激活蛋白1诱饵寡核苷酸对肾小管上皮细胞转化生长因子β1和白介素1β基因及蛋白表达的影响

核转录因子激活蛋白1（AP-1）在肾小管上皮细胞的活化、炎症介质产生的信号转导中起着重要作用。诱饵（decoy）核酸技术作为一个新的基因治疗策略．可特异性地阻断核转录因子的活性而抑制下游基因的表达．也极可能成为有效治疗肾脏疾病的新方法。本研究借助阳离子脂质体介导的基因转染技术，     

母乳中溶菌酶浓度的测定

对23例第一胎产妇的母乳进行动态测定溶菌酶浓度,共117次。并在产后每周取奶一次共4次进行观察,测定结果均值及各受试者之间母乳中溶菌酶含量均有显著差异,P<0.01其平均值在一周内逐日上升,以产后第六天为最高,在国内首次证实初乳中有高浓度的溶菌酶。它和母乳中其它的防御因子一样,对婴儿的健康发育是有着重要意义。     

卡介菌多糖核酸对变应性哮喘患儿T辅助细胞亚群平衡的影响

目的 探讨卡介菌多糖核酸(卡介苗素)在调节变应性哮喘患儿T辅助细胞(Th)亚群平衡及哮喘防治中的作用。方法 随机选择哮喘患儿33例(哮喘组),分别给予激素吸入治疗(治疗对照组)及激素吸入+卡介苗素治疗(联合治疗组),共治疗3个月。治疗前、后用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测患儿T辅助细胞1型(Th1)、T辅助细胞2型(Th2)亚群细胞及Th1/Th2比值,并检测γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4),比较两组治疗前后变化,并与正常对照组比较。结果 (1)哮喘组急性发作期Th1细胞及Th1/Th2比值下降,Th2细胞上升明显,与正常对照组相比差异有显著性(P<0.001～0.005)。(2)治疗对照组、联合治疗组外周血单个核细胞(PBMCs)中Th1细胞比例均较治疗前升高,差异有显著性(P<0.001～0.01);联合治疗组Th2细胞下调及Th1/Th2比例上升明显,差异有显著性(P<0.001);治疗对照组Th2细胞下调较治疗前差异无显著性(P>0.05),Th1/Th2改善明显,差异有显著性(P<0.005)。(3)联合治疗组Th1/Th2比值改善好于治疗对照组,差异有显著性(P<0.05),但两组患儿Th1/Th2比值与正常对照组比较差异有显著性。结论卡介苗素治疗有助于哮喘患儿Th2型免疫亢进向Th1型免疫转化,可望在防治哮喘发作中起到积极作用。     

细胞凋亡与大鼠肾小球硬化关系的初步探讨

目的：通过实验性动物模型观察细胞凋亡与肾小球硬化发生发展的相关性。方法：侧肾切除加静脉注射柔红霉素的方法建立大鼠肾小球硬化模型，应用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察细胞凋亡的发生。结果：①建立的大鼠肾小球硬化模型，其组织形态学特征类似于人类局灶性节段性肾小球硬化的发生发展，第4周开始出现硬化病灶，第8周肾小球大部分节段均成为硬化病灶。②TUNEL结果显示，对照组大鼠肾组织中仅存在极少的细胞凋亡现象；肾小球硬化模型的肾组织2周组无显著的细胞凋亡现象；4周组开始出现小球细胞凋亡现象，与对照组比较差异有显著性［(5.4±1.2) vs (1.6±0.8)］(P<0.01)；6周至8周组小球细胞凋亡达高峰，凋亡细胞数分别为(8.6±2.8)，(10.1±1.9)，与对照组比较［分别为(1.8±0.8)，(1.7±0.5)］，差异有显著性(P<0.01)。③4周～8周(硬化初、中期)，硬化肾小球中出现的凋亡细胞数与肾小球细胞总数呈明显负相关(r=-0.85，P<0.01)；8周(硬化后期)以后，硬化肾小球内出现的凋亡细胞数与肾小球细胞总数呈正相关(r=0.91，P<0.01)。结论：细胞凋亡与大鼠肾小球硬化发生的范围及进展的时相密切相关，细胞凋亡可能是引起肾小球固有细胞减少的重要机制之一。     

