VP22增强慢病毒介导的自杀基因治疗抑制人卵巢癌裸鼠腹腔种植瘤生长的研究

目的:探讨单纯疱疹病毒壳膜蛋白VP22的细胞间传递作用促进HSV-TK/GCV(单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦)系统对卵巢癌腹腔移植瘤的杀伤效应。方法:将慢病毒包装质粒、包膜质粒、转移载体质粒采用磷酸钙沉淀法共转染包装细胞293T,收集病毒上清,并建立人上皮性卵巢癌(3AO)细胞株腹腔移植瘤模型。单药组分为TK+生理盐水(NS)组、VP22-TK+NS组、NS+NS组,分别腹腔注射慢病毒TK、VP22-TK或NS1ml,继而腹腔注射NS;联合用药组分为TK+GCV组、VP22-TK+GCV组、NS+GCV组分别腹腔注射慢病毒TK、VP22-TK及NS,24h后腹腔注射GCV治疗。每组裸小鼠均为5只。观察各组裸鼠的生存时间及慢病毒的毒性作用。结果:平均生存时间TK+NS组、VP2-TK+NS组、NS+NS组、NS+GCV组、TK+GCV组、VP2-TK+GCV组分别为18.3±2.7d、18.4±1.9d,17.2±1.3d、18.7±1.9d、21±4d和46±22d,6组差异有显著性(χ2=24.81,P=0.002);并且VP2-TK+GCV组平均生存时间较TK+GCV组裸鼠明显延长(χ2=7.42,P=0.006)。结论:VP22介导的自杀基因产物的细胞间扩散作用可明显加强对体内肿瘤细胞的杀伤效应。     

卵巢癌患者血浆中Th1/Th2类细胞因子的检测

探讨卵巢癌患者血浆中Th1/Th2类细胞因子失调及其临床意义。方法 :用ELISA法检测了 2 5例卵巢癌及 15例健康妇女血浆中IL - 2、IFN -γ、IL - 6和IL - 10水平。结果 :卵巢癌患者较健康妇女血浆中IL - 2水平明显降低 ,而IL - 6和IL - 10明显升高 ,且这种变化随临床期别的升高更加明显。结论 :卵巢癌患者外周血中Th1/Th2类细胞因子失调 ,在卵巢癌的发生发展中可能起重要作用。     

TORCH感染孕妇不良妊娠结局及其发病机制探讨

目的　探讨中、晚期孕妇TORCH系列病原体感染对母儿的影响。②方法　采用聚合酶链反应(PCR)对 2 2 5例中、晚期孕妇进行弓形虫 (TOX)、沙眼衣原体 (CT)、解脲支原体 (UU)、风疹病毒 (RUV)、巨细胞病毒 (CMV)、Ⅱ型单纯疱疹病毒 (HSV Ⅱ )检测。随访 78例病原体阳性孕妇 (阳性组 )和 92例病原体阴性孕妇 (阴性组 ) ,比较其妊娠结局。③结果　 2 2 5例中、晚期孕妇上述病原体总感染率为 36 % (81/ 2 2 5 ) .孕妇上述病原体感染可导致宫内感染。阳性组死胎、胎儿宫内窘迫、胎膜早破、新生儿重度窒息发生率显著高于阴性组 (χ2 =4 .6 4 ,6 .0 1,6 .0 8,P <0 .0 5 )。其中混合病原体感染组胎膜早破、胎儿宫内窘迫、新生儿重度窒息发生率显著高于单一病原体感染组 (χ2 =4 .77,11.35 ,3.89,P <0 .0 5 )。④结论　孕期TORCH感染对母儿均可产生不良影响 ,应重视对混合病原体感染孕妇的早期筛查和诊治。     

卵巢粒层细胞瘤的分子生物学研究进展

近年来，许多分子生物学技术引入卵巢粒层细胞瘤（ＧＣＴ）的研究。流式细胞学用于判断倍性异常及Ｓ期比例，以预测ＧＣＴ的恶性行为。遗传学研究发现了ＧＣＴ染色体结构、数目异常及癌基因、抑癌基因的过度表达，与ＧＣＴ发生、发展可能有一定的关系。激素及其受体研究中ＦＳＨ及ＦＳＨ受体可能影响肿瘤分化及生长。ＧＣＴ的肿瘤标记物中以抑制素的敏感性及特异性较强。以上研究对判断ＧＣＴ的生物学行为有一定价值。     

免疫调节分子在卵巢上皮癌中的表达

目的 了解5种卵巢上皮癌(EOC)细胞系中免疫调节分子HLAⅠ、HLAⅡ、CD54、CD80)的表达,探讨EOC逃避机体免疫监视的机制。方法 采用流式细胞仪检测5种人EOC细胞系的HLAⅠ、HLAⅡ、CD54、CD80)表达;应用RT-PCR检测CD80mRNA的表达。结果 5种细胞系中仅COC1和COC2高表达HLAⅠ类分子(阳性细胞率在99％以上)。5种细胞系HLAⅡ类分子的表达均很低(1.40％～12.94％),SKOV3细胞CD54的表达较高(78.00％),COC1次之(33.25％),余者均较低。除COC2低表达CD80(6.63％)外,其余4种细胞系均不表达CD80。结论 5种EOC细胞系存在免疫调节分子表达的异常(如HLAⅠ下调、CD80的缺乏等),EOC细胞可能通过多个方面逃避机体的免疫监视。     

