过敏性紫癜血液流变性异常及其临床意义

过敏性紫癜(HSP)是在临床上常见的一种血管变态反应性出血性疾病。现将HSP的血液流变性变化研究报告如下。1 材料和方法1.1 研究对象 HSP患者36例,年龄25～52岁(平均32岁),男15例,女21例。其中单纯皮肤型16例,伴有消化道及肾脏损害的混合型20例。健康对照者30例,男14例,女16例,平均年龄30岁,均经体格检查除外血液及心脏、肝、胃疾病。1.2 方法 于清晨空腹采血,肝素抗凝。采用江苏省无锡无线电二厂生产的SDZ—3型全自动血粘度计,检测内容:全血比粘度、血浆比粘度、红细胞聚集指数、红细胞压积。同时做血红蛋白、白细     

应用蛇毒试剂检测异常纤维蛋白原血症的意义

异常纤维蛋白原血症分为遗传性与获得性，遗传性异常纤维蛋白原血症国外已有报道，其凝血酶时间和爬虫酶时间均延长．但爬虫酶时间更明显地延长；获得性异常纤维蛋白原血症多见于恶性肿瘤，我们用中国涉蛇毒血浆凝固时间（AgkistrodonHcutusvenomtime简称AT）检测急性白血病等血液系恶性肿瘤病人的异常纤维蛋白原血症，对中国新蛇毒试剂的临床应用做以探讨。现报告如下。及材料与疗法1．1正常对照组：健康成人20例，取空腹静脉血。患病组：急性白血病18例，恶性淋巴瘤3例，多发性骨髓瘤2例。所有病人均经骨髓像或淋巴结病理确诊，空腹取静…     

急性白血病化疗后外周血粒／单祖细胞体外培养动态变化的观察

我们用单层琼脂体外细胞培养法，对３２例急性非淋巴细胞白血病患者在完全缓解后１～３周时外周血粒／单祖细胞（ＣＦ－ＧＭ）的动态变化情况进行了比较观察。患者分四组，分别采用ＤＡ（柔红霉素、阿糖胞管），ＨＡ（三尖松酯硷、阿糖胞苷）、ＡＡ（阿克拉霉素、阿糖胞管）、ＭＡ（米托蒽醌、阿糖胞苷）四种不同化疗方案治疗。结果表明：四种化疗药物对外周血干细胞（ＰＢＳＣ）均具有一定的扩增作用。外周血ＣＦＵ—ＧＭ产率的高峰时间为诱导化疗达到完全缓解后的２～３周，高峰出现平均日为且６．５天，是采集ＰＢＳＣ的最佳时间。不同化疗方案对ＣＦＵ－ＧＭ的扩增效果有一定的差异。本研究结果显示ＤＡ方案的扩增作用显著高于其它方案，为正常值的２５倍（Ｐ＜０．０５）高峰出现的平均日为１０天，早于其它化疗方案８．６天（Ｐ＜０．０５）。     

血栓性疾病时血浆总组织因子途径抑制物变化观察

组织因子途径抑制物(TFPI)是近年来受到国内外高度重视的一种新的生理性凝血调控因子,在血管壁受损及某些病理条件下,其含量可以产生变化。目前国内有关方面的研究报道较少。我们测定了4种血栓性疾病时血浆中总组织因子抑制物TEPI-T的含量,并探讨其于血小板数量及血脂水平的相关性,现报道如下。     

乳腺癌组织中PTEN和Survivin及p53的表达及相关性研究

目的：研究抑癌基因PTEN、凋亡抑制基因Survivin、p53蛋白在乳腺癌及乳腺增生症中的表达情况,并探讨其相关性及临床意义。方法：该实验采用SP法,对65例乳腺癌和20例良性增生症患者石蜡包埋切片中的PTEN、Survivin及p53蛋白进行检测。结果：PTEN阳性表达率在乳腺癌组为41．54％,在乳腺增生症组为90．00％,X^2=14．42,P〈0.05;在乳癌中有腋淋巴结转移组为25．71％,无腋淋巴结转移组为60．00％,X^2=7．28,P〈O．05。Survivin阳性表达率在乳腺癌组为75．38％,在乳腺增生症组为15．00％,X^2=23．48,P〈0.05。p53阳性表达率在乳腺癌组为58．46％,在乳腺增生症组为10．00％,X^2=14．42,P〈0．05;在乳癌中有腋淋巴结转移组为71.43％,无腋淋巴结转移组为43．33％,X^2=5．25,P〈0.05。在乳腺癌组织中PTEN与Survivin的表达成负相关,PTEN与p53的表达无明显相关,Survivin与p53的表达成正相关。结论：PTEN在乳腺癌中的阳性表达率明显低于乳腺增生症,Survivin和p53在乳腺癌中的阳性表达率明显高于乳腺增生症,PTEN和p53的表达与腋淋巴结转移有一定的相关性。在乳腺癌组织中PTEN、p53和Survivin的表达之间存在相关性。     

平律注射液抗心律失常机制的电生理研究

平律注射液抗心律失常机制的电生理研究郎宏华，陈晓飞，彭中宜平律注射液是一种中药复方制剂，它由中药人参、苦参、麦冬、丹参、黄芩、黄芪、五味子提炼而成，以往大量临床实践证明该中药复方具有补益心气、活血化瘀、养阴清热，补血养心、益气健脾之功效、有明显的抗心...     

