大鼠脊髓半离断模型制备新方法

目的:采用一种自行设计的新方法,制作脊髓半离断动物模型,观察术后大鼠的运动功能和病理变化.方法:取50只SD大鼠,随机分为3组,假手术组为A组10只,40 只为手术组(其中20只,暴露T8-12,用11号手术尖刀片,做T10半离断制成 hSCI模型为B组;另20只,暴露T8-12,用自制弯针,划断脊髓,制成 hSCI 模型为c组).术后不同时间观察脊髓组织学变化,记录脊髓神经功能综合评分(CBS).结果:术后CBS评分两个比较q检验发现手术组与假手术组有显著意义(P<0.01),但B组与C组CBS评分无显著性差异(P0.05).假手术组术后大鼠1周能里站立行走,脊髓结构正常;而手术组术后7周患侧后肢拖着行走,脊髓结构半离断.结论:用弯针划断和11号刀片离断制成hSCI模型具有相同的效果,而弯针划断制备的模型感染少,安全简便易行.     

208例无症状性心肌缺血患者心率变异的临床观察

目的：探讨心率变异（heart rate variability HRV）在无症状心肌缺血（silent myocardial ischemia SMI）病人中的变化及临床意义。方法：用动态心电图（ambulatory electrocardiogram AECG/Holter）检测无症状心肌缺血患者208例,进行心率变异测定,并与心肌梗死组指标进行比较。结果：SMI组HRV各项指标均显著低于正常对照组（P〈0.01）,与心肌梗死后SMI组比较（P〈0.05）。结论：SMI病人存在自主神经功能受损,心肌梗死后SMI自主神经功能受损较重。     

手术学实验室中的心搏骤停复苏的应用17例

心搏骤停是临床上最紧急和最严重的情况,而在手术学动物手术过程中也时有发生.如抢救不及时,措施不合理,动物将因缺氧、缺血而迅速死亡,导致实验失败,影响实习效果.随着医学的发展,复苏的内容和概念已经发生变化.现代医学将有关抢救的各种重危情况所采取的措施都称为复苏.以前的复苏指心肺复苏(CPR),是针对呼吸和循环骤停所采取的抢救措施,以人工呼吸代替病人的自主呼吸,以心脏按压形成暂时的人工循环并诱发心脏的自主搏动.我实验室自1998～2005年间抢救了手术中发生心搏骤停的家兔17例,现分析报告如下.     

糖尿病患者窦性心率震荡与心率变异性的检测及临床意义

窦性心率震荡检测技术是国外新近提出的一项心电学新指标[1-2],是检测和评估体内自主神经调节功能的平衡及稳定性的新技术,是在一次室性期前收缩后窦性心率有无暂时性先增快后减慢的动态反应,存在则说明自主神经的调节功能尚属正常,消失者提示体内交感神经有过度兴奋、作用占优势的情况.本研究从心电学角度,通过评价自主神经功能的指标窦性心率震荡及心率变异,对416例受检者进行对比分析,观察糖尿病(DM)患者窦性心率震荡的特点及其与心率变异的关系,以及其临床意义,检验窦性心率震荡及心率变异是否是评价糖尿病患者自主神经功能的有效指标.     

不同年龄段大鼠骨髓基质干细胞生物学特性的比较

背景：骨髓基质干细胞取材方便,增殖力强,具有多向分化潜能,且可自体移植,是组织工程中理想的种子细胞。年龄等因素对骨髓基质干细胞生物学特性的影响鲜见报道。目的：比较不同年龄段大鼠骨髓基质干细胞生物学特性的差异,为临床细胞移植提供实验依据。方法：骨髓基质干细胞供体为SD大鼠。按细胞来源分为3组,即幼年组、成年组和老年组。无菌条件下剪断大鼠股骨两端,用含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液冲洗骨髓腔,收集骨髓冲洗液,吹打制成单细胞悬液,通过200目的筛网滤过后将其置于培养瓶中培养。取第2代生长均一的细胞,CD44,CD29,CD90 免疫荧光鉴定;观察细胞形态及黏附速度;细胞计数,绘制生长曲线;MTT法检测3组细胞的增殖活力。结果与结论：CD44,CD29,CD90免疫染色细胞呈阳性;幼年组骨髓基质干细胞的黏附速度快于成年组和老年组;细胞增殖幅度明显 (P < 0.05);MTT法测定结果显示幼年组骨髓基质干细胞活力强,与另外两组比较差异具有显著性意义(P < 0.05)。提示幼年SD大鼠骨髓基质干细胞增殖快、活力强、可在短时间内大量扩增,是理想的组织工程细胞。     

瓦勒变性坐骨神经段对大鼠BMSCs向SCs分化的影响

 目的:通过观察瓦勒变性坐骨神经段对大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）增殖、分泌功能以及向施万细胞（Schwann cells, SCs）分化的影响,探讨其在BMSCs向SCs分化中的作用及可能的机制。方法:采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs,并采用免疫荧光法鉴定。应用Transwell建立坐骨神经段与BMSCs双层培养体系,将实验分为瓦勒变性坐骨神经段与BMSCs联合培养组（A组）、正常坐骨神经段与BMSCs联合培养组（B组）和BMSCs单独培养组（C组）。倒置相差显微镜观察联合培养过程中BMSCs 形态变化;免疫荧光染色检测联合培养第7天各组BMSCs表达S-100情况;联合培养第0、1、4、7、11、14天,利用细胞计数法绘制各组BMSCs生长曲线,ELISA法检测各组培养液上清中神经生长因子（nerve growth factor, NGF）含量,实时荧光定量PCR检测各组BMSCs中S-100 mRNA表达情况。结果:成功分离培养BMSCs,免疫荧光鉴定BMSCs呈CD29、CD44和CD90表达阳性。联合培养第7天倒置相差显微镜观察可见,A组BMSCs胞体回缩,呈梭形,并带有突起,形态类似SCs;B、C 组大部分BMSCs 形态无明显变化。联合培养第7天免疫荧光染色示,A、B、C 组 BMSCs S-100阳性表达率分别为31.1%±2.9%、16.2%±1.7%和0.42%±0.07%,A组阳性表达率明显增高（P<0.05）。各组BMSCs生长曲线均近似“S”形,从第4天开始,A组BMSCs增殖速度明显快于B、C组（P<0.05）;ELISA 法检测示,A 组NGF含量呈时间依赖性增加,于联合培养第7天达高峰,随后呈下降趋势。B、C 组NGF含量随共培养时间延长有所增加,但显著低于A组（P<0.05）;实时荧光定量PCR检测示,联合培养第4、7、11、14天,A组S-100 mRNA表达明显高于B、C组（P<0.05）。结论: 瓦勒变性坐骨神经段能有效促进大鼠BMSCs增殖并诱导BMSCs向SCs样细胞分化,联合培养过程中NGF可能参与BMSCs向SCs分化的调控。