞中c-kit蛋白表达

目的：探讨含人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因重组慢病毒对高糖环境下受损Cajal间质细胞 (interstitial cells of Cajal,ICC)中酪氨酸激酶受体(c-kit)蛋白表达的影响。方法：分离ICC,培养24 h贴壁,经倒置显 微镜、免疫荧光鉴定后,将ICC细胞分为对照组、高糖组,对照组加入含5 mmol/L葡萄糖的培养基,高糖组加入含 20 mmol/L葡萄糖的培养基,培养48 h后;对照组不变,高糖组分成空白组、空慢病毒组和实验组3个亚组,3组分别 加入PBS、空慢病毒和含SCL基因重组慢病毒5 mmol/L葡萄糖的培养基,继续培养24和48 h,采用Western印迹法检测 两个时段各组中ICC中c-kit 蛋白表达情况。结果：24或48 h后,空白组、空慢病毒组中ICC的c-kit蛋白表达水平均明显 低于对照组,实验组中ICC中c-kit蛋白的表达水平明显均高于空白组和空慢病毒组,但是仍低于对照组(均P<0.05)。 结论：SCL基因重组慢病毒可以上调高糖环境下功能受损ICC中c-kit蛋白表达量。     

膀胱癌患者尿液中核有丝分裂器蛋白测定的临床意义

目的探讨尿中核有丝分裂器蛋白(NMP22)的表达与膀胱肿瘤的关系.方法采用ELISA法测定32例膀胱癌、30例泌尿系良性疾病患者及15例正常人尿液中NMP22的含量.结果膀胱癌患者尿液中NMP22含量为(55.84±47.89)U/ml,明显高于泌尿系良性疾病患者(18.78±18.95)U/ml及正常人(6.97±3.82)U/ml(P＜0.01).尿液中NMP22水平与肿瘤分期、分级有关.结论检测尿液中NMP22含量可作为膀胱癌筛选和评估其生物学行为的1个指标.     

经皮肾镜碎石术后并发尿源性脓毒血症相关危险因素分析

目的:分析经皮肾镜碎石术后并发尿源性脓毒血症相关危险因素.方法:回顾性分析2013年1月至2016年12月293例行PCNL的肾结石或输尿管上段结石患者的临床资料.采用单因素分析和Logistic回归分析法分析PCNL术后并发尿源性脓毒血症的相关危险因素.结果:本组293例患者术后10例(3.41％)发生尿源性脓毒血症,男3例,女7例,平均年龄(50.41±11.48)岁,平均结石大小为(2.61±1.64)cm.单因素分析结果显示女性、糖尿病、术前尿培养阳性、术前尿白细胞≥3+、结石＞2.5cm、通道＞20F与尿源性脓毒血症的发生有关(P＜0.05).多因素分析结果显示术前尿培养阳性(OR=0.012,95％CI:0.002-0.081)、结石＞2.5cm(OR=13.526,95％CI:1.877-97.489)、通道＞20F(OR=17.534,95％CI:1.371-224.190)与尿源性脓毒血症的发生相关(P＜0.05).结论 术前尿培养阳性、结石＞2.5cm、通道＞20F是PCNL术后并发尿源性脓毒血症的危险因素.对于高危患者,临床医师在围手术期应给予足够重视.     

人SCL基因pDC315-EGFP真核表达载体的构建及意义

目的构建含有人SCL基因的pDC315-EGFP真核表达载体,为糖尿病膀胱病变（DCP）的治疗提供新思路。方法从含有人SCL基因的质粒中,采用PCR方法扩增SCL基因,将目的载体pDC315-EGFP进行酶切后交换,其产物转化细菌感受态细胞,对克隆产物进行菌落PCR鉴定,对阳性克隆产物进行测序和比对分析,比对正确的克隆即为构建成功的质粒。结果 PCR扩增的基因片段长度为1 036 bp,测序结果以及重组质粒pDC315-EGFP-SCL阳性克隆凝胶电泳鉴定均证明SCL基因成功克隆到真核表达载体中。结论成功构建了真核表达载体pDC315-EGFP-SCL,该载体有望用于DCP的治疗。     

