中华骨髓库HLA分型质控工作中分型结果错误原因的分析及探讨

目的对中国造血干细胞捐献者资料库（简称中华骨髓库）中人类白细胞抗原（HIA）分型数据质控抽枪中发现的错误分型情况进行归纳总结，探讨其产生的原因及解决策略，以提高造血干细胞捐献者HLA分型的准确性。方法采用聚合酶链反应（PCR）-序列特异件引物（sequence specific primers, SSP） 、PCR-序列特异性寡核苷酸探针（sequence specific oligonucleotide probes, SSOP）及基因测序（ sequence based typing,SBT）分型方法，对中华骨髓库按比例随机抽取的7313份已完成HLA-A、B、DRB1基因分型的标本进行复检，使用与所抽检标本原始分型试剂小同的试剂盲检，对结果不符者，采用第3种试剂及其原始分型试剂复检；对于难以确定的结果，采用SBT方法确认。采用直接计数法进行HLA差错统计。结果质控抽检6期共7313份标本，发现HLA分型结果错误标本数183份，平均错误率为2．50％。HLA基因分型错误率逐年降低，6期错误率分别为8．18％、3．84％、2．85％、1．70％、1．10％、0．84％。HLA-A位点错误率为0．49％，其中漏检现象占A位点错误的61．11％；HLA-B位点错误率为0．85％，其中以同一宽特异性组之间的业型判断错误者居多，占B位点错误的41．94％；HLA-DRB1位点错误率为0．66％；另外，可能由于标本搞错导致的HLA-A、B、DRB1 3个位点分型全错有41例，错误率为0．56％。结论错误产生的原因有实验人员的技术操作水平及工作责任心上的原因，也有分型方法及试剂本身的原因。采用DNA分型技术，使用特异性、重复性好的合格试剂及加强质控监督，有助于提高HLA分型的准确性，并将有助于提高骨髓库造血干细胞捐献者HLA分型的质量。     

股方肌肌骨瓣治疗青壮年股骨颈骨折（附17例报告）

股骨颈骨折多见于老年人，近年来随着交通事故等高能量损伤的增多，青壮年股骨颈骨折明显增多。本科1995年至2004年采用股方肌肌骨瓣治疗青壮年股骨颈骨折17例，效果满意，现报告如下。     

RHD基因第7内含子全长序列分析

目的 通过对"亚洲型"DEL基因第7内含子全长序列测序分析,探讨其Mrna含有来自第7内含子170 bp片段的分子机制.方法 根据美国国家生物信息中心(NCBI)GenBank BN000065的RHD基因序列,设计4对特异性寡核苷酸引物,分四段分别扩增RHD基因第7内含子.测序分析1名正常Rh阳性个体和2名RhDel表型个体(携带RHD1227A等位基因)的RHD第7内含子全长序列,然后通过NCBI Basic BLAST与参考序列(GenBank BN000065)进行比对,并作相互比对.结果 发现3名个体第7内含子共观察到33处碱基变异(GenBank EU372940～2),其中8处变异相同;另有2处碱基变异仅在DEL样本中检出,在正常Rh阳性个体中未发现.结论 这些变异不足以解释以往发现的DEL Mrna存在170 bp来自第7内含子序列而正常D阳性个体却不存在的现象,但测序结果 提示该片段二侧的AG-GT可能参与这一分子事件的形成,因其正好与第7内含子二侧的GT-AG拼接位点协同将内含子一分为二,但具体机制可能十分复杂.     

胃旁路术对糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的 观察Roux-en-Y胃旁路术对糖尿病Coto-Kakizaki(CK)大鼠糖脂代谢的影响.方法 18只GK大鼠随机等分为Roux-en-Y胃旁路手术组(RYGB组)、假RYGB组和对照组;观察手术后1、2、4、12周各组大鼠空腹血糖、C肽和体质量增加值变化,同时观察手术后4周、12周血浆糖化血红蛋白、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量变化.结果 手术前3组大鼠各检测指标差异无统计学意义(P>0.05).手术后1、2、4、12周RYGB组大鼠空腹血糖(7.0±0.8比6.5±1.0比6.3±1.5比5.6±1.7比4.3±0.5,P<0.01)明显降低,空腹C肽(0.21±0.06比0.28±0.09比0.52±0.06比0.71±0.06比0.78±0.06,P<0.01)显著升高;手术后4、12周大鼠糖化血红蛋白(9.71±1.34比9.09±1.21比7.34±1.17,P<0.01)、甘油三酯(1.32±0.17比0.87±0.05比1.22±0.15,P<0.01)、低密度脂蛋白胆固醇(1.61±0.25比1.21±0.20比1.16±0.15,P<0.01)明显降低,高密度脂蛋白胆同醇(0.83±0.10比1.11±0.12比1.23±0.16,P<0.01)明显升高(P<0.01).各组大鼠体质量增加值差异均有统计学意义(P<0.05).假RYGB组和对照组其余各检测指标的变化差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Roux-en-Y胃旁路术可改善非肥胖糖尿病GK大鼠血糖和血脂代谢,且与体质量变化无关.     

