NLRP1炎症体在糖尿病大鼠心肌组织内的表达

目的 观察高脂高糖饮食和糖尿病分组中核苷酸结合寡聚化结构域样受体1（NLRP1）炎症体在心肌组织中表达的情况,分析其在糖尿病心肌病中潜在的致病机制。方法 将实验大鼠分为3组：正常组、高糖高脂饮食组和糖尿病组。以链脲佐菌素（STZ）30 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,造模成功8周后行血清学检测各组大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖及空腹胰岛素,并计算得出胰岛素抵抗指数（IRI）和胰岛素敏感性指数（ISI）;心脏彩超评估心脏结构及功能;免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测心肌组织NLRP1、ASC和caspase 1的蛋白及mRNA表达等情况。结果 与正常组相比,高糖高脂饮食组体质量、血 清胆固醇、甘油三酯增高,NLRP1 mRNA、caspase 1 mRNA及NLRP1蛋白表达增加(P<0.01),但空腹胰岛素、IRI、ISI、心脏彩超未见明显变化（P>0.05）,心肌组织ASC和caspase 1蛋白及血清IL-1β、IL-18水平无明显变化（P>0.05）,而糖尿病组中,大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖升高,空腹胰岛素、ISI和体质量降低（P<0.01）,左室舒张末期内径、左心室收缩末期内径增大,射血 分数、短轴缩短率及E/A比值下降并伴有NLRP1/ASC/caspase 1通路mRNA同步增加和NLRP1、caspase 1蛋白水平升高,但心肌组织中ASC蛋白表达无明显升高（P>0.05）。此外糖尿病组中IL-1β、IL-18也较正常组升高（P<0.05）;与高糖高脂饮食相比糖尿病组大鼠空腹血糖升高伴有空腹胰岛素,ISI和体质量降低（P<0.01）,心脏彩超提示左心室收缩末期内径,射血分数及E/A比值下降并伴有NLRP1、caspase 1蛋白表达增加和血清L-1β、IL-18升高（P<0.01）。结论 糖尿病可诱发心脏结构和功能异常及心肌炎症反应,其机制可能与NLRP1/ASC/caspase 1炎症体活化有关。     

二十二碳六烯酸对心房颤动大鼠心房肌细胞双孔钾通道TASK-1表达的影响

目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)在大鼠心房颤动(房颤)模型中的作用及其对双孔钾离子通道TASK-1表达的影响.方法 SD雄性大鼠分为4组:(1)对照组:每天注射等体积生理盐水;(2)DHA组:每天注射等体积DHA;(3)房颤组:每天给予乙酰胆碱+氯化钙混合液建立房颤模型;(4)房颤DHA组:每天先给予DHA,半小时后建立房颤模型,方法同房颤组.分别观察各组大鼠房颤发生时间和检测心房有效不应期(ERP);应用Western blot测定大鼠心房肌中TASK-1蛋白表达及RT-PCR测定大鼠心房肌中TASK-1 mRNA表达.结果 房颤DHA组较房颤组大鼠心房颤动出现时间明显推迟,稳定时间提前,分别为第3天和第1天出现,第8天[(22±5.0)s]比第10天[(35±5.3)s]稳定;每天房颤持续时间显著缩短,与对照组相比,房颤组ERP明显缩短[从(77.3±6.0)s到(60.4±4.3)s],与DHA组相比,房颤DHA组ERP显著缩短[从(90.8±3.4)s到(82.4±5.7)s];与对照组相比,DHA组TASK-1 mRNA和蛋白表达降低,房颤组及房颤DHA组TASK-1 mRNA和蛋白表达水平升高;与房颤组相比,DHA组及房颤DHA组TASK-1 mRNA和蛋白表达降低.结论 DHA具有抗房颤作用,其机制可能与下调双孔钾离子通道TASK-1蛋白表达有关.     

冠心病病人血清亲环素A与冠状动脉病变程度的关系

目的探讨血清亲环素A（cyclophilin A,CyPA）水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary heart disease,CHD）病人冠状动脉病变程度的关系。方法选取经冠状动脉造影后确诊为CHD的病人121例,根据冠脉造影结果分为单支病变组、双支病变组、多支病变组,根据Gensini积分分为轻度（Gensini积分≤30分）病变组、中度（Gensini积分30~60分）病变组、重度（Gensini积分≥60分）病变组。检测并比较各组CyPA、金属基质蛋酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和C反应蛋白（CRP）水平。结果随着冠状动脉病变支数增加,CHD病人的CyPA、MMP-9和CRP水平也随之升高（P < 0.05）;随着冠状动脉病变Gensini积分增长,CHD病人的CyPA、MMP-9和CRP水平也随之升高（P < 0.05）。CHD病人血清CyPA与MMP-9、CRP和Gensini冠脉病变积分正相关。结论CHD病人冠状动脉病变支数越多,冠脉病变Gensini积分越高,CyPA水平亦随之增高,CyPA在一定程度上能间接反映冠脉病变的严重程度,其机制可能是参与了炎症反应。     

