阻断肿瘤坏死因子-α的作用对慢性充血性心力衰竭时神经递质失衡的影响

目的 通过中枢阻断肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的作用,观察对慢性充血性心力衰竭（心衰）时神经递质失衡的影响,探讨中枢炎性因子对心衰时交感兴奋的作用.方法 采用结扎冠状动脉左前降支致心肌梗死的方法制备心衰大鼠模型,假手术对照只穿线不结扎.对心衰大鼠和假手术大鼠持续4周经侧脑室灌流TNF-α阻断剂依那西普（etanercept,ETN） 10μg/h或人工脑脊液（aCSF）;另一种处理则是以腹腔注射方式给予相似剂量的ETN.4周后测定心脏功能学指标和形态学指标（LVEDP、±dp/dt max、RV/BW、Lung/BW）和肾交感神经放电（RSNA）; ELISA技术测定促炎因子（PIC）在血浆和下丘脑室旁核（PVN）中的含量以及血中血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）水平;PVN中谷氨酸（Glu）、去甲肾上腺素（NE）及血中儿茶酚胺的含量利用高效液相色谱法获得;免疫组织化学染色确定PVN内酪氨酸羟化酶（TH）和谷氨酸脱羧酶（GAD67）,后二者分别为NE和γ-氨基丁酸（GABA）的限速酶,以及神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达.结果 与假手术组相比,心衰大鼠PVN区NE和TH表达增强,GAD67和nNOS表达减弱;血浆炎性因子、儿茶酚胺、血管紧张素Ⅱ增多;肾交感神经活动增强.对心衰大鼠经侧脑室持续灌流ETN可减轻上述神经递质失衡现象和心衰时肾交感神经的过度兴奋表现;而经腹腔灌注相似剂量的ETN对心衰大鼠PVN处的NE、TH、GAD67和nNOS的含量没有影响,对肾交感神经兴奋也无作用,说明上述影响是通过位于中枢的PIC起作用.结论 心衰时PVN区炎性因子增高,引起中枢兴奋性神经递质增多,抑制性神经递质减少,神经递质平衡失调,从而增强交感兴奋促进心衰发展.     

中枢氧化应激对心绞痛模型大鼠心功能的影响

目的观察心绞痛大鼠中枢氧化应激水平的变化,并运用NADPH氧化酶抑制剂APO减少超氧化物的生成进而降低中枢氧化应激水平以改善心绞痛时心功能。方法采用冠脉结扎术制作心绞痛动物模型,假手术组仅进行手术而不造成缺血状态,干预组通过侧脑室插管给予APO（60pg／3min）,对照组给予人工脑脊液。雄性Sprage—Dawley大鼠随机分为心绞痛干预组（Angina＋APO）、心绞痛对照组（Angina＋VEH）、假手术干预组（SHAM＋APO）和假手术对照组（SHAM＋VEH）。2h后各组大鼠分别进行血流动力学、右心室／体重比值、肺／体重比值的测量。免疫组化方法检测下丘脑室旁核NADPH亚基gp91phox的表达。结果心绞痛对照组与假手术对照组相比,下丘脑室旁核NADPH亚基gp91phox表达增加,左心室舒张末压明显升高,左心室内压最大上升速率和最大下降速率明显降低（P〈0．05）,右心室／体重比值、肺／体重比值均增加（P〈0．05）。心绞痛干预组与心绞痛对照组相比,中枢NADPH亚基gp91phox表达减少,右心室／体重比值、肺／体重比值均减小。结论心绞痛大鼠中枢氧化应激水平升高,降低中枢氧化应激可在一定程度上改善心绞痛大鼠心功能。     

