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目的:筛选辐射诱导的支气管上皮细胞恶性转化模型中的差异表达基因.方法:应用抑制差减杂交方法(SSH)构建辐射诱导的细胞转化模型差异表达基因的cDNA文库.对差减文库进行PCR筛选,对得到的差异片段进行测序及BLAST分析;对部分筛选出来的差异表达基因使用荧光定量PCR方法检测并确认其变化;将新的序列表达标签(EST)登录到GenBank上.结果:在80个进行测序的克隆中,得到确定序列的共73个.在转化细胞中表达下降的序列41条,BLAST比较分析结果:得到已知序列6条;未知基因的EST序列20条;空载体序列7条;8条为重复测定序列.在转化细胞中表达上升的序列32条,BLAST分析:已知序列14条;未知基因的EST序列9条;重复测定的序列9条.对其中的部分基因改变进行荧光定量PCR检测,结果表明辐射转化组中MY06、HACE1、ZNF143、HNRPH1的表达量明显增加(与对照组相比,转化组中的mRNA分别增加了3.49、29.38、12.99、5.00倍);而PCBP2、RPL15、TCERG1的表达量下降(与对照组相比,转化组中的mRNA分别减少了1.89、48.77、11.95倍).将得到的29个未知序列登录到GenBank,序列ID:EB643220~EB643248.结论:利用抑制差减杂交方法成功建立了恶性转化细胞模型差异表达cDNA文库,包含大量功能未知的新基因;ZNF143表达增加,其与细胞的增殖与分裂有关,TCERG1作为转录辅助激活因子在mRNA转录和后期的修饰过程中起到重要的作用,PCBP2是一个Polyc连接蛋白,具有蛋白翻译调节功能,这些基因在辐射致癌中尚无研究报道. 相似文献
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^60Coγ射线诱发人支气管上皮细胞恶性转化模型的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立γ射线辐射诱导支气管上皮细胞恶性转化模型。方法:永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B经总剂量22Gy^60Coγ射线分3次照射后进行传代培养,应用平板克隆实验、血清抗性实验、细胞软琼脂集落实验检测该细胞系恶性程度;裸鼠皮下种植辐射细胞检测其成瘤能力,成瘤组织H-E染色及免疫组化进行病理学观察。结果:(1)平板克隆实验表明照射细胞培养至35代后其增殖能力明显增加(P〈0.05或P〈0.01),血清抗性实验显示照射组细胞在第45代后克隆形成增加(P〈0.01),而在照射后50代细胞软琼脂集落的形成能力明显增加(P〈0.01),显示BEAS-2B细胞经辐射后出现了恶性转化。(2)皮下种植22Gy 50代细胞的8只裸鼠50d后1只成瘤,种植22Gy 60代辐射细胞的8只裸鼠中有4只成瘤;成瘤组织病理检测及免疫组化证实为上皮细胞癌。结论:成功地建立了^60Coγ射线诱导的支气管上皮细胞恶性转化模型。 相似文献
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背景与目的:辐射诱导细胞恶性转化过程中涉及到众多基因,其中包括大量未知的新基因,克隆新的辐射诱导相关全长基因,从基因水平认识细胞恶性转化过程中生长、分化、再生和癌变的分子机理,对于研究辐射致癌的发生、发展规律具有重要意义.对此,本文旨在克隆新的与辐射致癌相关的全长基因.方法:应用SMART RACE方法扩增T54EST片段的全长序列,测序后进行拼接及RT-PCR验证.并应用生物信息学方法对得到的新的mRNA序列进行生物信息学分析.结果:克隆了一条新的全长基因Lcrp369.经对其进行初步的生物信息学分析发现该基因是位于染色体14p22号臂上的一条功能尚不清楚的基因.其编码区域由7个外显子和6个内含子组成,mRNA全长1 038 bp,编码一244个氨基酸的蛋白,合成的蛋白位于细胞核内,具有DNA结合位点及N-糖基化位点、依赖于cAMP/cGMP的蛋白激酶磷酸化作用位点、酪蛋白激酶磷酸化位点.该蛋白二级结构推测为含有α螺旋结构为主的蛋白,其分子量为28 000,等电点为6.19.数字化组织表达谱系分析结果发现,该基因表达广泛,可在多个组织中表达及在多种肿瘤中表达.该基因全长已经登录到GENBANK上,ID号DQ525179.结论:成功地利用SMART RACE技术克隆了一条新的全长基因Lcrp369,生物信息学分析结果提示其与辐射致癌有关,其具体作用及功能尚有待进一步的实验学研究. 相似文献
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随着我国海军战略转型和装备的发展,海军由近海走向远海已成必然。在此过程中不可避免地会遇到航海特殊复杂环境对艇员健康的影响,辐射环境就是对艇员健康影响的重要因素之一。舰艇辐射医学防护是适应海军发展,贴近部队需要而创建的一门新课程。在本科生教学过程中坚持以"能力"培养为目的教学理念,精心设计教学内容,灵活运用先进的教学方法和手段,采取合理的教学评价体系等有效地调动学员的学习积极性,激发学员的潜能,以培养出具有能力强、综合素质高的海军军医。 相似文献
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目的:探讨牙内陷的锥形束CT影像特征。方法:收集同济大学附属口腔医院就诊的40例患者其49枚牙内陷患牙的锥形束CT影像资料,对其影像特征进行分析归纳。结果:40例患者中共发现49枚牙内陷患牙,按Oehlers分型其中Ⅰ型35枚、Ⅱ型13枚、Ⅲ型1枚;发生于上颌侧切牙46枚,上颌切牙2枚,上颌尖牙1枚。49枚患牙的内陷畸形均发生于所涉及患牙的舌侧;47枚牙有1个凹陷,2枚牙有两个凹陷;3例患牙并发根尖周炎。CBCT图像显示:患牙在内陷层面,Oehlers分型为Ⅰ型的35枚和Ⅱ型13枚,在矢状面、冠状面均可见盲管征;OehlersⅢ型见双轨征;上述3型在横断面均见圆环征;大部分凹陷壁的密度与牙釉质的密度一致。结论:锥形束CT能准确诊断牙内陷,并为指导临床治疗提供可靠的影像学依据。 相似文献
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目前发布的多个国家标准阐述的人员体表放射性污染的控制水平, 存在诸多差异和不协调, 给应用者造成困惑。因此, 拟对相关标准的适用范围和适用条件进行比对, 并结合类似的临床核医学标准中的防护内容, 给出核与辐射事故应急情况下应正确应用的污染控制水平以及使用建议, 供应急人员参考使用。对争议较多的0.04~10 Bq/cm2的α污染和0.4~100 Bq/cm2的β污染人员, 根据对类似标准的讨论, 建议在二级以上医疗救治机构, 有条件充分洗消, 可以到达α污染< 0.04 Bq/cm2和β污染< 0.4 Bq/cm2的污染控制水平。 相似文献
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γ射线诱发小鼠白血病模型中p16基因的改变 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:研究γ射线诱发小鼠白血病模型中p16基因的失活机制。方法:应用聚合酶链反应(PcR)扩增39例γ射线诱发的白血病和对照小鼠胸腺组织中p16基因第1、第2外显子,检测等位基因纯合性缺失;用限制性内切酶-PCR法检测p16基因的甲基化发生情况;并应用PCR-单链构象多态性分析银染方法检测p16基因碱基突变的发生。结果:在白血病模型中,外显子2的缺失率为33.3%,甲基化的发生率为23.1%。结论:γ射线诱发的小鼠白血病模型发生、发展过程中伴有p16基因的改变,其失活以纯合性缺失和甲基化为主。 相似文献