RT-PCR检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体和细胞角质蛋白-19mRNA的表达

目的　探讨逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR )方法检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA作为乳腺癌循环肿瘤细胞标志的可能性及意义。方法　以转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,分别对40例乳腺癌患者和30例健康人静脉血进行EGFRmRNA检测,同时与目前研究较多的循环上皮细胞标志:细胞角质蛋白CK-19的mRNA做比较。结果　在30例健康人外周静脉血中没有发现EGFRmR NA的表达( 0% ),但有8例CK-19阳性( 26. 7% )。而40例乳腺癌患者检测出13例EGFRmRNA阳性(32. 5% ),与正常人相比P<0. 01,两组间存在显著性差异;CK-19的mRNA阳性例数为14 (35. 0% ),与正常人相比P>0. 05,两组间无统计学差异。通过免疫组化检测到25例( 62. 5% )的肿瘤组织中EGFR阳性,所有外周血中EGFRmRNA阳性的病例,相应的原发肿瘤病灶中EGFR蛋白均为阳性,组织中EGFR蛋白高表达的患者外周血EGFRmRNA检出率也高(P<0. 01)。26例初治患者中5例EGFRmRNA阳性(19. 2% ),14例复治患者中8例EGFRmRNA阳性(57. 1% ),两组相比P<0. 05,存在显著性差异。6例曾使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中1例EGFRmRNA阳性(16. 7% ), 8例未使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中7例EGFRmRNA阳性(87. 5% ),两组相比P<0. 05,存在显著性差异。结论　CK-19的     

RNAi载体构建及其对PLC/PRF/5细胞突变p53基因抑制作用的实验研究

目的利用RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术，以突变p53基因为靶基因，构建干扰载体，并观察载体对肿瘤细胞生长周期的影响，为下一步探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。方法设计具有小发夹结构的两条DNA序列，经退火成为互补双链，再克隆至干扰载体中，转化TOP10菌株，提取质粒行酶切鉴定，稳定转染PLC／PRF／5细胞，Western blot检测p53蛋白，MTT法观察细胞生长曲线，流式细胞仪分析细胞周期变化。结果成功构建针对突变p53的特异性RNA干扰载体，此干扰载体转染PL／PRF／5细胞后，p53蛋白表达水平降低，肿瘤细胞生长速度减慢，G1期细胞分布明显增多。结论成功构建针对突变p53的RNA干扰载体，此干扰载体可以有效降低p53蛋白表达水平，导致突变p53基因沉默，进而延缓PLC／PRF／5细胞生长速度，阻滞肿瘤细胞停滞于G1期。     

新疆地区经典型卡波氏肉瘤相关因素的病例对照研究

目的分析新疆经典型卡波氏肉瘤相关危险因素。方法利用新疆8个地州市随访的经典型卡波氏肉瘤病例，按同性别、同民族、年龄相差≤5岁、同一个居住地区配对要求，1：4选取对照，开展病例对照研究，采用条件logistic回归进行统计分析。结果单因素分析显示：白细胞介素、血管内皮生长因子、β2微球蛋白（β2-MG）、新喋呤和8型疱疹病毒（HHV-8）等5个相关因素与经典型卡波氏肉瘤有关系。β2-MG和HHV-8两项危险因素进入了多因素条件logistic回归模型，其OR值分别为1．002（95％CI：1．000～1．003）、81．041（95％CI：1．790～3669．620）。结论β2-MG与经典型卡波氏肉瘤的发生呈正相关关系，HHV-8感染是经典型卡波氏肉瘤独立的危险因素。     

川芎嗪对大鼠脊髓损伤后线粒体功能的保护作用

目的探讨川芎嗪对大鼠脊髓损伤(SCI)后线粒体损伤的保护作用及其机制.方法采用Allen'sWD技术制备SCI动物模型,将30只大鼠随机分为假手术组、对照组和治疗组(川芎嗪组),假手术组不损伤脊髓,作为正常对照;对照组于造模前60min和造模后即刻经尾静脉注射生理盐水20mg/kg;治疗组在相同时相注射等量川芎嗪注射液;测定SOD和PLA2活性、MDA浓度及Ca2 -Mg2 -ATP酶活性.结果对照组脊髓线粒体膜PLA2活性、MDA浓度在伤后早期显著升高,SOD活性、Ca2-Mg2 -ATP酶活性明显降低,与假手术组比较差异有显著性;预先应用川芎嗪注射液后,能够明显抑制线粒体 MDA的生成,降低 PLA2活性,提高 SOD活性,并能防止线粒体 Ca2-Mg2 -ATP酶活性的降低.结论川芎嗪能拮抗 SCI后线粒体膜酶的活性变化,其机理可能是提高氧自由基清除能力和抑制脂质过氧化反应.     