IL-2、IL-6和TGF-β在老年甲状腺肿并甲亢患者体内表达水平及其临床意义

目的探讨IL-2、IL-6和TGF-β在老年甲状腺肿并甲状腺功能亢进症(甲亢)患者体内表达水平及其临床意义。方法 128例以甲状腺肿并甲亢就诊于宁夏医科大学附属医院内分泌科的老年患者作为病例组;另外选择128例甲状腺肿大未合并甲亢的60岁以上老年人作为对照组。使用细针穿刺活检方法,对两组患者的甲状腺组织进行病理学检查,使用免疫组化、QT-PCR及Western Blot的方法分别检测两组患者甲状腺组织IL-2、IL-6、TGF-β的表达情况。结果与对照组相比,病例组患者IL-2、IL-6、TGF-β的表达明显增高,差异具有统计学意义(P0.05),IL-2、IL-6、TGF-β高表达主要集中在甲亢和甲状腺肿大患者的甲状腺滤泡细胞中,与对照组相比,表达量的差异具有统计学意义(P0.05)。在有突眼症状的甲状腺肿合并甲亢患者中,IL-6的表达比无突眼患者高,差异具有统计学意义(P0.05);但在突眼和无突眼的甲亢和甲状腺肿大患者中,IL-2和TGF-β表达水平差异无统计学意义(P0.05)。结论在老年性甲状腺肿合并甲亢患者中,患者病变组织中IL-2、IL-6及TGF-β表达水平明显增高。但在具有突眼症状的老年性甲状腺肿合并甲亢患者中,IL-6水平明显高于无突眼者。使用IL-2、IL-6及TGF-β等对于诊断甲状腺肿大合并甲亢具有重要意义,尤其对于老年的甲亢临床症状不典型患者,具有重要的提示作用。     

原发性肝癌合并脾功能亢进Ⅰ期手术临床疗效分析

目的总结原发性肝癌合并脾功能亢进Ⅰ期手术治疗的临床经验。方法回顾性分析16例原发性肝癌合并脾功能亢进患者的临床资料。结果16例均行肝癌切除,同时联合脾脏切除,其中6例行肝癌联合脾脏切除的同时,增加贲门周围血管离断术;2例行肝癌联合脾脏切除的同时,增加贲门周围曲张血管缝扎术。所有患者术后均恢复良好,出院前复查白细胞、血小板均恢复正常,无肝功能衰竭及严重并发症发生。结论对原发性肝癌合并脾功能亢进患者行肝癌联合脾脏Ⅰ期手术切除可取得良好疗效。     

经下丘脑室旁核给予核转录因子κB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸盐对高血压大鼠的影响

目的观察核转录因子KB（NF-kB）拮抗剂对高血压大鼠下丘脑室旁核中血管紧张素Ⅱ受体（AT1-R）水平的影响,探讨脑内NF-kB是否通过调节下丘脑室旁核（PVN）中的AT-R在高血压发病中发挥作用。方法选取体重250-275g雄性SD大鼠,随机分为4组：高血压干预组（ANGⅡ＋PDTC）、高血压对照组（ANGⅡ＋VEH）、假手术干预组（NS＋PDTC）和假手术对照组（NS＋VEH）。记录3d基础血压后,麻醉状态下肩胛区皮下给予ANGⅡ（200ng·kg^-1·min^-1）诱导高血压,对照组给予生理盐水（Ns）。干预组通过下丘脑室旁核插管给予吡咯烷二硫基甲酸盐（PDTC）;对照组给予人工脑脊液（VEH）。术后采用无创血压测量系统监测血压,4周后使用免疫荧光技术检测下丘脑室旁核AT1-R水平。结果ANGⅡ＋VEH与NS＋VEH相比,下丘脑室旁核中AT1-R水平明显升高,血压升高（P〈0．05）;ANGⅡ＋PDTC与ANGⅡ＋VEH相比,下丘脑室旁核中AT1-R水平降低,血压下降（P〈0．05）。结论中枢NF-kB通过调节下丘脑室旁核AT1-R水平参与高血压的发病机制,阻断NF-kB可在一定程度上降低血压值。     

