Tip30基因对肝细胞肝癌血管生成能力的影响

目的 转染Tip30基因至肝癌细胞株HepG2,研究其对肝癌细胞血管生成的影响。方法 聚乳酸-羟乙酸(PLGA)纳米粒介导含Tip30基因的腺相关病毒质粒(pAAV)转染HepG2细胞后,RT-PCR法检测血管生成相关因子TSP-1和PD-ECGF mRNA的表达;四氮唑盐(MTS)比色法分析HepG2细胞转染培养上清液对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖的影响。小孔趋化分析实验观察HepG2细胞转染培养上清液对HUVECs的趋化作用。结果TSP-1和PD-ECGF mRNA的表达受Tip30基因调控。MTS法检测到Tip30转染后HepG2细胞能够促进HUVECs的增殖。Tip30基因转染HepG2肝癌细胞后的培养上清液使HUVECs的迁移能力减弱。结论 Tip30能调控相关血管生成因子,可显著降低HWECs的增殖和迁移,在抑制肝细胞癌的血管生成中有一定的作用。     

STK15基因多态性和前列腺癌危险性的病例-对照研究

目的 探讨丝氨酸苏氨酸激酶15T基因(STK15)多态性和前列腺癌发生的关系.方法 采用病例对照研究方法,以聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测275例前列腺癌患者和500例正常对照者STK15 Phe31 Ile基因型,比较不同基因型与前列腺癌危险性及其病理特征的关系.结果 STK15 Phe31 Ile三种基因型(Phe/Phe、Phe/Ile、Ile/Ile)在病例组的分布频率分别为21.4％、24.6％和54.0％,在对照组分别为25.6％、39.7％和34.7％,分布差异具有显著性(P=0.024).携带STK15 Ile/Ile基因型者患前列腺癌的风险比携带STK15 Phe/Phe基因型者增加174％(OR=2.67,95％ CI=1.143～6.593),此种风险的增加在吸烟患者中更为显著(OR=5.429,95％CI=1.478～24.542).未现STK15 Phe31 lie基因多态与前列腺癌病理特征相关.结论 STK15 Phe31 Ile基因多态可能是前列腺癌的遗传易感因素.     

芪麝丸体外释放度研究

目的 研究芪麝丸在2种溶出介质中的溶出特性,为建立以溶出法评价该制剂质量方法奠定基础.方法 采用浆法,以1％聚山梨酯80水溶液和0.5％十二烷基硫酸钠(SDS)水溶液为溶出介质,以HPLC法测定的毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芒柄花苷、洋川芎内酯Ⅰ、洋川芎内酯A、青藤碱为指标,考察芪麝丸在不同时间的累积溶出度,同时比较采用不同溶出介质时的各成分释放情况,拟合其溶出模型,求算溶出参数.结果 青藤碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、洋川芎内酯Ⅰ、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、洋川芎内酯A分别在0.718～10.770、0.190～2.850、0.100～1.500 μg、31.4～471.0、34.0～510.0、33.6～504.0、40.0～600.0 ng呈良好线性关系,以1％聚山梨酯80水溶液为溶出介质时,在45 min时各指标成分的累计溶出率均达到90％以上(毛蕊异黄酮葡萄糖苷除外),以0.5％ SDS水溶液为溶出介质时,各指标成分溶出均较缓慢.在2种介质中Weibull模型拟合芪麝丸中7种指标成分均较好,但个别成分在不同种介质中的其他模型拟合相关性更高.f2相似因子法作为模型比较表明芪麝丸中同种成分在2种不同溶出介质下的溶出不具有相似性.结论 各指标成分在1％聚山梨酯80水溶液中的溶出速率明显快于0.5％ SDS水溶液;以1％聚山梨酯80水溶液为溶出介质时,各指标成分的溶出具有相似性,释放具有同步性.芪麝丸溶出研究适合在1％聚山梨酯80水溶液的介质中进行.     

萘磺酸钠修饰的石墨烯基Fe3O4复合材料的制备与载药性能评价

目的:制备采用1-萘磺酸钠修饰的石墨烯基Fe₃O₄复合材料,并对其性能进行评价.方法:用1-萘磺酸钠进行修饰制备石墨烯基Fe₃O₄复合材料Fe₃O₄/GO-NA,同时进行磁性测定,然后包封盐酸多柔比星(DOX),得到Fe₃O₄/GO-NA/DOX,用高效液相色谱法测定DOX的含量,对其高效装载、缓释性、稳定性和细胞毒性进行分析.结果:Fe₃O₄/GO-NA具有超顺磁性,饱和磁化强度为16.5 emu·g^-1,Fe₃O₄/GO-NA/DOX对DOX的载药率为(68.59±1.02)%(n=3),缓释性及稳定性良好,并且基本无生物毒性.结论:Fe₃O₄/GO-NA/DOX制备工艺可行,性能良好,具有广阔的应用前景.     