急性肾小球肾炎和紫癜性肾炎患儿外周血单个核细胞IL-13变化的临床意义

目的　观察白细胞介素 13 (IL- 13 )在急性肾小球肾炎 (AGN)和紫癜性肾炎 (HSPN)患儿中的变化 ,并探讨其临床意义。方法　应用 EL ISA法检测 2 4例 AGN和 2 0例 HSPN患儿外周血单个核细胞 (PBMC)培养上清中 IL - 13的水平。结果　 AGN急性期和 HSPN活动期 PBMC培养上清中 IL - 13水平显著高于恢复期和正常对照组 ,恢复期降至正常水平。结论　 IL - 13在 AGN和 HSPN发病机制中发挥着一定的作用。 PBMC培养上清中 IL - 13水平的变化可作为观察病情活动状态的一个免疫学指标     

IL—10抑制人肾系膜细胞环氧化酶—2及其介导的前列腺素E2的释放

目的观察白细胞介素-10(IL-10)对IL-1β诱导的人系膜细胞(HMC)前列腺素E2(PGE2)释放及环氧化酶-2(COX-2)基因和蛋白表达的影响.方法应用放射免疫测定法检测HMC培养上清中PGE2,应用RT-PCR和westernblot检测COX-2mRNA和蛋白水平.结果①IL-1β显著上调PGE2释放及COX-2基因和蛋白的表达(P均＜0.01);②IL-10对基础状态下PGE2释放及COX-2基因和蛋白表达无明显影响(P＞0.05);③IL-10可呈剂量依赖性地下调IL-1β诱导的PGE2释放及COX-2mRNA和蛋白表达(P＜0.01).结论IL-10抑制IL-1β诱导的HMCPGE2释放及COX-2表达,提示IL-10对HMC具有多方面抗炎作用.     

肥胖相关新基因NYGGF4对3T3-L1脂肪前体细胞的增殖调节作用

目的 观察NYGGF4基因过表达对3T3-L1脂肪前体细胞增殖的影响,探讨该基因在肥胖发生发展中的作用.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增NYGGF4开放阅读框(ORF)的全长,通过双酶切连接法构建NYGGF4-pcDNA3.1真核表达载体.采用脂体法转染3T3-L1前体脂肪细胞,以pcDNA3.1空载和未转染细胞为对照.遗传霉素(G418)压力筛选稳定转染细胞株,PCR鉴定转染细胞的NYGGF4的mRNA水平.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测稳定转染细胞株连续7 d的生长状态,以转染空载和未转染正常3T3-L1为对照,绘制生长曲线.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 1.稳定转染细胞株有NYGGF4基因的表达,而pcDNA3.1空载未见人源性NYGGF4的表达;2.转染NYGGF4基因的3T3-L1细胞增殖速度明显较未转染和转染空载的3T3-L1细胞加快.结论 新基因NYGGF4可明显促进3T3-L1脂肪前体细胞的增殖,可能影响肥胖的发生发展.     

血液透析对外周血单个核细胞分泌白细胞介素13的影响

为探讨终末期肾功能衰竭病人血液透析过程中免疫功能改变，采用改良Ｅｓｎａｕｌｔ Ｓ法进行外周血单个核细胞分离及培养与酶免疫吸附法检测，对１２例终末期肾衰病人在采用不同透析膜血透时，外周血单个核细胞培养上清中白细胞介素１３的水平进行观察。发现血透前ＩＬ－１３与正常对照无明显差异，而血透后ＩＬ－１３水平明显降低，但不同透析膜对ＩＬ－１３的影响无显著差异。提示在终末期肾衰病人的血透过程中，存在Ｔdisplay st     

低密度脂蛋白对体外培养的人肾小球系膜细胞产生活性氧的影响

观察了人低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的人行小球系膜细胞（ＧＭＣ）Ｈ２Ｏ２和Ｏ２－产生的影响，并与经ＬＤＬ刺激后ＧＭＣ的增殖水平及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）水平相比较，结果发现：经ＬＤＬ刺激３０ｍｉｎ，浓度≤１００ｍｇ／Ｌ时，ＬＤＬ能明显促进ＧＭＣ释放Ｈ２Ｏ２和Ｏ２－，＞１００ｍｇ／Ｌ时，ＧＭＣ上清中该类物质的浓度并不随之增加。ＬＤＬ刺激ＧＭＣ释放Ｈ２Ｏ２和Ｏ２－的浓度曲线与经ＬＤＬ刺激４８ｈ后ＧＭＣ的增殖曲线以及ＬＤＨ释放曲线相符合。说明ＬＤＬ除可直接影响ＧＭＣ增殖外，尚可通过对ＧＭＣ释放或产生活性氧和ＬＤＨ等炎性介质来间接损伤肾小球。