纤维胆道镜不同探查入路治疗肝内外胆管结石的临床分析

目的探讨纤维胆道镜经胆囊管、T管窦道及胆总管上段入路探查取石的临床治疗效果,并总结临床经验。方法回顾性分析经纤维胆道镜探查治疗151例患者的临床资料。结果 151例患者中行胆总管探查和经T管窦道取石者术后均常规留置T管引流,拔管前均行常规T管造影。本组35例继发于胆囊结石切除术后,术后10例胆管残余结石经T管窦道胆道镜探查取石;90例同时合并有胆囊结石,27例既往曾有胆绞痛病史,其中69例经胆囊管入路探查胆总管取石成功,经胆囊管入路者术后未留置T管;21例行胆总管探查取石,16例同时合并有左、右肝管结石行胆总管探查取石。术后留置T管引流者128例。1次取尽141例,9例经T管窦道取石1次成功,1例取石2次,经胆囊管及胆总管上段入路探查取石均成功。术后胆红素均在3～5 d降至正常范围,血清CA199术前与术后差异无统计学意义(P<0.05)。结论纤维胆道镜是治疗胆总管结石和胆总管残余结石的重要措施,经胆囊管及胆总管上段入路探查安全可行,均可获得良好疗效;经T管窦道取石也可取得较高的成功率,具有较高的临床应用价值。     

塞来考昔对充血性心力衰竭大鼠心功能的影响

目的 观察cox-2拮抗剂塞来考昔对充血性心力衰竭(以下简称心衰)大鼠心功能水平的影响. 方法 雄性SD大鼠32只,随机分为:心衰组(HF,n=16)和假手术组(SHAM,n=16).心衰组行冠脉左前降支结扎术致急性心肌梗死,制备大鼠心力衰竭模型,假手术组模型不结扎冠状动脉.术后再各自随机分为:给药组(n=8)和溶剂对照组(n=8),给药组口服给予塞来考昔(CEL,1 mg/kg/d),溶剂对照组(vehicle,VEH)给予自来水处理.4周后,检测各组肾交感神经放电(RSNA)以及心功能的变化. 结果与假手术组比较,心衰溶剂对照组大鼠右室/体重指数、肺脏/体重指数均增高(P<0.05)、左室舒张末压(LVEDP)增高(P<0.05),左室压力最大上升、下降速率(±dp/dtmax)绝对值均降低(P<0.05),左心室收缩压(LVSP)降低(P<0.05),平均动脉压无明显差异(P>0.05);心衰溶剂对照组大鼠肾交感神经放电活动明显增加(P<0.05);给予干预药物治疗后,大鼠心功能得到改善(P<0.05),交感神经放电减弱,但以上指标仍无法达到假手术组水平. 结论 心衰时,降低炎性细胞因子的表达,可能降低交感兴奋性,延缓心衰时心功能的恶化.     

血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞p38丝裂素激活蛋白激酶通路的作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)激活人脐静脉内皮细胞(HUVECs)p38丝裂素激活蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路的作用。方法用含20%胎牛血清的DMEM培养基与CO_2培养箱(5%CO_2+95%空气)培养HUVECs。待细胞生长至80%融合时,无血清培养16h后分组:(1)AngⅡ不同时点观察组:用AngⅡ(终浓度100 nmol/L)分别刺激细胞0、5、10、15、30、45 min和60 min。(2)AngⅡ不同剂量作用组:分别用终浓度为0、10、100、1000 nmol/L和10 000 nmol/L的AngⅡ刺激细胞15 min。(3)AngⅡ+p38MAPK特异性抑制剂SB202190组:在AngⅡ(终浓度100 nmol/L)刺激前30 min,分别将1000 nmol/L和5000 nmol/L(终浓度)的SB202190加入培养基,共同孵育30 min。上述各组作用一定时间后收集细胞,用Western blot方法测定细胞p38MAPK磷酸化表达。结果 AngⅡ(100 nmol/L)可诱导HUVECs p38MAPK磷酸化表达,15～30 min达到高峰,分别升高2.25和2.51倍(P<0.005,n=5),随时间呈峰形变化;AngⅡ呈剂量依赖性诱导HUVECs p38MAPK磷酸化,在AngⅡ100 nmol/L时p38MAPK磷酸化表达即有明显增强,在AngⅡ刺激剂量为1000 nmol/L和10 000 nmol/L时,p38MAPK磷酸化表达分别增加2.03和2.11倍(P<0.005,n=5);p38MAPK特异性抑制剂SB202190可显著抑制HUVECs p38MAPK磷酸化,且呈剂量依赖性,5000 nmol/L SB202190的抑制率为53.9%(P<0.01,n=6)。结论 AngⅡ可激活人脐静脉内皮细胞p38MAPK信号通路。     

