慢性肾功能衰竭患者血浆对氧磷酯酶-1活性与氧化应激相关性研究

目的通过对慢性肾功能衰竭（CRF）患者血浆对氧磷酯酶-1（PON-1）、氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）、丙二醛（MDA）含量和循环谷胱苷肽过氧化物酶（GSHPx）活性的观察,探讨PON-1和氧化应激之间的关系。方法检测145例CRF患者和53例健康对照者血浆PON-1活性、ox-LDL、MDA含量和GSHPx,分析PON-1活性与ox-LDL、MDA、GSHPx之间的关系。结果CRF患者血浆PON-1活性（122.3±23.1）kU/L,ox-LDL（832.0±256.2）μg/L,MDA（18.3±7.1）μmol/L,GSHPx（144.5±31.1）U/L。对照组上述指标分别为：（175.6±28.2）kU/L,（455.2±178.3）μg/L,（8.2±5.1）μmol/L,（248.1±79.3）U/L。PON-1活性与GSHPx水平低于对照组（P〈0.01）,血浆ox-LDL与MDA水平高于对照组（P〈0.01）。血浆PON-1活性与GSHPx呈正相关（r=0.811,P〈0.001）,与ox-LDL、MDA呈负相关（r=-0.842,P〈0.01;r=-0.745,P〈0.01）。结论在CRF中血浆PON-1活性显著降低,PON-1可能通过降低抗氧化能力机制参与了CRF的病理生理过程。     

抑制TPP1表达对端粒保护蛋白1在染色体端粒定位及其功能的影响

目的观察TPP1受到抑制后,对端粒保护蛋白1a（Pot1a）和端粒保护蛋白1b（Pot1b）在端粒上的定位及其对端粒保护功能产生的影响。方法利用逆转录病毒介导的RNA干扰技术抑制小鼠胚胎成纤维样细胞内源性TPP1的表达后,采用免疫荧光／端粒肽核酸荧光原位杂交法检测外源性Pot1a和Pot1b在端粒上的定位,通过端粒末端脱氧尿嘧啶转移酶法检测TPP1降低后对染色体末端保护功能的影响,SA—βgal染色检测细胞衰老,Western blot检测磷酸化的P53水平和P21含量。结果TPP1受到抑制后大约65％的MEF细胞中Pot1a和Pot1b不能定位在端粒上,显著高于空载体对照组的5％（t=10．96,P〈0．01）;TdT—FITC检测结果显示,大约50％的细胞在TPP1受到抑制后出现TdT—FITC阳性,其中90％的TdT—FITC阳性信号出现在端粒上,而在空载体对照组TdT—FITC阳性细胞为4．7％（t=14．37,P〈0．01）,位于端粒上的TcdT—FITC阳性信号〈3％（t=17．59,P〈0．01）;β-gal染色（细胞衰老的特征性标志）结果显示,在TPP1受到抑制后β—gal阳性细胞率分别达25．7％和22．0％,显著高于对照组细胞的1．7％（t=18．23,P〈0．01;t=16．9,P〈0．01）;进一步研究表明,TPP1受到抑制的细胞导致P53^ser18磷酸化,P21表达明显增强。结论TPP1是Pot1a和Pot1b定位在端粒上必需的,抑制TPP1导致染色体末端失去保护功能并诱导P53依赖的细胞衰老。     

丙硫咪唑与噻嘧啶治疗鞭虫效果比较观察

丙硫咪唑商品名肠虫清,一般采用两片(400mg)驱治肠道线虫。但常用剂量驱除鞭虫效果不理想,且差异甚大。为此我们采用丙硫咪唑增加剂量、延长疗程的方法,与噻嘧啶比较,在四川合江县中音乡流石村进行了现场观察。治前及治后半月均采用方口园底盒饱和盐水漂     

四种全自动尿沉渣分析仪对尿液中红细胞和白细胞的检测性能研究

目的评价FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪对尿液中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)的检测性能。方法对FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪检测尿液中RBC、WBC的批内精密度、携带污染率、线性范围、干扰实验进行评价。选择100例阳性尿样本分别用以上四种尿沉渣分析仪检测RBC、WBC,并将检测结果与人工镜检的结果进行对比分析。结果 FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪检测尿液中RBC的批内精密度分别为7.0%、5.8%、6.3%、3.2%,携带污染率分别为0、0.04%、0、0.09%;检测WBC的批内精密度分别为9.8%、8.2%、4.9%、5.9%,携带污染率分别为0、0.41%、0、0.12%。当RBC在0～15 000个/μl、WBC在0～10 000个/μl范围内时,四种尿沉渣分析仪的测定值与理论值的线性相关系数R2均>0.99。UF-500i、FUS-200修饰后、IQ-200修饰后、AVE-764B修饰后的RBC及WBC检测结果与人工镜检的结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05),真菌和结晶会干扰四种尿沉渣分析仪对RBC和WBC的检测结果。结论 FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪检测尿液RBC和WBC的精密度高、线性好、携带污染率低,可用于临床样本的初筛,但不能完全取代人工镜检。     

