miRNA-95在骨肉瘤组织中的表达及其对MG-63细胞增殖和侵袭的影响

目的：研究miRNA-95在骨肉瘤组织和细胞株中的表达情况及其对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、细胞周期和侵袭 能力的影响。方法：以实时荧光定量PCR检测15例骨肉瘤组织及其癌旁组织（标本收集自2015年1月至2018年1月青岛市海 慈医疗集团外科手术的病例）和骨肉瘤细胞株（MG-63、 U2OS、143B和HOS）与正常人成骨细胞株hFOB1.19中的miRNA-95表 达。利用Lipofectamine 2000将miRNA-95 mimics和miRNA-95 inhibitors分别转染至人骨肉瘤MG-63细胞株中,并设置miRNANC对照组,CCK-8法检测各组细胞增殖活力变化,流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡变化,Transwell方法检测各组细胞侵袭 能力变化,双荧光素酶活性实验检测并验证miRNA-95在MG-63细胞中的靶向基因。结果：miRNA-95在人骨肉瘤组织中的表 达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）, 在MG-63、 U2OS、143B和HOS细胞中的表达水平显著高于hFOB1.19,且在MG-63细胞中表 达水平最高（P<0.01）。与miRNA-NC对照组相比,miRNA-95 mimics组中MG-63细胞的增殖活力显著上升、细胞凋亡率显著下 降而侵袭率显著上升（均P<0.01）、 而miRNA-95 inhibitors组中MG-63细胞增殖活力显著下降、细胞周期被阻滞、细胞凋亡率显著 上升而侵袭率显著下降（均P<0.01）;miRNA-95在骨肉瘤MG-63细胞中靶向上皮膜蛋白-1（epithelial membrane protein-1,EMP-1） 基因发挥作用。结论：miRNA-95在人骨肉瘤组织和细胞中均呈高表达,抑制骨肉瘤MG-63细胞中miRNA-95表达能够促进细 胞凋亡进而抑制细胞增殖、细胞周期及侵袭能力,该作用可能通过靶向EMP-1基因而发挥。     

先心病房间隔缺损的X线诊断

房间隔缺损,是临床上常见的先天性心脏病之一,占先天性心脏病的首位,国内统计资料约为21.4%[1].     

异源双链核酸分子与突变检测

PCR产物经加热变性后再缓慢复性时,由野生型和突变型DNA所形成的异源双链分子具有某些特性,如Tm值和电泳泳动性的改变、能被一些酶所裂解或化学试剂修饰等。根据这些特性,目前已建立了几种检测基因突变的方法。本文简要介绍与异源双键的形成有关的DNA未却突变的检测方法,并就其原理、应用和主要优缺点等作一概述。     

戊型肝炎IgM抗体诊断试剂的临床应用评价

目的评价2种戊型肝炎病毒(HEV)IgM抗体诊断试剂的可靠性。方法用捕获法试剂(E2 IgM)和间接法试剂(GL IgM)对349例临床诊断为急性戊型肝炎及急性非甲~戊型肝炎患者的血清进行HEV IgM检测。同时结合其HEV RNA检测结果作为戊型肝炎的确认标准,以此为依据对2种HEV IgM诊断试剂和以往常用的ELISA试剂的可靠性进行评估。同时检测69例散发性急性肝炎患者血清的HEV IgM及甲型肝炎病毒(HAV)IgM,分析HAV IgM对HEV IgM检测可能造成的干扰。结果E2 IgM试剂的敏感性为98.2%,特异性为100.0%;GL IgM试剂的敏感性仅为60.0%,特异性为91.7%;而传统诊断方法的敏感性为77.9%,特异性仅66.0%,三者差异有统计学意义(P<0.05)。E2 IgM、GL IgM及传统诊断方法的总符合率分别为99.1%、85.5%和70.5%。HAV IgM有可能导致GL IgM试剂的假阳性。结论E2 IgM试剂是一种良好的戊型肝炎急性诊断试剂,在临床应用中优于GL IgM试剂和传统诊断方法。     

空气灌肠对小儿肠套叠复位探讨

肠套叠是一种常见的小儿急腹症,为部分肠管及其粘膜套入临近肠腔所致的一种绞窄性肠梗阻,以4个月。10个月婴儿最为多见,2岁以后渐减。本病1岁以内者60％,但新生儿罕见,男孩明显高于女孩,约为4：1。本文收集我院自2001年-2005年间接受空气灌肠的肠套叠病例41例,对其进行回顾性分析,拟在总结经验,进一步改进肠套叠整复的操作方法,不断提高肠套叠尤其较复杂肠套叠的整复率。     