四种化疗方案对急性非淋巴细胞白血病外周血CFU-GM扩增作用的观察

继自体骨髓移植后,自体外周血干细胞移植(ABSCT)已经成为治疗急性白血病的另一有效治疗方法。特别在我国同基因供髓者缺乏的情况下,发展ABSCT更具有实际应用价值。但在正常状态下外周血干细胞(PBSC)水平仅为骨髓的1％～10％。因此,如何提高外周血干细胞水平,采集到足够的PBSC是进行ABSCT成功的关键。已知抗肿瘤药物具有对PBSC的扩增作用,但是目前国内常用的几种治疗急性白血病的化疗药物对PBSC的扩增作用有何不同,化疗后PBSC的动态变化如何,报道甚少。我们对32例急性非淋巴细胞白血病,采用四种不同方案化疗后PBSC的变化,进行了动态的比较观察。     

蓝色橡皮疱样痣综合征一例

报道1例53岁女性蓝色橡皮疱样痣综合征病例。患者自幼发病,因反复消化道出血致贫血间断入院治疗,本次入院行消化道检查而明确诊断。     

急性白血病患者红细胞免疫功能的研究

本文对38例各期急性白血病患者的红细胞免疫功能进行研究,现报告如下:检测对象和结果1.正常对照组:健康工人、职员,学生等30名,其中男14名,女16名,红细胞C_3b受体花环试验为14.41±2.54%,红细胞免疫复合物花环率为     

新型抗IL-1β和IL-17A双特异抗体的构建及特性鉴定

目的 双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)具有双重的生物学功能.本实验旨在设计并原核表达抗人IL-1β和抗人IL-17A的双特异性抗体(BsAbl/17),获得具有生物活性的BsAb1/17,为深入研究和利用双特异性抗体奠定基础.方法 利用重叠PCR方法构建VH1VL17-CL和VL1VH17-CH1基因片段,并且在所用引物的5'和3'端附加Nco Ⅰ和BamH Ⅰ的酶切位点.将重叠PCR产物进行胶回收后用Nco Ⅰ/BamH Ⅰ进行双酶切,酶切产物再次胶回收,将其连接到用Nco I/BamH I消化的pET-27b载体上.将重组质粒pET-27b-VH1VL17-CL(petA)和pET-27b-VL1VH17-CH1(petB)转化到E. coli Rosetta中.SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,用real-time PCR检测其阻断IL-1 β刺激人T细胞表达细胞因子IL-18的活性,人IL-6定量酶联检测试剂盒检测其阻断IL-17A刺激HeLa细胞表达人IL-6的活性.结果 DNA测序结果证明成功构建了pET-27b-VH1VL17-CL(petA)和pET-27b-VL1VH17-CH1(petB)表达质粒.petA、petB诱导产物主要以包涵体形式存在,成熟蛋白纯化产物纯度超过90%以上,经SDS-PAGE分析表明表达产物的相对分子质量约为38×103,与理论值相符.Western blot和ELISA结果证实双特异抗体BsAb1/17对IL-1 β和IL-17A均具有很好的亲和力.通过RT-PCR检测证明其具有阻断IL-1 β刺激人T细胞大量表达细胞因子IL-18的活性,并且具有阻断IL-17A刺激HeLa细胞产生IL-6的活性.结论 成功构建了同时抗IL-1β和IL-17A的双特异抗体,并利用大肠杆菌表达系统高效表达较高纯度的具有生物活性的双特异抗体.

Abstract：

Objective To construct bispecific antibody BsAb1/17 against both IL-1β and IL-17A,express and purify the biologically active BsAbl/17 protein in prokaryotic system for further studies and applications. Methods VH1VL17-CL and VL1VH17-CH1 gene segments were constructed by overlap-PCR.Restriction enzyme sites Nco Ⅰ and BamH Ⅰ were designed at the 5'and 3' end primers respectively. The products of overlap-PCR were ligated to the Nco Ⅰ/BamH Ⅰ -prepared pET-27b vector. The recombinant plasmids pET-27b-VH1 VL17-CL(petA) and pET-27b-VL1 VH17-CH1 ( petB ) were transformed into E. coliRosetta separately. The expressing products were analyzed by SDS-PAGE and Western blot. Neutralization activity of the bispecific antibody for blocking the induction of IL-18 expression by IL-1β in human T cells was determined by real-time PCR. Neutralization activity of the bispecific antibody for blocking the induction of IL-6 expression by IL-17A in HeLa cells was determined by ELISA assay. Results The structure of the plasmids pET-27b-VH1 VL17-CL(petA) and pET-27b-VL1 VH17-CH1 (petB)was confirmed by DNA sequencing. After induction, the fusion proteins were expressed mainly as inclusion bodies. The purity of the both proteins exceeded 90%. SDS-PAGE analysis suggests the relative molecular mass of both products expressed by petA and petB were approximately 38× 103, which is in accordance with the theoretical value. The results of Western blot and ELISA test demonstrated that BsAb1/17 molecule had binding ability to both IL-1β and IL-17A. The BsAb1/17 could block IL-1β to stimulate human T cell to express IL-18 and block IL-17A to stimulate HeLa cell to express IL-6. Conclusion We successfully constructed a novel bispecific antibody BsAb1/17 against both IL-1 β and IL-17A, and expressed biologically active BsAb1/17 protein in prokaryotic system.