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目的 建立人血浆中依替唑仑的GC-MS/MS检测方法,为临床药物分析提供依据。方法 血浆样品以甲苯提取后,采用色谱柱BR-5MS毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25 µm)程序升温,以多反应监测模式进行离子检测。利用保留时间和离子对比例定性,外标法和工作曲线定量,建立人血浆中依替唑仑的GC-MS/MS检测方法。结果 依替唑仑在0.5~600.0 ng·mL–1内线性关系良好,相关系数r=0.995,定量下限为0.5 ng·mL–1,三水平的萃取回收率和方法回收率为70%~110%,日内、日间精密度RSD均<10%,方法的稳定性良好,符合生物样品测定要求。结论 该方法灵敏准确,简便快速,适用于依替唑仑血药浓度检测。 相似文献
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目的:以L-02细胞为载体,考察不同因素(谷胱甘肽、过氧化氢、温度等)对不同质量浓度的二苯乙烯苷(300μg·mL-1、600μg·mL-1、1200μg·mL-1,分别相当于740μmol·L-1、1480μmol·L-1、2960μmol·L-1)肝细胞增殖抑制率的影响。方法培养的人肝L-02细胞分别给以经不同组合方式(与谷胱甘肽或H2O2组合给药)或不同处理方式(与H2O2组合于不同温度蒸干重溶)处理的二苯乙烯苷,采用MTS法检测二苯乙烯苷对人肝L-02细胞的吸光度,并通过公式计算抑制率,比较各组抑制率差异值。结果低浓度二苯乙烯苷(300μg·mL-1)对肝细胞增殖几乎无抑制作用;中浓度(600μg·mL-1)呈现一定抑制作用,加入谷胱甘肽(GSH)后抑制作用消失;高浓度二苯乙烯苷(1200μg·mL-1)随着GSH加入量的增加,抑制率显著下降,与阳性对照药野百合碱(MCT)(1600μg·mL-1,相当于4.92×103μmol·L-1)表现一致。二苯乙烯苷3个浓度对肝细胞增殖的抑制率(6%、25%和82%)有显著性差异,而加入不同体积分数的H2O2(0.5%和1%)对抑制率的影响变化不大。二苯乙烯苷经水溶解并于不同温度(常温、50℃和90℃)及pH 3条件下蒸干,所得样品对L-02细胞增殖的抑制率与未经处理的二苯乙烯苷组比较,没有明显变化。结论二苯乙烯苷在一定浓度范围内对肝细胞增殖有不同程度的抑制作用,且该作用与氧化或水解关系不大,具体机制有待进一步研究。 相似文献
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目的研究复方肃毒星提取物(简称肃毒星)体外对乙型肝炎病毒(HBV)复制模板共价闭合环状DNA(cccDNA)的抑制作用。 方法通过细胞计数试剂盒CCK-8检测肃毒星在恩替卡韦耐药HBV稳定复制细胞系(HepG2.A64)、野生HBV稳定复制细胞系(HepG2.2.15和HepAD38)以及肝癌细胞系(HepG2)中的毒性作用;选择安全有效的高、中、低浓度肃毒星分别处理3个细胞系,采用实时荧光定量PCR法检测细胞内HBV cccDNA水平。以高斯荧光素酶微环cccDNA(mc-cccDNA)转染HepG2细胞,同时选择高、中、低浓度的肃毒星在不同时间点作用转染mc-cccDNA的HepG2细胞,荧光素酶检测试剂盒分析相对荧光强度,计算对cccDNA的抑制率,评价cccDNA转录活性。 结果肃毒星在HepG2.A64、HepG2.2.15、HepAD38和HepG2细胞中的半数毒性浓度分别为27.01 μg/ml、29.36 μg/ml、31.20 μg/ml和52.80 μg/ml。肃毒星对HepG2.A64、HepG2.2.15和HepAD38细胞中HBV cccDNA有抑制作用,最佳作用时间为5 d,5 d最大抑制率分别为(84.24 ± 2.1)%、(52.02 ± 4.74)%和(47.16 ± 6.69)%,与未用药处理组差异有统计学意义(P均< 0.05)。肃毒星对转染HepG2细胞后mc-cccDNA转录活性的最佳抑制率为(48.44 ± 4.54)%,抑制作用优于干扰素对照组(P < 0.05),略弱于特异性敲低mc-cccDNA的pLV-CRISPR处理对照组(P < 0.05),差异有统计学意义。 结论肃毒星对恩替卡韦耐药型和野生型细胞系HBV cccDNA的复制及转录均有很好的抑制作用,为慢性乙型肝炎功能学治愈新药的开发提供参考。 相似文献
