ABC和BA法的染色敏感性及其在病毒抗原定位中的应用

生物素—亲和素系统(Biotin Avidin System,BAS)是70年代发展起来的新颖试剂,国外应用比较广泛,国内近年来有应用亲和素—生物素酶复合物(Avidin—Biotin—Peroxidase Complex,ABC)方法的报导,但制剂多是成套进口。我们用自制ABC和酶标亲和素试剂并以生物素     

西地兰佐治小儿重症肺炎386例报告

我科自1975年8月至1984年2月共收治小儿肺炎1，632例，重症肺炎占731例，其中合并有心功能不全，用西地兰佐治386例（52.8％），取得满意效果。现报告如下。     

锌影响鼠脑发育及金属硫蛋白表达的细胞分析

方法：建立低锌、常锌及高锌动物（生后４周及７周）模型，用流式细胞分析技术，对幼鼠脑神经细胞的增殖周期、ＤＮＡ和总蛋白的含量及金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌ－ｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）的表达进行了测定。结果：低锌组及高锌组与常锌组相比，细胞增殖周期、ＤＮＡ和总蛋白含量及ＭＴ表达有显著差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论：锌明显影响幼鼠脑发育，且与ＭＴ表达密切相关     

胆红素脑病与神经细胞凋亡

胆红素脑病是新生儿黄疸的极重症表现，可留下神经系统后遗症甚至引起死亡，但胆红素神经毒性的发病机制迄今尚未完全阐明。既往研究表明，胆红素通过抑制神经元突触传递过程，蛋白激酶的磷酸化，神经递质释放影响神经元的功能。近年来随着分子生物学研究的不断深入，发现胆红素可引起细胞内Ca^2 超载，影响线粒体呼吸功能，介导胆红素神经毒性，导致神经细胞凋亡。     

三黄消渴胶囊治疗老年糖尿病30例观察

1　一般资料1 1　分组 :本文病人 60例均来源于 1 999年 6月至2 0 0 0年 6月就诊于山东中医药大学第四附属医院门诊及病房的病人。其中门诊 2 8人 ,病房 3 2人。随机分组 ,三黄消渴胶囊组和降糖甲片组各 3 0例。全部病例均符合老年糖尿病诊断标准及中医辨证标准。1 2　性别、年龄、病程的分布 :治疗组男性 1 8例 ,占60 % ,女性 1 2例 ,占 4 0 % ;对照组男性 1 9例 ,占63 3 % ,女性 1 1例 ,占 3 6 7%。治疗组年龄最大者 78岁 ,最小者 60岁 ;平均年龄 68岁 ;对照组年龄最大者76岁 ,最小者 60岁 ,平均年龄 66岁。治疗组病程最短者 2年 ,最长…     

人粘膜血管定居因子／GST融合基因表达载体的构建与表达

目的 构建hMAdCAM-1/GST融合基因表达载体并进行表达。方法 采用PCR技术扩增hMAdCAM-1cDNA5‘端615bp的基因片段,将其插入pGEM-T质国。经全自动序列分析仪测序证实后,再亚克隆至表达载体pGEX-2T,转化大肠杆攻DH5a。结果 SDS－PAGE检测显示,表达出相对分子量52000u的融合蛋白,占菌体总蛋白的31％左右。Westerm blot分析表明,表达蛋白能与抗hMAdCAM-1多抗特异性结合。结论 hMAdCAM-1/GST融合基因表达载体的构建和表达,为深入研究MAdCAM-1提供了材料。     

人整合素分子α4亚基片段的克隆和表达

目的克隆并表达人整合素分子α4亚基1.2kbcDNA片段。方法从HL-60细胞系中提取总RNA,以RT-PCR法扩增人整合素分子α4亚基片段1.2kbcDNA(1753～2934bp),并将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,用IPTG诱导表达。结果克隆了α4亚基1.2kbcDNA片段。序列分析表明,其所编码的氨基酸序列与文献相比较只有一处错义突变(Arg→Gln),经分析该突变对抗原性影响不大。将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,经IPTG诱导在大肠杆菌中获得高效表达。结论获得了α4亚基1.2kbcDNA片段及其原核表达产物,对研究α4整合素的功能具有重要的意义。     