磁性药物纳米粒在体内的靶向分布及其对肝癌的疗效研究

目的　了解磁性药物纳米粒在体内的靶向分布及其对肝癌的疗效研究。方法　将磁性药物纳米粒经肝动脉注入患有植入性肝癌的小鼠体内。结果　经过外部磁场的诱导 ,磁性药物纳米粒在肝脏肿瘤部位积聚 ,在正常肝组织和肺组织中显著减少 ,在肾脏、心脏、脾脏、小肠及胃中持续维持低水平。纳米粒能够选择性分布在肿瘤组织中。结论　利用磁性纳米粒以提高肝癌的治疗效果 ,减少药物对重要器官的副作用是很有发展潜力的     

交变磁场下Fe3O4纳米磁流体对裸鼠移植性肝癌的杀伤作用

目的 研究交变磁场作用下Fe3O4纳米磁流体对HepG2裸鼠移植性肝癌细胞的杀伤作用.方法 建立HepG2裸鼠肝癌移植模型,将荷瘤裸鼠随机分成空白对照组、磁场空白组、Fe3O4纳米磁流体组3组.其中空白对照组不做任何处理;磁场空白组仅接受磁场作用不做其他处理;Fe3O4纳米磁流体组于裸鼠肿瘤部位直接注射PEG(polyethylene glycol)-PEI(polyetherimide)/Fe3 O4纳米磁流体后接受磁场作用.实验中,交变磁场发生频率为40 kHz,磁场强度峰值为5 kA/m,作用时间为15 min/d,共15 d,观察并记录7、15 d两个时段皮下肿瘤体积、重量的变化情况,以及肿瘤的病理改变和肝癌细胞凋亡情况.结果 裸鼠移植性肝癌肿瘤的成瘤率为100%,7和15 d的记录显示Fe3O4纳米磁流体组裸鼠肿瘤体积和重量均小于其他两组,抑瘤率为54.20%(t=14.506,P＜0.01),明显高于磁场空白组的22.66%(t=7.497,P＜0.05).空白对照组的肿瘤细胞生长良好,细胞密度大,核大深染,形态不规则,核分裂象多见;磁场空白组肿瘤细胞较为稀疏,间质增多,有坏死区形成;纳米磁流体组有大量的肿瘤细胞呈凝固性坏死,细胞核分解、消失,血管明显减少,肿瘤细胞分布稀疏.结论 Fe3O4纳米磁流体在交变磁场的作用下,对HepG2裸鼠移植性肝癌细胞有显著的抑制作用.

Abstract：

Objective To study the therapeutic effect of Fe3O4 nanometer magnetic fluid-induced hyperthermia on implanted liver cancer in nude mice under alternating magnetic field. Methods Nude mice model bearing implanted HepG2 was established. Mice were then randomly divided into 3 groups: the blank control group; the magnetic field group; nanometer magnetic fluid group. The magnetic field group were just put under the magnetic field; Nanometer magnetic fluid group received injection of PEG-PEI/Fe3O4 nanometer magnetic fluid under the alternating magnetic field. At the frequency of 40 kHz, and magnetic field of 5 kA/m, 15 minutes one day in the next 14 days. On the 7th day and the 15th day, the changes of tumor volume and weight were recorded, cell apoptosis were observed and recorded and pathological examination was done. Results On the 7th and the 15th day, in the nanometer magnetic fluid group, tumors' volume was smaller and the weight was lighter than other groups, and the tumor inhibitory rate of 54. 20% (t = 14. 506,P ＜0. 01 ) was significantly higher than the control group and the magnetic field group 22. 66% ( t = 7.497, P ＜ 0. 05 ). In the control group, tumor cells grew well, high density, the nucleus engrained, the shape irregular, the nuclear fission clear; compared with the control group, in the magnetic field group, tumor cells scatter thinly, intercellular substance increases, and necrosis area formed;in the nanometer magnetic fluid group, many of tumor cells died, their cell nucleus broke up and vanished,the blood vessel reduced obviously, and the tumor cell spread thinly. Conclusions Under the alternating magnetic field, PEG-PEI/Fe3O4 nanometer magnetic fluid inhibits liver cancer growth in nude mice model of HepG2.     

