食管穿孔和破裂的诊断与治疗

目的 提高对食管穿孔和破裂的诊断及处理水平。方法 回顾性分析经外科处理的45例食管穿孔或破裂患的临床资料。结果 本组患经胸部平片、胸腔穿刺、上消化道造影及胃镜确诊。15例为自发性食管破裂，6例为医源性穿孔，5例为创伤性穿孔，10例为食管癌并食管支气管瘘，9例为食管憩室并食管支气管瘘。治疗予以食管修补9例；胸腔引流、空肠造瘘9例(其中1例为食管修补失败后改行此手术)；食管切除胃食管吻合术12例(其中3例为食管修补失败)；胃造瘘术4例；置入食管支架4例；食管支气管瘘切除修补3例；食管瘘口修补并肺叶切除2例；食管胃弓上短路1例，颈部引流2例；放弃治疗3例。治愈25例，好转11例，死亡6例。结论 详细了解病史和进行胸腔穿刺、上消化道造影等检查可帮助诊断。尽早手术闭合瘘口和治疗食管原发病变是治疗的关键。     

鱼肝油酸钠注射治疗眼睑深部血管瘤

眼睑血管瘤患者多为婴幼儿童,此病系发育畸形.关于眼睑血管瘤的早期治疗,国内外已有大量研究,但对于鱼肝油酸钠注射治疗眼睑血管瘤的疗效评价,国内外尚少见报道.笔者于1992—1994年采用鱼肝油酸钠注射治疗眼睑血管瘤22例,经过4个月至2年的随诊观察,疗效满意,现报告如下:     

儿童肱骨髁上骨折合并神经损伤

儿童肱骨髁上骨折合并神经损伤较常见,报道约3％～19％。本文回顾我院8年来(1987年2月～1995年6月)住院收治的130例儿童肱骨髁上骨折,对其中合并神经损伤的21例进行分析总结。 1 临床资料 1.1 一般资料 本组:21例,男性14例,女性7例。最小年龄6岁,大年龄14岁。坠落伤17例;生活伤4例。直接损伤3例,间接损伤13例。左侧16例,右侧     

MS患者CD94/NKG2A-bright和CD94/NKG2A-dim NK细胞亚群对IFN-β的差异性反应

目的： 分析多发性硬化（MS）进展型患者不同表型NK细胞亚群对临床主要治疗方法的反应性差异.方法： 分离患者外周血中的NK细胞, 以流式细胞术根据表面抑制性受体CD94/NKG2A表达情况分为两个亚群CD94/NKG2A-bright和CD94/NKG2A-dim.分别加入IFN-β, 测定两个亚群表面CD94/NKG2A变化及细胞增殖, 同时检测两种亚群分泌IL-10和TGF-β情况.结果： CD94/NKG2A阳性表达的NK细胞占25.5%, 其中CD94/NKG2A-bright和CD94/NKG2A-dim分别占其中的23.6%和76.4%.加入IFN-β, CD94/NKG2A-bright组增殖率明显低于CD94/NKG2A-dim组, CD94/NKG2A表达峰度变化不大.CD94/NKG2A-dim组中CD94/NKG2A表达显著增加.两个亚群分泌的IL-10和TGF-β与未刺激组相比, 均有明显差异.CD94/NKG2A-bright和CD94/NKG2A-dim组间亦有明显差异.结论： IFN-β通过诱导NK细胞CD94/NKG2A表达在非特异免疫系统中抑制NK细胞; 同时刺激IL-10 和TGF-β分泌进一步发挥对免疫系统的抑制.CD94/NKG2A-bright和CD94/NKG2A-dim对IFN-β反应有差异性.     

