细菌L型的鉴定及药敏试验

工作中 ,我们常遇到有明显的临床症状而常规培养及厌氧培养未检出病菌的情况 ,对此类患者 ,临床上在合理选择用药时十分困难。有鉴于此 ,我们对此类送检标本均增加细菌L型鉴定试验 ,扩大检测量范围。1　材料与方法1 .1　细菌L型培养基在常用的血培养基、Macc培养基中添加3 %～ 5%NaCl、1 0 %～ 2 0 %庶糖、1 0 %～ 2 0 %人血清 ,配成相应的高渗培养平皿及Macc平皿 (用于大梗标本 ) ,细菌L型药物培养基普通MH平板中加入 1 0 %～ 2 0 %庶糖、1 0 %～ 2 0 %人血清。1 .2　标本来源取自我院 2 0 0 1年 1月至 2 0 0 1年 1 2月的住院及门诊病…     

PKC信号传导对ITP患儿T淋巴细胞增殖与凋亡的调控研究

经确诊的35例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿为观测对象,男15例,女20例,年龄1岁~14岁,中位年龄5.3岁。正常对照30例为健康儿童,排除ITP及其它自身免疫性疾病,其中男13例,女17例,年龄1.5岁~12岁,中位年龄4.5岁。收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血,分离纯化T细胞。以20%小牛血清RPMI1640培养液调整T细胞浓度至106/ml,接种于24孔培养板中,每份标本接种6孔,编为3组,每组2孔。第1组为空白对照组、第2组加入蛋白激酶C(PKC)激动剂PMA、第3组同时加入激动剂PMA和抑制剂H-7,于37℃,5%CO2培养24、72h,采用CCK-8法检测T细胞的增殖能…     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法（以下简称本改良法）、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异（χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404）,但明显高于常规抗酸染色法（U=3.713,P〈0.0010）;本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法（5minvs24h）。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。     

乙型肝炎病毒大蛋白检测对乙型肝炎的诊断价值

目的 探讨乙型肝炎病毒大蛋白（HBV-LP）检测对乙型肝炎诊断及判定乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）复制的意义.方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测乙型肝炎病毒标志物（HBVM）和HBV-LP;用荧光定量PCR方法 检测HBV-DNA.结果 179例乙型肝炎患者血清标本中PreS1Ag、HBV-LP和HBV-DNA总的检测阳性率分别为65.92%、79.33%和72.07%,HBV-LP检测阳性率明显高于PreS1Ag检测阳性率,与HBV-DNA比较差异无统计学意义.HBeAg、PreS1Ag和HBV-LP与HBV-DNA总的检测符合率分别为67.04%、78.20%和89.38%,HBV-LP明显优于HBeAg和PreS1Ag.129例HBV-DNA阳性血清标本中,HBeAg、PreS1Ag和HBV-LP阳性检测符合率分别为58.13%、80.62%和97.67%,后者显著高于前二者.88例HBeAg阳性组和99例HBeAg阴性组中HBV-DNA、HBV-LP和PreS1Ag的检测阳性率分别为93.75%、95.00%和85.00%及54.55%、66.67%和50.51%,HBV-LP明显高于PreS1Ag（P＜0.01）,与HBV-DNA比较差异无统计学意义.结论 HBV-LP与HBVM及HBV-DNA有良好的检测互补性,是乙型肝炎诊断及HBV-DNA复制判定的良好指标.     

粉尘螨过敏原Der f15的表达、纯化和生物信息学分析

目的表达纯化出粉尘螨过敏原Der f15蛋白,并预测其三维结构及B细胞抗原表位。方法利用实验室已有的Der f15质粒转化到大肠杆菌Rosetta,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过亲和层析纯化蛋白,经免疫印迹法(Western-blot)分析Der f15免疫原性,用生物信息学方法分析Der f15的三维结构及B细胞抗原表位。结果高效表达出Der f15蛋白。SDS-PAGE结果显示:表达的产物分子量约107ku。经亲和层析成功纯化蛋白,纯化蛋白以尘螨过敏患者血清为一抗进行Western-blot,结果显示:Der f15重组蛋白能与患者血清IgE发生特异性结合,而阴性对照没有反应条带出现,表明Der f15具有良好的抗原性。对B细胞抗原表位的预测表明,Der f15蛋白的第20~35、121~131、340~359及485~500是潜在B细胞抗原表位。结论粉尘螨Der f15表达、纯化和生物信息学分析研究有助于了解Der f15蛋白的分子生物学特性,为粉尘螨过敏反应性疾病的特异性诊断和疫苗治疗奠定理论基础。 更多还原     