壳聚糖-聚乙二醇纳米粒介导的Survivin RNAi基因纳米复合物的制备及其特性研究

目的 制备壳聚糖-聚乙二醇纳米粒介导的survivin RNAi基因纳米复合物,并对其相关性质进行评价.方法 通过接枝共聚法制备出空白壳聚糖-聚乙二醇纳米粒;通过静电吸附作用连接基因质粒形成基因纳米复合物.并对基因纳米复合物的包封率进行测定;通过Dnase Ⅰ消化壳聚糖-聚乙二醇纳米-质粒结合物以观察纳米载体对质粒的保护作用;通过对比基因-纳米复合物与裸基因对基因-纳米复合物的转染效率进行评价.结果 经电镜检测表明壳聚糖-聚乙二醇纳米粒呈球形,粒度分布均匀,粒径集中在60 nm左右;琼脂糖凝胶电泳的结果显示纳米粒能有效地保护基因质粒;不同基因纳米比的基因-纳米复合物对质粒的保护作用不同;Dnase Ⅰ消化试验证实壳聚糖纳米载体对质粒DNA有保护作用.结论 制备出的壳聚糖-聚乙二醇纳米粒粒度均匀,并且能有效地连接上质粒并对其有保护作用.壳聚糖-聚乙二醇纳米粒介导的survivinKNAi基因纳米复合物克服了KNA干扰在肿瘤的基因治疗中作用短暂和不能持久作用的不足.     

胆盐(GCDA)对肝癌细胞凋亡及其药物敏感性的影响

目的 探索胆盐(GCDA)环境下肝癌细胞株HepG2的生长情况及其对抗肿瘤药物的敏感性.方法 用不同时间或浓度GCDA处理HepG2细胞,采用MTT法检测细胞活性与增殖性;用3种抗肿瘤药对HepG2细胞进行处理,采用流式细胞分析法检测GCDA存在与缺少时的细胞周期与凋亡.结果 GCDA的处理浓度在200μM内时细胞有明显增殖作用(P<0.05);GCDA的处理时间在4 h内对细胞有增殖作用,以10～20 min最明显(P<0.05).3种药物对肝癌HepG2细胞均有杀伤作用,阿霉素(ADM)对细胞周期的影响阻滞在G0/G1,Oxaplatin与Irinotecan阻滞在S期,GCDA使Irinotecan作用下细胞凋亡率明显下降(P<0.05).结论 GCDA能诱导肝细胞癌细胞株HepG2细胞存活与增殖,GCDA对Irinotecan的药性有抵制作用,使肿瘤细胞对其的敏感性降低.     

吲哚美辛柔性纳米脂质体与普通纳米脂质体体外透皮速率的比较*◆

背景：吲哚美辛口服副作用大,将其制成软膏局部应用,透皮扩散速率较慢,影响吸收。柔性纳米脂质体是一种新型的经皮给药载体,对药物的皮肤渗透有显著的促进作用。 目的：制备吲哚美辛柔性纳米脂质体并观察柔性纳米脂质体对吲哚美辛离体透皮扩散速率的影响。 设计、时间及地点：体外对照观察,于2008-07/2009-01在中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室完成。 材料：用薄膜超声法制备吲哚美辛纳米柔性脂质体。 方法：采用小鼠体外皮肤的Franz扩散池作为渗透屏障进行体外透皮吸收实验,对比柔性纳米脂质体和普通脂质体的药物渗透速率。 主要观察指标：粒径、回收率、包封率、药物累积渗透速率。 结果：纳米脂质体作为载体粒径小,包封率高,具有可变形性,能顺利携带药物透过皮肤,提高吲哚美辛的透皮速率;与普通纳米脂质体相比,柔性纳米脂质体透皮速率更高。 结论：柔性纳米脂质体可显著地促进吲哚美辛的透皮吸收。     

MMP-1在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的明确MMP-1在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测MMP-1在正常肝组织和肝癌组织中的表达,采用卡方检验评估MMP-1表达与临床病理参数的相关性,对预后因素进行多元回归分析。结果 MMP-1在正常肝组织呈低表达,在肝癌组织中高表达,与肝细胞癌复发、TNM分期以及门静脉浸润显著相关(P<0.01)。在多元回归分析中,MMP-1表达是影响患者总生存率与无病生存率的独立预后因素(P<0.01)。结论 MMP-1可作为预测肝细胞癌患者复发和转移的新指标,也是预后不良的重要指标。