人肠三叶因子酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用鉴定

目的 构建人肠三叶因子酵母双杂交诱饵载体并验证其自激活作用.方法 以pET32a-hITF质粒为模板,PCR扩增hITF成熟肽cDNA片段,Sal I和EcpRV双酶切后连接到pENTR3c载体,通过λ噬菌体臂同源重组反应(LR重组反应)将hITF片段连接到酵母双杂交诱饵载体pDEST32,获得诱饵质粒pDEST32-hITF,测序后与酵母双杂交空质粒pDEST22共转化到酵母菌株Mav203,经营养缺陷培养基筛选后,观察在含不同浓度3-氨基三唑(3AT)的营养缺陷培养基中pDEST32-HITF的自激活作用.结果 成功克隆hITF基因片段,构建酵母双杂交诱饵质粒pDEST32-hITF,其与酵母双杂交空载体pDEST22共转化到酵母菌株Mav203后,可在3AT浓度为0、10、25mmol/L的营养缺陷培养基上生长,而在3AT浓度为50、75、100mmol/L的营养缺陷培养基上不能生长.结论 成功构建酵母双杂交诱饵载体,经验证50mmol/L及以上浓度的3AT营养缺陷培养基可以抑制其自激活作用.     

我院2011-2012年清洁切口围手术期未使用抗菌药物的临床感染研究

目的:调查我院Ⅰ类清洁切口围术期抗菌药物预防性使用情况,探讨清洁切口围手术期不使用抗菌药物的可行性.方法:采用回顾性调查方法提取2011年1～3月病历,采用前瞻性调查方法提取2012年1～3月病历,对418例Ⅰ类切口手术患者围手术期预防性使用抗菌药物情况进行统计分析.结果:我院抗菌药物使用率2012年较2011年下降了87.1％ (P＜0.01),抗菌药物费用下降(P＜0.01),但感染率未上升(P＞0.05).结论:干预措施对促进抗菌药物的合理使用是可行、有效的,部分清洁切口围手术期可不使用抗菌药物.     

改良静脉留置针封管技术探讨

目的:探讨一种简单易行的留置针封管技术。方法:采用留置针输液的患者共160例,将其随机分为A,B两组,每组各80例。A组采用常规的脉冲式正压封管法,B组采用改良后的脉冲式正压封管法,对两种不同封管方法的效果进行比较。结果:两组患者留置针堵管率差异无统计学意义(P>0.05),平均封管时间及头皮针意外退出留置针B组优于A组(P<0.05)。结论:改良后的脉冲式正压封管方法,操作简单易行,便于临床护士掌握与应用。     

早期肠道营养对烧伤大鼠肠粘膜损伤和修复的影响

目的研究早期肠道营养对烧伤大鼠肠粘膜损伤和修复的影响及其可能的机制.方法采用30%体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型,随机分成伤前对照(C),静脉营养(PN)及肠道营养(EN)组,EN和PN组给予等氮、等热卡、等体积的营养液.在此基础上动态观察了肠组织中肠三叶因子(ITF)含量、血浆二氨氧化酶(DAO)活性、肠粘膜跨膜电位差(PD)及增殖细胞核抗原(PCNA)的变化,并进行相关分析.结果烧伤后肠粘膜组织结构受损,血浆DAO活性明显增高,从伤前的0.32±0.02(103U·L-1)增为1.23±0.53(103U·L-1),相差显著(P＜0.01).而PD,PCNA值及ITF含量分别从伤前的13.53±0.41(mV),823.46±240.56(A),369±65(ng·g-1)降至伤后的5.27±0.17(mV),247.39±112.23(A)和15±4(ng·g-1),相差显著(P＜0.05～0.01).两组相比EN组大鼠肠道受损程度明显低于PN组,同时其ITF含量、PD,PCNA值均高于PN组[EN组分别为129±46(ng·g-1),6.02±0.17(mV)和612.66±188.27(A)而PN组分别为15±4(ng·g-1),5.27±0.17(mV)和247.39±112.23(A)];而EN组大鼠血浆DAO活性为0.61±0.14(103U·L-1)显著低于PN组的0.90±0.16(103U·L-1)(P＜0.01).相关分析显示,ITF含量同血浆DAO活性呈显著负相关(r1=-0.964,P＜0.01),而同PCNA及PD值呈显著正相关(r2=0.884,P＜0.05;r3=0.983,P＜0.01).结论严重烧伤后肠粘膜结构受损与肠道合成和分泌ITF的能力大幅下降有关,肠道营养可降低伤后ITF下降的幅度可能是其在减轻肠粘膜损伤,促进肠粘膜修复方面优于静脉营养的重要原因.     

