靶向血管内皮生长因子和神经生长因子的shRNA真核表达载体的构建与鉴定

目的利用RNA干扰（RNAi）技术,构建靶向血管内皮生长因子（VEGF）、神经生长因子（NGF）双基因的短发夹RNA（short hairpin,shRNA）真核表达载体用于胶质瘤基因治疗。方法分别设计并体外合成靶向基因VEGF、NGF的特异性编码shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经BglⅡ—HindⅢ酶切线性化的pSUPER质粒H1启动子下游,构建shRNA重组质粒,进而脂质体介导瞬时转染胶质瘤细胞系U251,半定量RT-PCR检测VEGF mRNA、NGF mRNA表达。结果重组质粒经过酶切鉴定和测序,插入片段的序列大小、位点和方向均与已合成的寡核苷酸的序列完全一致,在瞬时转染胶质瘤细胞后下调了VEGF mRNA、NGF mRNA的表达。结论成功构建靶向基因VEGF、NGF的shRNA真核表达载体,为进一步应用RNAi技术,研究其对胶质瘤的抑制作用奠定基础。     

疣萎平治疗尖锐湿疣的临床观察

应用疣萎平治疗尖锐湿疣并采用分层随机平行对照研究方法。结果显示疣萎平治愈率为９０％，与对照组之间差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５），未发现系统性不良反应。研究表明疣萎平治疗尖锐湿疣与国外同类产品相比，效果一致。     

靶向IGF-1基因的siRNA抑制胶质瘤生长的体内外实验研究

目的观察靶向IGF-1基因的小干扰RNA（siRNA）在体内和体外对胶质瘤生长的抑制作用。方法采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹测定干扰后IGF-1的表达水平；采用Transwell体外侵袭试验进行细胞体外的侵袭力分析；用流式细胞仪检测细胞凋亡率；应用裸鼠成瘤实验测定IGF-1基因表达下调后胶质瘤C6细胞在体内致瘤能力的改变。结果靶向IGF-1基因的siRNA可以有效抑制IGF-1基因的表达，使IGF—1 mRNA表达减少50％～80％，蛋白表达减少60％，流式细胞术检测细胞凋亡率明显提高（P〈0．01），降低了在裸鼠体内成瘤的能力。结论siRNA介导的IGF-1基因下调可明显抑制胶质瘤细胞的生长。IGF-1可以作为胶质瘤基因治疗的一个新的靶点。     

几种相互联系的趋化因子及其受体与肿瘤的靶向转移

最近研究发现的趋化因子受体CXCR7（RDC1，CCX—CKR2）台邑与SDF—1（CXCL12），I—TAC（CX—CL11）结合发挥生物学作用。而以前的研究表明CXCR4是SDF-1的唯一受体；I—TAC（CXCL11）、Mig（CxCL9）和IPIO（CXCL10）3个趋化因子也只能结合CXCR3，这就使得被SDF-1和I—TAC调控的体内平衡和炎症事件比我们以前想像的更复杂。由于找到另一个和他们高亲和力的受体，我们可以对关于趋化因子的早期发现给予重新解释。     

滋阴祛风膏联合布地奈德福莫特罗粉吸入剂治疗缓解期哮喘56例

目的：观察滋阴祛风膏联合布地奈德福莫特罗粉吸入剂治疗缓解期哮喘的疗效及对气道阻力、血清Clara细胞分泌蛋白及肺神经源性P物质(substance P,SP)的影响。方法：将112例缓解期哮喘患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组56例。对照组给予布地奈德福莫特罗粉吸入剂,2次/次,2吸/次。治疗组在对照组治疗基础上给予滋阴祛风膏(药物组成：黄芪、清半夏、党参、五味子、山药、僵蚕、蝉蜕、紫菀、款冬花、瓜蒌皮、浙贝母、麻黄、竹杏仁、桔梗、葶苈子、荆芥、前胡、海浮石、知母、芦根、山茱萸、牡丹皮、防风、麦冬、苏叶、北沙参、竹沥、甘草片、白术、茯苓、橘络、射干、生地黄、牛蒡子、地龙、泽泻)治疗,1 d 1剂,煎取膏剂20 mL,每次10 mL,分早晚2次服用。两组均连续治疗1个月判定疗效。观察两组Clara细胞分泌蛋白、非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide, VIP)、肺神经源性SP、呼气流量峰值(peak expiratory flow, PEF)、第1秒用力呼气...     