抑制磷脂酰肌醇-3-羟基激酶/蛋白激酶B信号传导通路对宫颈癌放疗增敏的作用

目的:探讨抑制磷脂酰肌醇-3-羟基激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号传导通路对宫颈癌的放疗增敏作用。方法:选用LY294002为PI3K阻滞剂。培养PI3K功能活性和AKT磷酸化水平稳定的人宫颈癌HeLa细胞株,皮下注射于BALB/C裸鼠体内,建立裸鼠宫颈癌移植瘤模型。随机将荷瘤裸鼠分为空白对照组、单纯放疗组、单纯药物组(LY294002)和联合治疗组(放疗+LY294002)。应用Western blotting检测各组AKT磷酸化(phospho-Ser473AKT)水平。通过克隆形成实验检测LY294002在体内的放射增敏作用。长期观察肿瘤体积的变化并绘制肿瘤生长曲线。结果:Western blotting显示,联合治疗组的AKT去磷酸化现象最显著。克隆形成实验显示,LY294002与放射治疗对肿瘤细胞生长的抑制在各剂量水平均表现出协同作用(P0.05)。肿瘤生长曲线表明联合治疗组的肿瘤体积增长最缓慢。结论:PI3K阻滞剂显著增强宫颈癌对放射治疗的敏感性。     

抑癌基因PTEN在宫颈癌组织中的表达及意义

目的研究抑癌基因PTEN在宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化的方法研究PTEN在50例宫颈癌组织,在65例CINⅠ,98例CINⅡ～Ⅲ,20例正常宫颈组织中的表达情况。结果PTEN在宫颈癌中阳性率为36％,CINI中为84．6％,CINⅡ～Ⅲ中为61．2％,正常宫颈组织中为100%,差异有显著性。结论PTEN异常表达可能与宫颈癌发生发展及预后有关。     

不典型妊娠期特发性急性脂肪肝误诊1例

患者26y，因停经37w，全身浮肿10天，头痛4大于1997年3月1日收住院。既往月经规律，d。停经期间无服用药物史，无恶心、呕吐、腹痛及黑便等症状。查体：BP19／13kPa。神志清，精神欠佳，皮肤轻度黄染，巩膜明显黄染，皮肤及粘膜未见出血点，心、肺（－）。产科检查：宫高34cm，腹围91cm，胎位ROA，胎心率140／min，水肿（＋＋＋＋）。辅助检查：Hb143g／L，WBC19．8×109／L，N0．90，BT1min，CT2min；尿RT正常。肝功谷雨转氨酶（GPT）1383．61nmol·s－1／L（83IU／L），血总胆红素76μmol／L，HBsAg（－）。b超检查示足月妊娠…     

细胞外信号调节激酶信号通路对蛋白酶体抑制剂MG262诱导卵巢上皮性癌细胞凋亡的调控作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对蛋白酶体抑制剂MG262诱导卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞凋亡的调控作用.方法 不同浓度(1、10、20、40、60、80 nmol/L)的MG262分别处理卵巢癌细胞株SKOV3细胞24、48 h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测SKOV3细胞的存活率.MG262及ERK抑制剂PD98059分别及联合处理24 h后,流式细胞仪检测SKOV3细胞及胚肾上皮细胞株293T细胞的凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)及蛋白印迹法分别检测SKOV3细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的浓度及细胞内VEGF蛋白的表达.MG262处理不同时间(3、6,9、12 h)后,蛋白印迹法检测SKOV3细胞内磷酸化ERK(p-ERK)及野生型p53蛋白的表达.以上实验以未加药物者为对照.结果 MTT比色法检测发现,随着MG262浓度的增加,SKOV3细胞的存活率明显下降(P＜0.05).流式细胞仪检测发现,MG262、PD98059分别或联合处理SKOV3细胞后,其细胞凋亡率分别为(30.7±4.3)%、(26.8±8.6)%、(50.3±10.6)%,与对照细胞的(7.9±1.9)%比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);两药单独处理者分别与联合处理者比较,差异也均有统计学意义(P＜0.01).而两药分别或联合处理293T细胞后,其细胞凋亡率分别为(14.5±5.3)%、(16.2±7.5)%、(10.8±7.3)%,与对照细胞的(12.2±6.3)%比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).ELISA及蛋白印迹法检测显示,MG262处理后SKOV3细胞培养上清液中VEGF的浓度及细胞内VEGF蛋白的表达水平均明显下降(P＜0.05).MG262处理不同时间后,SKOV3细胞内p-ERK蛋白的表达水平明显下降(P＜0.05);但SKOV3细胞内野生型p53蛋白在MG262处理前、后均无表达.结论 MG262可通过ERK信号通路诱导卵巢癌细胞凋亡,抑制卵巢癌细胞的增殖及血管生成.     

血卟啉单甲醚用于卵巢上皮性癌光动力学治疗的实验研究

卵巢上皮性癌（卵巢癌）位居女性生殖系统恶性肿瘤死亡率首位,传统的治疗手段如手术、化疗及放疗等均不能显著改善患者的预后.光动力学治疗（photodynamic therapy,PDT）作为一种新的高选择性肿瘤治疗方法,有望成为卵巢癌新的辅助治疗手段.血卟啉单甲醚（hematoporphyrin monomethyl ether,HMME）是国产第二代光敏剂,具有光敏化力强,肿瘤特异摄入率高,毒副作用轻微等优点.国内应用于鲜红斑痣的治疗,取得了很好的效果.将其用于卵巢癌的PDT,目前尚未见报道.本研究通过体外、体内实验验证HMME-PDT对卵巢癌的疗效,同时明确HMME诱导细胞死亡的机制,为卵巢癌的辅助治疗寻找新的途径,并为临床应用提供依据.