急性迟缓性麻痹监测系统及对策分析

目的　为评价郑州市急性迟缓性麻痹 (AFP)病例监测系统的运行状况 ,进一步巩固和完善AFP监测工作。方法　对郑州市 2 0 0 0年— 2 0 0 2年AFP病例监测系统上报的数据进行分析。结果　郑州市APF监测系统共监测本地AFP病例 12 4例 ,<15岁非脊灰AFP病例报告发病率、合格粪便标本采集率、及时随访率等主要监测指标达到了达到卫生部标准的要求。同时 ,郑州市AFP监测系统监测外地AFP病例 187例 ,这些病例的合格粪便标本采集率、及时随访率等监测指标达不到卫生部要求。本地和外地AFP病例在免疫史、年龄分布方面都存在较人的差别。结论在巩固消灭脊灰成果的基础上 ,应进一步关注外地人群的免疫状况、AFP病例监测指标的完成情况 ,应继续加大宣传力度 ,进一步加强相关技术人员的培训 ,同时省市、地区之间加强信息沟通 ,及时通报相关信息 ,以维持AFP监测工作的高质量。     

Bard补片和普理灵疝装置在老年腹股沟疝无张力修补术中的应用

目的总结Bard充填式网塞及成型补片和普理灵疝装置(PHS)治疗老年腹股沟疝的手术经验。方法回顾性分析1999年1月~2004年10月应用无张力疝修补术治疗老年腹股沟疝540例的临床资料,其中采用Bard充填式网塞及成型补片462例,PHS 78例。结果全部患者治愈出院。手术时间30~140 m in,平均45 m in。平均住院5 d。术后伤口均一期愈合,无一例切口感染。术后疼痛轻微,仅7例应用止痛药物。术后并发尿潴留11例,切口脂肪液化2例,皮下及阴囊血肿、浆液肿8例。随访时间3~82个月,复发2例。结论无张力疝修补术对腹股沟疝的解剖缺陷具有针对性,符合生理,创伤小,修补可靠,恢复快,并发症少,复发率低。两种修补材料各有特点,针对性选用能更好地发挥其疗效。     

HPV核酸原位杂交技术的应用体会

尖锐湿疣是与人类乳头瘤病毒（HPV）感染有关的性传播疾病。据报道女性生殖道尖锐湿疣HPV6／11的阳性表达占96．4％。仅凭H—E切片形态难以进行判断。HPV免疫组化阳性率很低。特异性不强，核酸原位杂交具有较高的敏感性和特异性。我室于1995年开始用原位杂交的方法鉴定HPV以确诊尖锐湿疣。反复实验对地高辛标记的探针在应用技术有了新的认识和体会。     

中药复方天箭丸抗肿瘤作用实验研究

目的:研究复方天箭丸抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:通过抑瘤率及小鼠生命延长率的检测观察天箭丸灌胃给药对S180、Lewis、小鼠艾氏腹水癌(EAC)、小鼠肝癌腹水型(HepA)等移植性肿瘤的生长抑制作用;通过检测小鼠血清半数溶血值、巨噬细胞吞噬功能、血清IgG水平及免疫器官重量考察天箭丸对荷瘤小鼠的体液免疫及细胞免疫功能的影响。结果:与空白对照组相比,天箭丸(5,2.5g/kg)皆可显著抑制小鼠S180、Lewis、EAC、HepA移植性肿瘤的生长,并呈剂量依赖性。天箭丸可显著提高荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能,表明其可提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能;天箭丸还可显著提高由荷瘤引起的小鼠血清半数溶血值及血清IgG水平的降低,表明其亦可明显提高荷瘤小鼠的体液免疫功能。结论:天箭丸提高荷瘤小鼠的免疫功能是其抗肿瘤效应的机制之一。     

反相高效液相色谱法测定罗红霉素的含量

目的测定罗红霉素药物的含量。方法以安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18柱为色谱柱、乙腈-0.020mol/L醋酸铵缓冲液(体积比65∶35,pH=6.5)为流动相,选择210nm为检测波长;柱温45℃,用反相高效液相色谱法(reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定罗红霉素(Roxithromycin,RM)的含量。结果罗红霉素的浓度在1.024-102.4mg/L范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.99977,平均回收率为98.58%,相对标准偏差为1.33%(n=5)。结论该方法操作简单、快速,可用于罗红霉素含量的测定。