心房颤动患者血清亲环素A、基质金属蛋白酶-2的表达水平及临床意义

目的：检测心房颤动患者血清中亲环素A（Cy-PA）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）在心房颤动中的临床意义。方法：选取窦性心律患者100例为对照组（非房颤组）。采用ELISA法检测各组患者血清中CyPA、MMP-2和TIMP-2水平,同时测量左心房前后径（LAD）。结果：观察组左心房前后径大于对照组（P〈0.01）,且与房颤持续时间密切相关。显示观察组患者血清中CyPA与MMP-2水平呈正相关,CyPA浓度与LAD呈正相关。结论：CyPA和MMP-2/TIMP-2的联合检测可能对判断心房颤动患者的病变程度及指导治疗具有一定作用。     

线粒体乙醛脱氢酶2通过下调CaN-NFAT3信号通路拮抗高糖引起的乳鼠心肌细胞损伤

目的探讨钙调神经磷酸酶（CaN）-活化的T细胞核因子（NFAT）3通路是否介导乙醛脱氢酶（ALDH）2对高糖处理的乳鼠 心室肌细胞的作用。方法无菌条件下取出生3 d内SD大鼠乳鼠心脏,心尖部剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个 细胞,经差速贴壁后并在培养液中加入5-Brdu进行培养,当其生长呈融合状态时对心室肌细胞进行处理。应用免疫荧光检测培 养的乳鼠心肌细胞内α-SA蛋白以此鉴定原代培养心室肌细胞纯度;实验涉及如下分组：5.5 mmol/L糖对照组（M）、30 mmol/L 高糖组（MH）、30 mmol/L 高糖加乙醛脱氢酶2 激动剂（Alda-1）组(MHA)、30 mmol/L 高糖加乙醛脱氢酶2 抑制剂（Daidzin）组 （MHD）、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂（Alda-1）和NFAT3抑制剂（11R-VIVIT）组（MHAV）;荧光探针检测细胞内钙离 子浓度;ELISA测定细胞内CaN含量;Western blot检测ALDH2、CaN、NFAT3蛋白表达。结果与M组相比,MH组ALDH2蛋 白表达降低（P<0.05）,CaN蛋白表达增高（P<0.05）、NFAT3蛋白表达以及细胞内CaN含量、Ca2+浓度均增高（P<0.01）;与MH组 相比,MHA组Ca2+浓度降低（P<0.05）、细胞内CaN含量降低（P<0.01）、CaN蛋白和NFAT3蛋白表达降低（P<0.05）、ALDH2蛋白 表达增加（P<0.05）,MHD组Ca2+浓度升高（P<0.01）、细胞内CaN含量升高（P<0.05）;与MHA组相比,MHAV组的ALDH2蛋白 表达量无明显变化（P>0.05）,NFAT3蛋白表达量降低（P<0.05）。结论线粒体ALDH2对高糖诱导的乳鼠心肌细胞起保护作用, 其机制可能与ALDH2对Ca2+-CaN-NFAT3信号通路的负调节作用有关。     

甲氨蝶呤联合米非司酮治疗异位妊娠的临床观察

目的：探究甲氨蝶呤联合米非司酮治疗异位妊娠的临床效果。方法：随机选取本院2015年3月至2016年6月收治的30例异位妊娠患者作为研究对象,依照随机分配原则,将其分为观察组和对照组,每组15例。2组患者在年龄、停经时间以及阴道出血等一般资料上差异不明显（P＞0．05）,具有可比性。对于对照组患者,单用甲氨蝶呤进行治疗;对于观察组患者,使用甲氨蝶呤联合米非司酮治疗;在治疗过程中密切关注患者生命体征的变化,是否出现不良反应,同时监测血常规以及肝肾功能。治疗1个月后,比较2组患者的临床治疗效果。结果：观察组治疗总有效率（93．3％）高于对照组（66．7％）,P＜0．05。观察组患者中,1例肝功能轻度异常,1例胃肠道反应,不良反应发生率为13．3％;对照组患者中,1例肝功能轻度异常,不良反应发生率为6．67％。两组的不良反应均较轻微,未出现严重不良反应,对继续治疗未造成影响。结论：综上所述,在对异位妊娠进行治疗时,米非司酮联合应用甲氨蝶呤,治疗效果较好,有利于克服手术治疗弊端,降低医疗纠纷的发生几率,提高满意度,值得临床应用。     