腺苷酸激活蛋白激酶磷酸化障碍导致烧伤后骨骼肌脂质沉积的实验研究

目的 探讨影响腺苷酸激活蛋白激酶(AMP activated protein kinase,AMPK)/乙酰辅酶a羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)信号通路导致烧伤后骨骼肌脂质沉积(intramyocellular lipids,IMCLs)的分子机制.方法 采用30％体表面积Ⅲ度烧伤小鼠模型,将54只BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、AMPK激活剂(acadesine,AICAR)组、烧伤组、烧伤+AICAR组,同位素标记法检测各组小鼠腓肠肌中肉碱脂酰转移酶-1(carnitine palmitoyl transferase-1,CPT1)活性变化,Western blot检测各组小鼠腓肠肌中AMPK-α、p-AMPK-α、ACC及p-ACC表达水平,通过油红O染色和甘油三酯(triglyceride,TG)测定法评估各组小鼠腓肠肌IMCLs情况.结果 烧伤后小鼠腓肠肌中ACC表达量较伤前显著升高(P＜0.05),而AMPK-α、p-AMPK-α、p-ACC以及CPT1活性均显著降低(P＜0.05).在AICAR作用下,正常小鼠腓肠肌中p-AMPK-α表达显著升高[(1.16±0.08)vs(2.38±0.22),P＜0.05],p-ACC表达显著升高[(1.74±0.10) vs (3.72 ±0.18),P＜0.05],CPT1活性显著升高[(2.95±0.39) nmol/(min·mg) vs (6.35 ±0.68)nmol/(min·mg),P＜0.05],TG含量显著降低[(3.88±0.40) mmol/gvs (2.89 ±0.54) mmol/g,P＜0.05].烧伤+AICAR组小鼠腓肠肌中p-AMPK-α、p-ACC、CPT1活性及甘油三酯含量较烧伤组无显著差异(P＞0.05).正常对照组和AICAR组正常小鼠腓肠肌组织切片油红O染色未见明显脂质沉积,而烧伤组和烧伤+ AICAR组烧伤小鼠腓肠肌组织切片油红O染色均显示有大量脂质沉积,两组间并无显著差异(P＞0.05).结论 骨骼肌中AMPK磷酸化障碍是烧伤后IMCLs的重要分子机制之一.     

关注转化医学深化烧伤临床营养研究

当今生命科学日新月异,在发展越来越细、越来越深的同时与临床的距离却越来越远.生命科学的成果没有及时应用于临床治疗,没有体现其核心价值和终极目标.这不得不促使人们思考如何打破基础研究与临床医学间的屏障,缩短从实验室到临床的距离,及时将基础研究成果转化为临床治疗的新技术、新方法,推动临床医学快速发展,使患者能真正从科技进步中获益."转化医学(translational medicine)"正是在这种背景下产生的.     

新疆地区3家二级医院2008年1～6月抗菌药物利用分析

目的:了解新疆地区二级医院住院患者抗菌药物的应用情况,为抗菌药物的合理应用提供参考。方法:采用回顾性方法,对新疆地区3家二级医院2008年1～6月抗菌药物的应用情况进行统计、分析。结果:抗菌药物应用率为67.95%;抗菌药物应用存在诸多不合理现象,主要表现在用药指征不明确、药物选择不当、用药剂量大、给药次数不合理、不合理联合用药等方面。结论:加强抗菌药物管理,促进抗菌药物的合理应用势在必行。     

我院药品不良反应认知度调查

目的：调查我院医护人员对药品不良反应相关知识的认知程度,为完善和促进药品不良反应监测工作提供依据。方法：对我院医护人员进行药品不良反应知识问卷调查,并对回收的有效问卷进行统计分析。结果：本次调查共发放问卷300份,回收有效问卷297份。被调查人群中,了解药物不良反应的占69.02%,发生药品不良反应不知道上报的占6.74%,认为上报不良反应有顾虑的占48.16%,太麻烦的占47.49%。另有98.32%的被调查者认为需要进行药品不良反应的相关知识培训。结论：应加强宣传教育,提高我院的医护人员的药品不良反应上报意识。同时,应强化我院药品不良反应监测站的监管职责,保障公众的用药安全。     

3所二级医院围手术期抗菌药物应用现状调查

目的了解围手术期患者抗菌药物的应用现状和存在问题。方法对3所二级医院2008年围手术期患者抗菌药物应用情况进行回顾性分析。结果在药物选择、用药方法、初次预防用药时间等方面存在不合理应用抗菌药物情况。结论加强抗菌药物管理,提高合理用药水平迫在眉睫。     

早期肠道喂养对烧伤大鼠肠道一氧化氮合酶的影响

目的阐明烧伤大鼠经早期肠道喂养后肠组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化规律及其与肠粘膜血流量（ＩＭＢＦ）的关系。方法采用３０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤大鼠模型，分为正常对照（Ｃ）组，单纯烧伤（Ｂ）组和早期喂养（ＥＦ）组，分别检测伤前及伤后０，３，６，１２，２４，４８小时肠组织中ＮＯＳ活性，包括原生型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）和诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ），并测定肠粘膜血流量。结果烧伤后各组ｃＮＯＳ和ＩＭＢＦ呈下降趋势，二者呈显著正相关（ｒ＝０．９７，Ｐ＜０．０１），而ＮＯＳ总活性和ｉＮＯＳ活性都呈上升趋势，ＩＭＢＦ与ｉＮ－ＯＳ和总ＮＯＳ相关不显著。烧伤后ＥＦ组ｃＮＯＳ和ＩＭＢＦ明显高于Ｂ组，ｉＮＯＳ则低于Ｂ组，ＮＯＳ总活力两组无显著差异。结论①两型ＮＯＳ中ｃＮＯＳ与ＩＭＢＦ的关系更加密切。②早期肠道喂养改善烧伤后肠道缺血状况，可能与食物对肠壁神经的刺激从而提高ｃＮＯＳ活性有关。