基于NLRP3通路研究青梅复方对急性痛风性关节炎的干预作用及机制

目的 明确青梅复方对急性痛风性关节炎（AGA）大鼠的治疗作用，初步阐明其作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组（0.3 mg·kg ^-1）、青梅复方低、高剂量组（200、400 mg·kg^-1），每组8只。模型组及给药组踝关节注射50 g·L^-1尿酸钠盐（MSU）溶液制备AGA大鼠模型，分别于造模前及造模后6、24、48 h测量大鼠踝关节肿胀指数，采用苏木素-伊红（HE）染色观察AGA大鼠关节组织病理变化，免疫组化检测大鼠关节组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠关节组织中NOD样受体蛋白3（NLRP3）通路及关键蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠踝关节肿胀指数、滑膜增生及炎性浸润程度显著升高，且踝关节IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白表达及胱天蛋白酶-1（Caspase-1）的剪切体和前体蛋白的比值（Caspase-1 p20/Caspase-1）显著上调（P<0.01）。与模型组比较，青梅复方能够明显降低AGA大鼠踝关节肿胀指数，尤其以青梅复方低剂量效果显著（P<0.01）；同时青梅复方不仅抑制滑膜增生及炎性浸润（P<0.01），且显著下调关节组织中IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白水平及Caspase-1 p20/Caspase-1（P<0.01）。结论 青梅复方能够显著缓解AGA的关节肿胀及炎症浸润，其机制可能与抑制NLRP3信号通路有关。     

血小板对缺血性心脏病的保护作用

大量资料表明，活化的血小板释放的血管活性物可引起血小板的聚集，从而导致血栓的形成，促进冠心病的发展。近年来研究发现，血小板可通过NO、TGF－β、腺苷、抗氧化及直接缩血管，对缺血－再灌注的心肌起保护作用。认识血小板在冠心病中的双重作用对临床冠心病的治疗有指导意义。     

活血通络方加不同引经药对股骨头坏死兔成骨相关因子的影响

目的:观察活血通络方配伍不同引经药对股骨头坏死兔血清骨钙素(BGP)、骨形态发生蛋白-2(BPM-2)含量及股骨头BMP-2mRNA表达的影响,探讨其防治股骨头坏死的作用机制。方法:健康雄性日本大耳白兔98只,体重2.2～2.8kg。84只兔经液氮冷冻左侧股骨头法建立股骨头坏死模型后,随机分为6组,每组14只:模型组,活血通络方组,以及活血通络方分别加牛膝、独活、细辛、桔梗组(分别简称活骨、牛膝、独活、细辛、桔梗组)。另外14只设为伪手术组。造模后药物组分别给予相应的中药,模型和伪手术组给予生理盐水灌胃,所有动物皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(30μg·kg-1·d-1,连续7d)。实验2、4周时分别取材,放射免疫法和酶联免疫法分别检测血清BGP和BMP-2含量,左侧股骨头行苏木精-伊红染色观察组织病理学改变,原位杂交法检测BMP-2mRNA表达。结果:与伪手术组相比,模型组股骨头空骨陷窝率显著增多,2周时血清BGP升高,4周时血清中BMP-2含量及股骨头BMP-2mRNA降低。与模型组相比,活骨组空骨陷窝率降低,2、4周时血清BGP、BMP-2含量及股骨头BMP-2mRNA的表达均升高。与活骨组比较:牛膝组4周时空骨陷窝率显著减少,血清BGP、BMP-2及股骨头BMP-2mRNA升高;桔梗组空骨陷窝有降低趋势,且2、4时周血清BGP降低,2周时血清BMP-2降低,4周时股骨头BMP-2mRNA降低;独活组2周时血清BMP-2含量和股骨头BMP-2mRNA的表达升高;细辛组各项指标未见明显改变。结论:引经药牛膝可以进一步提高活血通络方上调血清BGP、BMP-2含量和股骨头内BMP-2mRNA表达的作用,这可能是其促进骨成有效防治股骨头坏死的机制之一。