维生素D受体Apa1位点基因多态性与新疆南部维吾尔族泌尿系结石患者的相关性研究

目的:探讨维生素D受体(VDR) Apa1位点多态性与新疆南部维吾尔族泌尿系结石之间的关系.方法:收集90例维吾尔族泌尿系结石患者和90例维吾尔族正常对照者.采用聚合酶链反应(PCR)和限制性酶切法研究VDR的Apa1位点多态性与草酸钙尿结石之间的关系.结果:Apa1酶切位点病例组和正常对照组AA、Aa、aa 3种基因型频率的差异有统计学意义(χ2=14.22,p<0.001),基因型Aa在病例组占63.3%,明显高于对照组(35.6%),差异亦有统计学意义.结论:维生素D受体基因多态性与泌尿系结石有关,Aa基因型可能是泌尿系结石的易感基因,VDR- Apa1位点有望成为筛选和检测泌尿系结石的一个指标.     

P21活化激酶6在前列腺癌组织中的表达及意义

目的：探讨P21活化激酶6（PAK6）在前列腺癌（PCa）中的表达和意义。方法：应用免疫组织化学的sP法,检测前列腺癌（PCa）组织及前列腺增生（BPH）组织中PAK6的表达,探讨PAK6蛋白表达与PCa的关系。结果：PAK6在BPH组织和PCa组织中均有阳性表达。二者中PAK6阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）。后者PAK6表达阳性率随分化程度升高。结论：PAK6阳性表达程度与PCa分级有关,捉示它在PCa的发病中可能扮演重要角色,检测PAK6变化对判断PCa生物学行为有参考价值。     

c-Kit和n-NOS2双重染色在豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的表达

目的 研究c-Kit与n-NOS2在豚鼠膀胱caial样间质细胞的共表达情况.方法 采用培养成年豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,c-Kit免疫荧光和n-NOS2免疫荧光双重染色.结果 豚鼠膀胱内Cajal样间质细胞体为梭形或卵圆形,常见2～3个细长的突起.c-Kit和n-NOS2免疫荧光双重染色发现两种抗体在Cajal样间质细胞共表达.结论 本研究结果提示在豚鼠膀胱Cajal样间质细胞内c-Kit和n-NOS2共存,Cajal样间质细胞具备产生NO的功能,Cajal样间质细胞存在调节膀胱自律活动的结构基础.     

膀胱移行细胞癌中树突状细胞的免疫状态变化及意义

目的:通过分析膀胱移行细胞癌中浸润性树突状细胞(DC)的免疫表型变化,探讨其在肿瘤微环境中的功能状态.方法:选择未经任何治疗的初发膀胱移行细胞癌患者标本35例作为实验组,正常膀胱组织作为对照组.通过免疫组化技术标记组织中树突状细胞的CD1a、HLA-DR和CD86抗原,观察两种组织中的DC表达3种抗原的状况,结果进行统计学分析.结果:所有病例均未见明显CD86 DC,但均有CD1a DC,其在膀胱癌组织中、癌旁组织中的浸润程度均低于正常膀胱组织,差异均有统计学意义(P＜0.05),在膀胱癌组中有22例癌实质内的DC表达HLA-DR抗原,阳性表达率为48.6%,与正常膀胱组织比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:膀胱移行细胞癌组织中的DC,其浸润程度下降并存在功能成熟障碍.     

膀胱癌患者外周血来源树突状细胞诱导培养及表型分析

目的:探讨膀胱癌患者外周血来源树突状细胞(Dendritic cell,DC)诱导培养方法,观察其形态学特点及分子表型变化. 方法:从膀胱癌患者外周血中分离出单个核细胞,在GM-CSF、IL-4的诱导下培养扩增DC,光学显微镜下观察培养过程中的形态学变化,流式细胞术检测其分子表型变化.结果:诱导培养7天即可获取大量成熟DC,细胞表面出现典型树枝状突起,免疫组织化学检测证实为CD1a ;流式细胞仪表型分析显示DC特异性标志CD1a的阳性表达率为57.4%,特异性成熟标志CD83的阳性表达率为72.1%,HLA-DR为94.6%.结论:膀胱癌患者外周血单个核细胞在体外可定向诱导培养为成熟的DC,该研究结果为进一步膀胱癌临床生物学治疗奠定了基础.