2型糖尿病病人血清MMP9和PI3K水平与心房颤动的相关性研究

目的探讨血清基质金属蛋白酶9(MMP9)和磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)水平变化与2型糖尿病病人(T2DM)心房颤动(AF)发生、发展的关系。方法收集200例心电图提示AF的T2DM病人, 其中阵发性房颤(PaAF)62例, 持续性房颤(PeAF)70例, 永久性房颤(PerAF)68例。并选择90例单纯性T2DM病人作为对照组。ELISA和Western blotting法分别测定血清中MMP9、PI3K水平及蛋白表达情况, 并分别与已测得的左心房内径(LAD)进行相关性分析。纳入MMP9、PI3K和LAD行Pearson相关分析和二元logistics回归分析, 得出影响AF的因素。结果与对照组相比, PaAF、PeAF与PerAF组MMP9表达水平升高(P < 0.01)、PI3K表达水平降低(P < 0.01)。与PaAF组相比, PeAF组与PerAF组MMP9表达水平升高(P < 0.01)、PI3K表达水平降低(P < 0.01)。与PeAF组相比, PerAF组MMP9表达水平升高(P < 0.01)、PI3K表达水平降低(P < 0.01)。Western blotting检测显示MMP9存在上调趋势, PI3K存在下调趋势。Pearson法对MMP9、PI3K与LAD进行相关性分析, 结果显示在所有实验组中MMP9水平与LAD呈正相关关系(r=0.842, P < 0.01);PI3K与LAD呈负相关关系(r=0.868, P < 0.01)。二元logistics回归分析显示MMP9、PI3K、LAD是AF的危险因素(P < 0.05)。结论T2DM合并AF病人血清中MMP9表达水平明显升高, PI3K表达水平明显降低, 且与LAD有一定的相关性, MMP9、PI3K的激活与表达与T2DM病人AF的发生可能有关。     

不同年龄段急性心肌梗死病人临床和冠状动脉病变特点分析

目的探讨不同年龄段急性心肌梗死（AMI）病人的临床和冠状动脉（冠脉）病变特点。方法选择201例行急诊冠脉造影检查的AMI病人,根据年龄分为中青年组（< 60岁,n=70）和老年组（≥60岁,n=131）,比较2组病人的临床资料和冠脉病变资料。结果AMI老年病人较中青年病人更容易发生院内死亡和心力衰竭（P < 0.05）;中青年组病人的红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容、网织红细胞计数、淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞计数、丙氨酸氨基转移酶、胆碱酯酶、总蛋白、白蛋白、尿酸、总胆固醇、低密度脂蛋白和载脂蛋白B水平均高于老年组（P < 0.05~P < 0.01）,脂蛋白a低于老年组（P < 0.05）。中青年组病人冠脉以单支血管病变、低Gensini积分为主,术中发生无/慢复流的概率低;老年组病人冠脉以多支血管、钙化病变、高Gensini积分为主,术中容易出现无/慢复流,2组比较差异有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）。结论中青年AMI病人的血压、血糖、血脂水平更高,冠脉病变以单支、低Gesini积分病变为主。老年AMI病人冠脉病变以弥漫性长病变、钙化病变为主,术中容易发生无/慢复流。     

线粒体ALDH2对高糖处理的乳鼠心肌成纤维细胞中自噬相关蛋白影响

目的探讨自噬是否介导乙醛脱氢酶（ALDH）2对高糖处理的乳鼠心肌成纤维细胞的作用。方法无菌条件下取出生3d内 SD大鼠乳鼠心脏,剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个细胞,经差速贴壁后并传代培养,当传至3代时进行处理。应 用免疫荧光检测培养的乳鼠心肌成纤维细胞内波形蛋白以此鉴定原代培养心肌成纤维细胞纯度;实验涉及如下分组：5.5 mmol/L 糖对照组（F）、30 mmol/L高糖组（FH）、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂（Alda-1）组(FHA)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2 抑制剂（Daidzin）组（FHD）、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂（Alda-1）和乙醛脱氢酶2抑制剂（Daidzin）（FHAD）;Western blot检测ALDH2、微管相关蛋白1轻链3B亚基（LC3B）、Beclin-1的蛋白表达;羟脯胺酸试剂盒测定细胞培养液中羟脯胺酸含量; CCK-8试剂盒测定心肌成纤维细胞增殖能力。结果与F组相比,FH组ALDH2蛋白表达降低,Beclin-1、LC3B蛋白表达降低,细 胞培养上清液内羟脯胺酸含量、细胞数目增高;与FH组相比,FHA组Beclin-1、LC3B蛋白表达、ALDH2蛋白表达增加,细胞数 目、细胞内羟脯胺酸含量降低,与此同时FHD组ALDH2蛋白及Beclin-1、LC3B表达降低,细胞数目、细胞内羟脯胺酸含量增高。 结论线粒体ALDH2抑制高糖诱导的乳鼠心肌成纤维细胞增殖作用,其机制可能与ALDH2对自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B的 上调作用有关。