孕、产妇血清和胎儿脐带血血清骨钙素水平的动态变化

目的　为阐明孕妇和胎儿骨钙素 (osteoblastic)代谢规律 ,对各孕周期妇女外周血和胎儿脐带血骨钙素水平的动态变化进行研究。方法　采用荧光酶联免疫法对 14 2例孕妇、2 2例产妇及 34例不同孕龄胎儿的脐带血骨钙素水平进行检测。结果孕妇血清骨钙素随妊娠发展逐渐下降 ,至孕中期最低 (3.3± 1.4 6 ) μg/L ,随后又逐渐升高。分娩即刻产妇血清骨钙素 (12 .81± 4 .2 8) μg/L显著高于妊娠各阶段的水平 (P <0 .0 1) ,产后数日即显著下降至接近妊娠前的基线水平。脐带血骨钙素水平在孕中期最低 (0 .88± 0 .39) μg/L ,随后则升高 ,并且自孕 2 4w起保持于接近母体血清骨钙素水平。结论这段妊娠期是胎儿骨钙积累活跃的阶段 ,这种恒定的骨钙素水平对胎儿骨骼系统的正常发育 ,可能具有重要意义     

细胞裂解法对单细胞PCR扩增效率的影响

目的研究细胞裂解法对单细胞PCR扩增效率的影响,寻求较好的细胞裂解方法.方法应用显微分离技术分离单个淋巴细胞,分别使用冻融变性和蛋白酶K裂解法处理单细胞,应用多重PCR同时扩增X染色体特异重复序列(DXZ1)和Y染色体特异重复序列(DYZ1)对单细胞进行性别诊断,比较其扩增效率.结果使用显微操作法获得80个男性淋巴细胞.采用冻融变性处理单细胞,40个淋巴细胞经多重PCR扩增后有32个产生DXZ1和DYZ1两条电泳带,正确率为80%.采用蛋白酶K裂解法,40个淋巴细胞经多重PCR扩增后均产生DXZ1和DYZ1两条电泳带,正确率为100%.两者的扩增效率有显著的差异性(χ2=6.81,P<0.01).结论 Rechitsky等的蛋白酶K裂解法比较简便,费时短,扩增效率高,适合细胞裂解及PCR扩增模板的制备.     

DNA连接酶及相关检测技术研究进展

核酸检测技术已被广泛应用于分子遗传学、微生物学、免疫学和肿瘤学等方面的临床诊断.聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术大大促进了病原体、基因突变和基因型的分子诊断方法的发展,它将在临床诊断与分析中起着越来越重要的作用.     

应用单细胞多重PCR进行性别鉴定

目的建立一种准确、快速、简便的在单细胞水平进行性别鉴定的技术.方法应用多重 PCR同时扩增单个活检细胞的Y染色体特异重复序列(DYZ1)及X染色体特异重复序列(DXZ1).结果 40个淋巴细胞(XY)成功地扩增出DXZ1电泳带(316bp)和DYZ1电泳带(154bp),正确率为100%;40个淋巴细胞(XX)中有39个成功地扩增出一条DXZ1电泳带(316bp),正确率为98%.结论采用DYZ1和DXZ1引物对单个细胞同时扩增进行性别鉴定是一种简单可靠的方法,可用于胚胎种植前诊断及无创性产前诊断.     

针对单克隆抗体MGb1的重组抗独特型抗体的筛选与鉴定

目的 利用噬菌体呈现技术筛选针对抗胃癌单克隆抗体（简称单抗）MGb1的重组抗独特型抗体（抗-Id），为研制胃癌重组抗-Id瘤苗提供候选分子。方法 以单克隆抗体MGb1免疫Balb／c小鼠，取脾分离mRNA。RT-PCR分别扩增抗体VL和VH cDNA，经linker DNA连接形成ScFv DNA。将scFv DNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1，经M13KO7感染后，获得重组噬菌体抗体ScFv文库。以单抗MGb1对文库进行4轮淘选后，随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-Id scFv的噬菌体单克隆，进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定。结果 VL和VH cDNA分别约为320和340bp，ScFv DNA约为750bp。抗体ScFv文库经四轮淘选后，在随机筛检的50个克隆中得到18个呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆。在18个克隆中，有4个呈现β或γ型抗-Id ScFv。结论 经重组噬菌体抗体技术成功地筛选到了针对单抗MGb1的噬菌体呈现型抗-Id ScFv，从而为进一步获得能诱导抗胃癌免疫的抗-Id ScFv奠定了基础。