Ang-（1—7）对AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞MMP-9表达的影响

目的 探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)人单核/巨噬细胞(THP-1) 基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响及其机制.方法 佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞后分为8组:对照组、Ang-(1-7)组、AngⅡ组、Ang-(1-7)+AngⅡ组、A-799+Ang-(1-7)+AngⅡ组,其中Ang-(1-7) +AngⅡ组根据Ang-(1-7)的浓度又分为10-8mol/L Ang-(1-7)+AngⅡ组、10-7 mol/L Ang-(1-7)+AngⅡ组、10-6 mol/L Ang-(1-7)+AngⅡ组、10-5 mol/L Ang-(1-7)+ AngⅡ组.用半定量RT-PCR检测细胞MMP-9 mRNA表达的情况.结果 AngⅡ干预后较对照组MMP-9mRNA显著增加(P<0.05);而Ang-(1-7)呈浓度依赖性减弱AngⅡ诱导的MMP-9 mRNA表达(P<0.05);加入A-799后抑制作用明显减低(P<0.05).结论 Ang-(1-7)浓度依赖性地抑制AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞MMP-9 mRNA表达,可能通过其特异性受体Mas来发挥作用.     

阻断中枢肿瘤坏死因子α合成对缺血诱发心力衰竭大鼠交感神经活动的影响

目的观察缺血诱发心力衰竭大鼠心血管中枢肿瘤坏死因子(TNF)α水平的变化,以及采用己酮可可碱(PTX)阻断中枢TNF-α合成对心力衰竭大鼠交感神经活动的影响。方法 48只雄性SD大鼠分为心力衰竭干预组(HF+PTX)、心力衰竭对照组(HF+VEH)、假手术干预组(SHAM+PTX)和假手术对照组(SHAM+VEH),每组12只。心力衰竭组采用冠状动脉结扎诱导心力衰竭,假手术组仅进行手术而不造成缺血状态。干预组通过侧脑室插管给予PTX,对照组给予人工脑脊液。4周后各组大鼠分别进行肾交感神经活动记录及血流动力学、右心室/体质量比值、肺/体质量比值的测量。免疫印迹法检测下丘脑室旁核TNF-α表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆去甲肾上腺素及细胞因子水平变化。结果 HF+VEH组与SHAM+VEH组相比,下丘脑室旁核中TNF-α水平升高,交感神经活动增强,左室舒张末压(LVEDP)及右心室/体质量比值、肺/体质量比值均明显升高,血浆去甲肾上腺素水平升高(均P<0.05)。左室最大上升速率和最大下降速率(LV±dp/dt_(max))明显降低(P<0.05)、HF+PTX组与HF+VEH组相比,中枢TNF-α水平下降,交感神经活动减弱,心功能改善(均P<0.05),右心室/体质量比值、肺/体质量比值均减小(P<0.05)。结论心力衰竭大鼠中枢TNF-α水平升高,交感神经活动增强,阻断中枢TNF-α合成可在一定程度上降低交感神经兴奋性,改善心力衰竭大鼠心功能。