小鼠IL-33的原核表达、纯化及鉴定

目的: 在大肠杆菌中表达具有生物学活性的白细胞介素-33(mIL-33).方法: 用PCR技术扩增小鼠IL-33成熟蛋白的编码区, 与原核表达载体pET-44连接, 构建pET-44-mIL-33表达载体, 转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达, 镍柱亲和层析法纯化目的蛋白, SDS-PAGE分析表达产物, MTT法测定纯化IL-33的生物学活性.结果: 成功构建了pET-44-mIL-33原核表达载体, 并在大肠杆菌中表达出可溶性mIL-33, SDS-PAGE分析纯化产物纯度为95%, 表达产量为95 mg/L.细胞增殖实验表明IL-33有抑制P815细胞增殖的活性.结论: 获得了有活性的重组IL-33蛋白纯品, 为后续功能研究奠定了基础.     

三种方法检测脑脊液结核分枝杆菌结果分析

摘要:目的　探讨离心涂片法、夹层杯法和改良罗氏培养法3种方法检测脑脊液中结核分枝杆菌对于结核性脑膜炎的诊断价值。方法　对临床确诊的结核性脑膜炎患者、高度可疑结核性脑膜炎患者共50例（结脑组）和30例非结核性脑膜炎患者（对照组）的脑脊液标本采用离心涂片法、夹层杯法和改良罗氏培养法进行检测,对其结果进行对比分析。结果　结脑组标本中,离心涂片法、夹层杯法和改良罗氏培养法阳性率分别为1.79%（1/56）、8.93%（5/56）和21.4%（12/56）,对照组均未检测到结核菌,比较结脑组3种方法的阳性检测率,其差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　培养法阳性率最高,但其检测时间长,不利于对结脑进行及时诊断,夹层杯法较离心涂片法阳性率高,有条件的医院可适当推广。     

人白细胞介素-33蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测

目的:预测人白细胞介素(IL)-33的二级结构和B细胞抗原表位。方法:以单参数(亲水性、可及性、柔韧性及抗原性)预测为基础,通过二级结构预测初步筛选,并以ABCpred方案作为最终验证,预测人IL-33蛋白的二级结构和B细胞表位。结果:人IL-33蛋白的N端1~19、59~75、108~117和204~210区段为预测的B细胞表位。结论:该预测结果将有助于确定人IL-33的B细胞表位及其生物学活性部位。     

噬菌体生物扩增法与常规方法对结核性脑膜炎诊断意义对比分析

目的评价噬菌体生物扩增法在结核性脑膜炎诊断中的价值,并与离心涂片法、Bactec 960培养法进行比较。方法应用噬菌体生物扩增法、离心涂片法、Bactec 960培养法同时对45份临床诊断为结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行检测。结果 45份标本应用噬菌体生物扩增法、离心涂片法与Bactec 960培养法的阳性率分别为37.78%、2.22%、17.78%。噬菌体生物扩增法与离心涂片法、Bactec 960培养法比较差异均有统计学意义。结论噬菌体生物扩增法检测脑脊液中结核分枝杆菌在诊断结核性脑膜炎中有较好的灵敏度,是辅助诊断和鉴别诊断结核性脑膜炎的有效手段。     

三种快速检测技术诊断早期结核性脑膜炎的评价

目的 评价3种快速检测技术在早期结核性脑膜炎诊断中的应用价值。方法 采用离心涂片抗酸染色法、改良抗酸染色法、GeneXpert MTB/RIF技术(简称“GeneXpert技术”)对2016年8月至2018年6月河北省胸科医院和石家庄市第五医院收治的根据临床表现、影像学及实验室检查等临床确诊的45例结核性脑膜炎、42例非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行分枝杆菌检测,并对结果进行分析。采用SPSS 19.0软件进行统计学分析,率的比较采用χ ²检验、校正χ ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 以临床诊断为标准,45例结核性脑膜炎患者脑脊液分别应用离心涂片抗酸染色法、改良抗酸染色法、GeneXpert技术检测分枝杆菌的敏感度分别为4.44%(2/45)、88.89%(40/45)、35.56%(16/45);依次两两比较,差异均有统计学意义(χ ²值分别为64.46、13.16、27.23,P值均=0.000)。42例非结核性脑膜炎患者的脑脊液用离心涂片抗酸染色法、改良抗酸染色法、GeneXpert技术检测分枝杆菌均为阴性。3种检测技术检测分枝杆菌的特异度均为100.00%。结论 改良抗酸染色法较离心涂片法及GeneXpert技术检测分枝杆菌阳性率高,具有较好的确诊结核性脑膜炎的价值。     

恒温扩增检测结核分枝杆菌特异性IS6110片段在肺结核检测中的应用

目的 比较恒温扩增技术检测、抗酸杆菌涂片、结核分枝杆菌培养在肺结核患者检测中的应用.方法 收集2016年1月1日至12月31日我院呼吸科肺结核患者清晨痰液,将标本分为3份,分别进行痰涂片抗酸染色,结核菌培养及恒温扩增检测结核分枝杆菌特异性IS6110片段,统计分析3种方法的检测结果.结果 56例痰标本,恒温扩增检测结核分枝杆菌特异性IS6110片段阳性33例,阳性率为58.93％,抗酸染色阳性15例,阳性率为26.79％,恒温扩增检测结核分枝杆菌特异性IS6110片段阳性率高于抗酸染色方法;结核分枝杆菌培养阳性为35例,阳性率62.50％;恒温扩增检测结核分枝杆菌特异性IS6110片段和结核分枝杆菌培养两种方法检测Kappa系数为0.776,检测一致性较好.结论 恒温扩增检测结核分枝杆菌特异性IS6110片段是一种简便、高灵敏度的检出结核分枝杆菌的方法.