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该文尝试将多指标成分同时定量分析和生物效价分析方法联合使用的模式应用于中药配方颗粒的质量评价,并以大黄配方颗粒为模式药进行了示范性研究。采用超高效液相色谱法同时测定大黄配方颗粒中芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷等10个蒽醌类化学成分的含量;在复方地芬诺酯片致小鼠便秘模型上,测定不同批次大黄配方颗粒致泻生物效价;在体外抗大鼠血小板聚集模型基础上,测定不同批次大黄配方颗粒的活血生物效价;采用SPSS统计软件对测定的10个蒽醌类化学成分与致泻、活血生物效价之间的相关性进行统计学分析。多指标化学含量测定结果显示10个批次间大黄配方颗粒的化学表征差异较大,与此同时,致泻、活血生物效价均存在一定的差异性;相关性分析结果显示大黄配方颗粒的致泻生物效价强弱和其含有的结合型蒽醌糖苷类成分的含量有显著相关性(P0.01),活血生物效价的强弱和其含有的游离型蒽醌成分的含量有显著相关性(P0.01)。综上,采用多组分化学表征和生物效价检测联用的模式可以客观量化、更全面的反映不同批次大黄配方颗粒的整体质量差异。 相似文献
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目的构建两面针干预炎症的"活性成分-炎症靶点-抗炎通路"网络关系,预测其干预炎症的靶点及机制。方法通过国内外文献调研和中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库及Pharmmapper服务器,以口服利用度(OB)和类药性(DL)作为限定条件对两面针成分进行筛选并预测和收集相关靶点。利用OMIM等数据库筛选炎症相关的基因和蛋白靶点;STRING数据库构建炎症靶点之间的交互网络;蛋白互作(PPI)网络分析获得"活性成分-预测靶点-炎症靶点"网络文件,并将其导入Cytoscape 3.5.1软件构建"活性成分-炎症靶点"网络,从而获得与两面针抗炎直接相关的靶点;利用DAVID数据库对筛选后的靶点进行KEGG通路富集,使用Cytoscape 3.5.1的插件ClueGO对其涉及的靶点进行生物学功能分析,最终合并以上关系构建"活性成分-炎症靶点-抗炎通路"网络。结果经筛选和分析获得两面针活性成分23个,抗炎靶点9个,包括COX-2、i NOS、PPARG、COX1、MAPK-14、JUN等,两面针抗炎的可能通路包括TNF信号通路、TRLs信号通路。结论初步揭示了两面针的抗炎作用是通过多成分和多靶点的相互作用,调控多条通路共同干预实现的,但关键的靶标和具体的调控机制尚待进一步的实验研究加以探索及验证。 相似文献
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采用网络药理学方法分析水蛭活血化瘀的作用机制。基于文献检索构建水蛭化学成分数据库,采用Pharm Mapper服务器反向药效团匹配方法预测成分可能的作用靶标,并根据Drug Bank数据库中FDA批准的抗血栓和抗凝血靶标,筛选水蛭活血化瘀的作用靶标,通过对靶标的KEGG通路富集分析,并用Bio Grid数据库分析蛋白质间的相互作用,构建抗凝血、抗血栓相关的水蛭活性成分-作用靶点-代谢通路网络图,探讨水蛭活血化瘀的作用机制。该研究共收集水蛭化学成分49个,包括氨基酸、多肽、脂肪酸酯、生物碱、苷类、甾体等化合物,预测成分作用靶标共376个,筛选与活血化瘀作用相关的关键靶点5个,包括纤维蛋白原、纤溶酶原、凝血酶原、尿激酶型纤溶酶原激活剂及凝血因子X,其潜在调控通路包括补体和凝血级联反应、血小板活化、血管内皮生长因子信号转导及灶性黏附等通路,体现了水蛭多成分、多靶点、多途径作用的特点,为水蛭活血化瘀作用机制的阐明提供了科学依据,并为中药的机制研究提供参考思路。 相似文献
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目的:探讨和分析中西医结合治疗精液不液化的临床效果。方法:回顾性分析我院收治的精液不液化患者的临床资料。结果:精液30分钟完全液化为痊愈;精液30分钟液化不完全为有效;精液30分钟完全不液化为无效。治疗结束后,经精液分析检查:治愈者32例(69.6%),有效者11例(23.9%),无效者3例(6.5%),总有效率为93.5%。所有病例治疗过程中无明显不良反应,9例治疗初期出现不同程度的恶心,但可耐受,未予处理,继续用药治疗后症状消失。结论:中西医结合对精液不液化导致的男性不育症具有良好的治疗作用。 相似文献
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慢性前列腺炎(Chronic prostatitis,CP)是男性青壮年常见病、多发病。由于前列腺的生理解剖特点,全身用药难以在前列腺体内达到并维持有效的杀菌药物浓度;以及前列腺发炎时其分泌的SIgA明显减少,使本病成为临床治疗上的顽症之一。近年来,笔者采用前列舒栓和单纯西药两种方法治疗慢性前列腺炎患者102例,并对其临床症状和实验室检查结果等进行了对比观察,现报道如下。 相似文献