复合扩增云南明朝古尸DNA分析

目的对距今475a的古代遗骸进行DNA分析,为考古人类学DNA分析完善资料和积累经验．方法以经典的酚／氯仿法和chelex-100法提取DNA,以Qiaquick PCR Purification Kit对DNA进行纯化,以Powerplex 16 Kit进行PCR复合扩增并对结果进行检测分型．结果STR位点图谱清晰．结论复合扩增法可用于古尸DNA分析．     

不同体重指数新诊断2型糖尿病患者胰岛素分泌和胰岛素抵抗状况调查

目的 研究中国新诊断超重肥胖及非肥胖2型糖尿病患者胰岛素分泌功能(IS)、胰岛素抵抗状况(IR)的差别及降血糖药物干预对其影响,为临床治疗提供依据.方法 对408例新诊断2型糖尿病患者和40例糖耐量正常人测量身高、体重;行口服葡萄糖耐量试验(OGTF)测定0、30、60、120 min血糖、胰岛素.糖尿病患者按空腹血糖(FBG)水平(DMI:FBG<6.9 mmol/L;DM2:6.9 mmol/L≤FBG<8.3 mmol/L;DM3;8.3 mmol/L≤FBG<9.7 mmol/L;DM4:FBG≥9.7 mmol/L)分为4组,每组内以体重指数(BMI)为界分为两个亚组(BMI<24、≥24),比较两亚组IR和IS.93例FBG>8.3 mmol/L者应用格列齐特(达美康)缓释片进行干预治疗1～3个月,血糖达标后重复OGTF并计算干预后的IR及IS,比较治疗前后的变化.结果 (1)BMI≥24亚组与正常组相比,存在高真胰岛素血症;(2)在每一组糖尿病患者中,BMI≥24亚组的胰岛素敏感性更差,但是IS都优于相应的BMI<24亚组;(3)降血糖药物干预后BMI<24组胰岛素敏感性变化优于BMI≥24组(-4.7±0.9比-5.5 4±1.4,P<0.05),而干预后IS的变化(△I30/△G30)BMI≥24组优于BMI<24组(1.37±0.16比0.50±0.19,P<0.05).结论 新诊断2型糖尿病患者的胰岛素抵抗及胰岛素分泌功能随FBG升高而恶化,这种双重恶化的程度在血糖水平相似的超重肥胖及非肥胖患者明显不同;改善高糖毒性可使超重肥胖者胰岛素分泌功能显著恢复,而非肥胖患者胰岛素敏感性恢复更优.     

叶任高教授治疗非感染性尿道综合征的经验

叶任高教授是我国名肾脏病和中西医结合专家，中山医科大学内科教授、博士生导师，卫生部肾病重点实验室主任，中国中西医结合学会肾脏病专业委员会主任委员，享受国务院特殊津贴。他不但精通西医，且擅长中医，熟谙岐黄之术，在肾脏病的诊断及治疗方面具有很高的造诣。我有幸侧身师旁，聆听教诲，受益匪浅，现将叶老治疗非感染性尿道综合征的经验介绍如下。     

HLA新基因B"非汉字符号"610携带者家系B淋巴细胞系的建立

目的　建立HLA新基因B 5 6 10携带者家系的B淋巴细胞系 ,用于该基因的研究和确证。方法　采集外周血分离淋巴细胞 ,用EBV感染淋巴细胞后 ,加入含 2 0 %FBS、2 μg/mlCsA的RPMI16 4 0进行培养。 结果　 5位家庭成员的无限增殖化B淋巴细胞系新基因稳定遗传。结论　建立的无限增殖化B淋巴细胞系的HLA新基因B 5 6 10遗传稳定 ,为大量保存和繁殖珍贵的生物医学材料奠定了基础。     

Roux-en-Y胃旁路术对非肥胖2型糖尿病患者生活质量的影响

目的观察Roux-en-Y胃旁路术（RYGB）对非肥胖2型糖尿病患者生活质量的影响。方法2008年6月至2010年10月间,前瞻性入组37例非肥胖2型糖尿病患者接受RYGB治疗,分别于术前和术后12个月,通过简明健康状况量表（SF36）、糖尿病治疗满意度问卷（DTSQ）、2型糖尿病生活质量量表（DMQLS）评价患者的生活质量。结果37例患者术后血糖和血脂均显著下降（均P〈0．05）,糖尿病得到有效控制。术后12个月时,SF36生理相关综合评分（74．6±18．3）和精神相关综合评分（78．9±14．5）均高于术前（54．9±15．1和56．4±17．8,均P〈0．01）;DTSQ治疗满意度优于术前（29．2±7．1比15．4±5．6,P〈0．01）;DMQLS满意度亦优于术前（60．9±8．0比33．3±7．0,P〈0．01）。结论Roux-en-Y胃旁路术可有效地改善非肥胖2型糖尿病患者的生活质量。     

风湿性心脏病致急性呼吸循环衰竭死亡1例

患者女,42岁,2012年5月3日下午3时许突感呼吸困难、心慌、胸闷,送医院途中死亡.尸表检验:尸长162.0 cm,发育正常,营养良好,尸斑浅淡,指压不褪色.头颈部、躯干部及四肢未检见明显外伤,颅骨、胸骨、肋骨及四肢长骨未触及骨擦感.口唇部皮肤发绀,双手十指甲床及双足十趾甲床青紫.余未见异常.解剖检验:双肺淤血、水肿.心脏大小为11.5 cm×10.0 cm×6.5 cm,重330.0 g,心包完整,心包腔内检见10 mL淡黄色清亮液体,心脏背面左、右心交界处心外膜下检见三个斑点状出血.二尖瓣狭窄并轻度关闭不全,开口面积约1.5 cm×1.3 cm.左心室壁厚1.3 cm,右心室壁厚0.4 cm,室间隔厚1.3 cm,各部心肌肉眼未检见梗死、出血等异常.左、右冠状动脉开口直径均为0.3 cm,各冠状动脉主干及其分支未检见动脉粥样硬化、管壁内膜增厚、管腔狭窄等异常.余无特殊.