乙型肝炎病毒前S区缺失突变与乙型肝炎病毒相关肝细胞癌的关系

流行病学调查显示,慢性HBV感染是肝细胞癌(肝癌)发生的重要危险因子,但HBV的致癌机制至今不甚清楚.近年研究显示,HBV前S区缺失突变与肝病进展相关[1-2].本研究采用PCR测序法调查HBV相关肝癌患者和慢性乙型肝炎患者HBV前S区缺失突变频率,探讨前S区缺失突变与HBV相关肝癌的关系.     

血清谷氨酸脱氢醇对肝病诊断的临床意义（附231例分析）

血清谷氨酸脱氢酶 (GL DH)主要分布在肝细胞 ,正常血清 GL DH活性很低 ,但在肝脏疾病尤其涉及肝细胞线粒体损害时活性显著升高 ,是肝实质损害的敏感指标。本文测定了各种肝病患者及健康献血员 GL DH活性以评价其临床意义 ,发现 GL DH酶活性与各型肝炎的肝脏损害程度有关 ,报告如下。1　资料与方法1 .1　实验对象 :2 31例各型肝炎病患者均为 2 0 0 3年 3～ 7月份住院患者 ,其中男性 1 6 5例 ,女性 5 1例 ;年龄 5～ 78岁 ,平均 37.2 6岁。其中急性肝炎 5 3例 ,慢性肝炎轻度 4 0例 ,慢性肝炎中度 5 8例 ,慢性肝炎重度 37例 ,肝炎后肝硬…     

3年自发性细菌性腹膜炎病原菌及耐药性的回顾性分析

目的探讨终末期肝病合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)的病原菌分布特点及细菌耐药趋势。方法对医院2007年1月-2009年12月住院的肝病合并SBP患者腹水病原菌及药敏试验结果进行分析。结果在腹水细菌培养阳性的64例标本中,革兰阴性菌36株,占56.3%,革兰阳性菌28株,占43.7%,从2007-2009年革兰阳性菌呈逐年递增的趋势;革兰阴性菌对含β-内酰胺酶抑制剂的抗菌药物耐药率较低;革兰阳性菌对万古霉素、呋西地酸较敏感,对青霉素、苯唑西林、庆大霉素、红霉素的敏感性均较低。结论 SBP感染的细菌谱在不断变化的,目前革兰阳性菌引起的SBP日益多见;产β-内酰胺酶的革兰阴性菌和耐甲氧西林葡萄球菌的大量出现给临床治疗带来了困难;因此,迫切需要通过监测SBP的细菌流行病学特征,更合理地选择经验性治疗的抗菌药物。     

乙型肝炎病毒包膜蛋白诱导肝癌细胞系内质网应激的研究

目的探讨乙型肝炎病毒前-S缺失和野生型外膜大蛋白（LHBs）诱导内质网应激反应。 方法运用脂质体转染技术将pcDNA3.1-S、pcDNA3.1-L、pcDNA3.1-L△30和pcDNA3.1-L△182等真核表达质粒转染至Huh7细胞,并应用qRT-PCR和Western blot方法检测转染细胞前-S1、前-S2、HBsAg和GRP78的mRNA和蛋白表达水平。 结果转染HBV包膜蛋白各组的HBsAg蛋白相对表达量（分别为0.92、0.83、0.91、1.75、2.53和2.06）高于空白对照（0.00）和pcDNA3.1（+）转染组（0.00）（F = 247.38、P = 0.000）;转染HBV包膜蛋白各组的GRP78的蛋白相对表达量（分别为1.4、1.47、1.55、1.75、1.8和1.9）高于空白对照（1.18）和pcDNA3.1(+)转染组（1.23）（F = 11.623、P = 0.000）;且GRP78蛋白相对表达量与前-S1、前-S2抗原和HBsAg表达量呈正相关（相关系数r分别为0.884、0.728和0.816）。 结论前-S缺失型/野生型LHBs及HBsAg均能诱导Huh7细胞发生内质网应激反应,提示其可能参与肝癌发生。