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目的构建含人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的杆状病毒表达载体,并对其表达产物的生物学活性进行测定。方法用HindⅢ对pcDNA3.1/VEGF进行酶切,回收575 bp的VEGF片段;pFast a载体用HindⅢ酶切回收,与VEGF片段连接。NcoI酶切鉴定方向,得到正向连接重组载体pFast/VEGF;将其转化DH10BAC感受态细胞,经卡那霉素、四环霉素、庆大霉素及蓝白斑筛选得到重组杆状病毒载体pBacmid-Fa-VEGF,PCR扩增鉴定得到单一VEGF条带。将该病毒载体转染sf9细胞,用噬斑筛选及SDS-PAGE和Western blot检测VEGF表达,并通过MTT法检测VEGF促内皮细胞生长活性。结果病毒液在稀释到10-7时出现噬斑,Western blot检测出现单一条带,MTT检测促内皮细胞生长率为19.44%。结论成功构建了含VEGF基因的杆状病毒表达载体,且表达产物具有显著的促内皮细胞生长作用。 相似文献
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人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达及生物活性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。MTT法检测结果表明 :重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增生。将重组质粒通过脂质体介导 ,体外转染至人肾细胞 2 93细胞系进行表达 ,经G41 8筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆 ,表达产物经鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生成活性。此结果为研究IGF 1对血管内皮细胞作用的分子机制 ,以及利用IGF 1基因治疗肢体及冠状动脉缺血性疾病等的研究奠定了实验基础。 相似文献
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目的 探讨男性阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)患者骨密度改变以及与氧化应激、性激素水平变化的相关性.方法 通过多导睡眠(polysomnography,PSG)监测入选48例男性OSAHS患者,其中轻中度组19例,重度组29... 相似文献
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牙周炎患者与正常人唾液SIgA、IGg及溶菌酶含量的测定 总被引:1,自引:0,他引:1
口腔牙周粘膜等组织经常与多种细菌接触,受感染的机会较多。对于感染的防御反应能力,除口腔组织本身具备外,唾液也是重要的防御环节,不仅因为唾液中含有相当数量的白细胞,更由于唾液内还含有免疫球蛋白及溶菌酶等,在局部免疫反应中具有重要作用,是局部免疫防御系统的重要环节,对全身或口腔某些疾病的发生、发展有密切关系。牙周 相似文献
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上消化道出血急诊手术的临床研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨急诊手术治疗上消化道出血的临床效果。方法采用回顾性分析的方法,分析我院收治的86例上消化道出血患者临床资料,根据临床特点采用急诊手术治疗。结果非手术治疗16例,治疗后均痊愈。70例上消化道出血患者手术均顺利进行,总有效率100%。6例术后发生并发症,其中3例切口感染,2例腹腔感染,1例膈下感染。术后无多器官功能衰竭及死亡比例发生。术后随访6个月所有病例均无复发。结论根据上消化道出血原因和临床特点,采取相应的、有效的手术治疗,临床效果良好,值得临床推广应用。 相似文献
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