阿苯达唑、噻嘧啶治疗肠道线虫及控制钩虫感染回升的效果

采用阿苯达唑400mg/d×3d、400mg/d×5d和噻嘧啶1500mg/d×3d、1500mg/d×5d治疗肠道线虫感染者720例。治后半月检查,钩虫卵阴转率分别为98.6、98.6、86.2和93.5％;蛔虫卵阴转率分别为96.5、98.2、92.9和96.3％;鞭虫卵阴转率分别为86.4、89.0、68.9和67.0％。钩虫卵减少率均在98.0％以上。治后半年复查,各组钩虫阳性率均有不同程度回升,虫种由治前美洲钩虫为主,转为十二指肠钩虫为主。结果显示,回升的原因主要是十二指肠钩虫引起,而阿苯达唑400mg/d×3d和400ms/d×5d控制钩虫感染回升有明显作用。     

丹参体外抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的研究

目的 检测丹参体外对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLSs）增殖的影响。方法 用不同浓度丹参处理RA FLSs 24 h后,采用MTT法检测RA FLSs的增殖水平;用流式细胞仪检测其凋亡百分率。结果 加入不同浓度丹参处理RA FLSs 24 h后,细胞增殖受到抑制（P＜0.05）,并在一定丹参浓度范围内（0～1.56 mg/ml）呈现剂量相关性,当丹参浓度达到1.56 mg/ml时,细胞增殖抑制达到平台期。对照组与不同浓度丹参处理组凋亡细胞百分率比较,在丹参浓度为0.195 mg/ml时差异不明显,当丹参浓度为0.39 mg/ml时差异有显著统计学意义（P＜0.05）。结论 丹参在体外抑制RA FLSs增殖,可诱导细胞凋亡。     

丹参诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2、bax基因表达研究

目的探讨丹参作用类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞bcl-2和bax基因mRNA水平的表达。方法关节液原代培养获取成纤维样滑膜细胞,分别用终浓度为0,0.195和0.39 g/L的丹参作用24 h后,提取总RNA并逆转录成cDNA保存,采用rt-PCR方法检测bcl-2和bax在mRNA水平的表达。结果以丹参浓度为0(bcl-2的相对表达量为0.55±0.27)作为溶剂对照组,bcl-2的表达在丹参浓度为0.195 g/L时(bcl-2的相对表达量为0.53±0.35)没有显著性差异(P=0.468),当丹参浓度达到0.39 g/L时,bcl-2的表达(相对表达量为0.25±0.17)显著性降低(P<0.05);bax的表达在2种丹参浓度条件下均无显著性差异(P均>0.05)。结论丹参可抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2的表达,从而通过降低bcl-2/bax的值促进成纤维样滑膜细胞凋亡。     

维生素D受体起始密码子基因多态性与系统性红斑狼疮相关性研究

目的 检测维生素D受体(VDR)基因多态性在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的分布,探讨其与SLE发病的相关性.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测VDR起始密码子(FokI)多态性位点和基因型在271例SLE患者和130名健康对照组中的分布情况.采用χ2检验和方差分析进行统计学处理.结果 SLE患者及健康对照组VDR FokI多态性基因型和等位基因分布均不处于Hardy-Weinberg平衡(SLE组χ2=7.883,P=0.019;健康对照组:χ2=7.288,P=0.026).VDR FokI多态性等位基因F和f的分布频率在健康对照组分别为48.8%和51.2%,在SLE组分别为60.9%(χ2=10.39,P=0.001)和39.1%(χ2=10.39,P=0.001);F等位基因个体发生SLE的比值比(OR)为1.630(95%CI=1.210～1.1%,χ2=10.39,P=0.001).基因型FF、Ff和ff分布频率在健康对照组中分别为25.4%、46.9%和27.7%,在SLE组中分别为42.8%(χ2=11.417,P=0.001)、36.2(χ2=4.251,P=0.039)和21.0%(χ2=2.187,P=0.139);FF和Ff基因型个体发生SLE的OR分别为2.200(95%CI=1.385～3.493,χ2=11.417,P=0.001)和0.641(95%C1=0.419～0.979,χ2=4.251,P=0.039).进一步分析发现,不同VDR FokI多态性基因型SLE患者之间疾病活动性积分(SLEDAI)差异无统计学意义(P=0.382).但与FF和ff基因型SLE患者对照,Ff基因型SLE患者中浆膜炎的发生率更高(P=0.001),而且具有更高阳性率的抗双链DNA(dsDNA)抗体(P=0.001)、抗Sm抗体(P=0.047)和抗组蛋白抗体(P=0.001),但皮疹发生率较低(P=0.005).结论 VDR FokI多态性位点F等位基因和F/F及F/f基因型与SLE发病易感性有关,而且F/f杂合子患者更容易发生浆膜炎和产生抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗组蛋白抗体.     

双试剂直接分光光度法测定血清总铁结合力

目的建立一种灵敏度高、选择性好的铬天青B血清总铁结合力的直接测定法。方法在pH4.5的条件下,结合铁从转铁蛋白释放,铬天青B与血清中的铁和过量的铁标准液发生显色反应,再加入碱性缓冲液,在pH7.8的条件下,转铁蛋白从铁和铬天青B复合物中吸引铁与其结合,溶液的吸光度值下降与血清总铁结合力浓度呈正比。对反应条件和方法性能进行系统研究。结果显色络合物的最大吸收波长为630nm,线性可达130.0μmol/L,回收率为98.3%~99.2%,批内变异系数为2.7%,批间变异系数为3.8%,与碳酸镁作吸附剂的手工比色法比较有良好相关性,回归方程为Y=0.994X 0.40,r=0.993。70例健康成人血清总铁结合力含量为51.3~76.3μmol/L。结论该法试剂稳定,具有操作快速、灵敏、简便和结果准确等优点,适宜于血清总铁结合力的手工测定和自动化分析。