基于代谢组学的幼龄大鼠血尿湿热证随时间变化规律的研究

目的：基于代谢组学NMR技术,寻找IgA肾病幼龄大鼠湿热证模型的标志性代谢物及相关代谢通路,为进一步药物干预寻找最佳时机提供理论依据。方法：选取72只3周龄雄性SD大鼠,按随机数字表法分为对照组和模型组,每组36只。构建大鼠IgA肾病模型。观察12周,每周大鼠称重并收集尿液,进行尿常规、代谢组学检测;第4、6、8、10、12各周采血进行生化指标、细胞因子、肾组织病理检测;代谢组学采用模式识别及多元变量统计学分析,筛选出可能的大鼠血尿湿热证标志物并建立相关代谢通路,比较一般情况、生化指标、细胞因子、肾组织病理等,探寻其时间变化规律。结果：与对照组比较,模型组：第5周起体质量增长速度放缓且出现湿热证候;尿检示第6周出现血尿,第8周出现蛋白尿;生化指标示TG、Chol、Scr均增高;肾组织病理示肾小球系膜区增殖性改变,实验第8、10、12周逐渐加重;免疫荧光可见IgA沉积;胞因子示核因子κB与转化生长因子-β1的表达分别自第6周、第10周起显著增高,与肾组织病理改变相对应;代谢组学判别出潜在的标志物14个,主要代谢路径6条,且随时间呈现一定的改变规律。结论：本实验初步探索出与中医血尿“湿热证”相关联的尿代谢组学的标志物及相应代谢通路,并提示尿代谢组学的改变早于生化、细胞因子、肾病理组织等其他微观层面,为进一步准确把握本病的干预时间点奠定了实验基础。     

蜂蜜的外用功能主治研究进展

蜂蜜来源于蜜蜂科昆虫中华蜜蜂(Apis cerana Fabricius)或意大利蜂(Apis mellifera Linnaeus)所酿的蜜。其味甘,性平,归肺、脾、大肠经。蜂蜜作为常用中药既可内服,又能外用。蜂蜜的内服功能主治在1963—2000年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)中均有记载,但其尚未明确指出蜂蜜的外用功能主治标准。2010年版《中国药典》对蜂蜜     

表皮缝合技术在美容外科中的应用

目的:探讨表皮缝合技术在美容外科中的应用。方法:采用进出针点均在表皮内的表皮缝合技术缝合无张力切口或较小张力切口,应用于117例患者,观察术后愈合情况及术后3～6个月随访瘢痕情况。结果:117例患者全部Ⅰ期愈合,切口缝线5～20天自然脱落,切口外表无缝线切割痕迹,术后3～6个月,92例得到随访,随访患者瘢痕均呈细线状,84例瘢痕宽度≤0.5mm,8例瘢痕宽度在0.5～1.0mm,瘢痕与周围皮肤颜色相近,肉眼不易识别。结论:表皮缝合技术较常规的缝合方法具有明显的优点,在保证切口对合良好的基础上,5～20天切口缝线可自然脱落,减少了拆线给患者带来的痛苦,术后伤口愈合好,瘢痕小,外表美观,值得临床尤其是美容外科普遍推广。     

甘草酸对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用

目的 探讨甘草酸对MRL/lpr小鼠狼疮肾炎是否具有保护作用及其机制.方法 MRL/lpr狼疮小鼠随机分为MRL/lpr组、MRL/lpr+地塞米松(1.5 mg/kg)组,MRL/lpr+甘草酸(20 mg/kg)组,MRL/lpr+甘草酸(40 mg/kg)组,每组10只;野生型正常对照组C57BL/6小鼠10只.采用ELISA法检测各组小鼠血清中尿酸(UA)与肌酐(Cr)含量,各组小鼠血清及肾脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子水平;采用HE染色法检测肾脏病理改变;采用Western blot技术检测各组小鼠脾脏NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、p-NF-κB、NF-κB、p-IκBα、IκBα蛋白的表达.结果 甘草酸能显著降低血清尿酸、肌酐含量;减少血清及肾脏IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子表达,改善肾脏病理改变;并能显著抑制NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、p-NF-κB、p-IκBα表达.结论 甘草酸对MRL/lpr狼疮小鼠肾脏起到保护作用.