外周血雌二醇水平和CD4~+CD25~+Treg细胞与反复自然流产相关性研究

目的探讨外周血雌二醇水平和CD4^＋CD25^＋Treg细胞在反复自然流产发病机制中的作用。方法采用电化学发光法检测30例反复自然流产患者,90例正常妊娠女性（早、中、晚孕女性各30例）以及30例正常非孕女性外周血雌二醇水平;三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量。结果早、中、晚孕组外周血雌二醇水平均明显高于非妊娠对照组（t值分别为7．42,13．66,14．69;均P〈0．05）,并且孕周越长雌二醇水平越高;反复自然流产组明显低于正常非妊娠组（t=4．11,P〈0．05）。早、中、晚孕组外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数均明显高于正常非妊娠组（t值分别为2．22、8．9、5．91,均P〈0．05）,中孕组明显高于早孕组（t=6．31,P〈0．05）,晚孕组略低于中孕组,但差异无统计学意义;反复自然流产组明显低于正常非妊娠组（t=8．07,P〈0．05）。结论外周血雌二醇水平和CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量减低可能下调母胎免疫耐受功能,参与介导反复自然流产的发生。     

PBL教学法在卫生系列高级职称申报管理中的实践

<正>卫生系列高级职称申报是一项政策性强、牵涉面广、影响深远的重要工作,是医院人力资源管理部门日常工作的重要组成部分。目前卫生系列高级专业技术资格晋升大多采用考试和评审结合的方式。职称申报过程中普遍存在时间紧迫、文件繁杂、材料反复修改等现象,常有申报人员因错过申报期限或提交材料质量不佳而错失良机。因此,如何在短时间内做好申报人员培训工作,是一项迫切需要解决的问题。近年来,     

细菌性阴道病联合测定试剂盒方法学评价

目的分析细菌性阴道病联合测定试剂盒对细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）的诊断效能,评估其临床应用价值。方法以Amsel法为诊断BV的参考方法,随机选取罗湖区妇幼保健院妇产科门诊患者98例,每位患者均一次性留取2份阴道分泌物标本,分别采用Arosel法和联合测定试剂盒进行检测;分析联合测定试剂盒检测结果阳性率、敏感性和特异性。结果Amsel法阳性率为21．4％,联合测定试剂盒阳性率为23．5％,二者差异无统计学意义（P〉0．05）。联合测定试剂盒的敏感性为95．2％,特异性为96．1％,阳性预测值为87．8％,阴性预测值为98．7％,总有效率为95．9％。结论联合测定试剂盒检测BV有较高的敏感性、特异性和总有效率,可作为临床筛查BV的常规方法。     

儿童哮喘与血清IL-17、18和37水平的关系研究

目的探讨不同病期哮喘患儿外周血血清白介素(IL-17、IL-18浓度与IL-37浓度的相关性,以及此3种细胞因子含量变化,探讨与儿童哮喘的关系。方法采用ELISA法检测23例健康儿童(对照组),30例儿童哮喘病患儿治疗前(治疗前组)、治疗3个月(治疗3月组)、治疗6个月(治疗6月组)外周血血清IL-17、IL-18和IL-37浓度;分析不同病期患儿血清IL-17、IL-18和IL-37浓度变化,以及IL-17、IL-18浓度与IL-37浓度的相关性。结果哮喘患儿治疗前血清中IL-17和IL-18水平在各组中最高,IL-37水平在各组中最低(F值分别为177.000、43.460、3.042,均P<0.05)。治疗后哮喘患儿血清IL-17、IL-18和IL-37浓度与对照组无显著性差异(均P>0.05)。不同病期患儿血清IL-17、IL-18浓度与IL-37浓度均呈负相关(治疗前r值分别为-0.9358、-0.9105,治疗3月组r值分别为-0.9661、-0.9807,治疗6月组r值分别为-0.9796、-0.9844,均P<0.05)。结论哮喘患儿外周血血清IL-17、IL-18浓度和IL-37浓度成负相关,此3种细胞因子浓度变化可能与儿童哮喘发病有关。     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P<0.0010);本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5minvs24h)。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。