鼻咽癌患者血清与鼻咽组织γ－谷氨酰转肽酶的检测

用γ－谷氨酰对硝基苯胺法测定了１０６例鼻咽癌（ＮＰＣ）和６５例鼻咽炎患者血清及鼻咽组织γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）活件。并对其中初诊为ＮＰＣ患者进行放疗前（３４例）后（１５例）血清及鼻咽组织γ－ＧＴ活性测定。结果显示：ＮＰＣ与鼻咽炎、ＮＰＣ放疗前后血清及鼻咽组织γ－ＧＴ活性差异都有极显著性。提示可将γ－ＧＴ活性测定作为ＮＰＣ辅助诊断及评价疗效的参考指标。     

杂交捕获法和PCR-RDB法检测妇女HPV感染的比较

Objective To compare hybrid capture-Ⅱ(HC2)to polymerase chain reaction(PCR)-reverse dot-blot(RDB)for detecting HPV infection in women.Methods HC2 method and PCR-RDB were applied to detecting human papillomaviral infection in female genital duct,and the test results were analyzed.Results Concordant results were found in 81.14%(400/493)samples(Kappa=0.63;95%CI,0.57-0.69).The high risk type HPV positive rate detected by PCR-RDB were 1.60%(3/187),29.85%(20/67),69.88%(58/83),86.52%(77/89)and 91.04%(61/67),respectively,when the HC2 RLU/CO of samples were＜1.00,1.00-9.99,10.00-99.99,100.00-999.99 and≥1000.00.Statistical differences were found among the five groups(χ2=289.3,P＜0.01).Cross reactions were found between HC2 high risk probe and HPV53,66,11,cp8304 and other genotypes.Conclusion There is good concordance between HC2 and PCR-RDB,though cross reaction exists in HC2.Relatively speaking,there are more influential factors for PCR-RDB.     

对新世纪检验医学教育的思考

检验医学是现代实验室科学技术与临床医学在高层次上的结合,是一门多学科交叉、相互渗透的新兴学科.进入21世纪,随着基础医学、临床医学、生物工程学、电子学以及信息技术等学科的发展及新的检验技术和自动化仪器的应用,检验医学得到了迅速发展.由于新技术的应用及方法学上的革命性变革,检验科开展项目的增多,检验质量和水平显著提高,越来越多的临床医生依靠检验信息综合分析,进行诊断、治疗和预后判断,检验医学正发挥着越来越重要的作用.面对新世纪检验医学学科的发展和人才的培育,大家要从目前的实际需要出发,着眼检验医学未来的发展进行理性的思考.为此,笔者就检验医学教育谈几点看法.     

流式细胞仪检测52例鼻咽癌外周血T淋巴细胞亚群

用流式细胞仪检测５２例鼻咽癌（ＮＰＣ）患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群，与２５例正常人作对照；并将ＮＰＣ患者作分期比较。结果ＮＰＣ组较对照组ＣＤ３有下降趋势，但无统计学意义；ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值均下降，有高度显著性差别（Ｐ＜００１）；ＣＤ８升高，亦有显著性差别（Ｐ＜００５）。与早期ＮＰＣ相比，晚期ＮＰＣ患者ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值均下降，亦有显著性差别。     

集成毛细管电泳芯片技术及其应用

Manz和Harrison 1992年首先提出将毛细管缩微制作成毛细管芯片进行电泳分离,此后该技术得到很大的发展.集成毛细管芯片技术(integrated capillary electrophoresis chips, ICE-chips)是将毛细管缩微移植到很小芯片上,将样品进样、反应、分离、检测等过程集成在一起的多功能快速、高效、低耗的缩微实验技术.首先毛细管被蚀刻在硅片上,用于蚀刻的基质材料随后从硅片扩展到石英、玻璃和塑料等聚合物上,再用激光诱导荧光、电化学、化学等多种检测系统检测[1～3]以及与质谱等[4～8]等分析手段结合进行样品分析,广泛用于生物医药和临床实验中.     

siRNA沉默Twist基因对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的影响

目的探讨RNA干扰沉默Twist基因对人鼻咽癌细胞株CNE-2的迁移、侵袭和增殖等生物学活性的影响。方法构建Twist-shRNA表达载体,脂质体法将重组质粒分别转染入鼻咽癌细胞株CNE-2中,RT-PCR法检测Twist mRNA、Western blot法检测Twist蛋白表达量的变化。MTT法检测细胞的增殖,细胞创伤愈合试验观察细胞迁移能力,Tran-swell小室试验检测细胞侵袭能力的变化。结果沉默Twist基因可减慢CNE-2细胞生长速度(与对照组比较P<0.05),降低CNE-2细胞的迁移速度,抑制CNE-2的体外侵袭能力。结论靶向封闭Twist基因的表达,可明显抑制CNE-2细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示Twist可作为鼻咽癌防治的一个新的靶点。     

RNA干扰阻抑Bax inhibitor-1(bi-1)基因表达对卵巢癌细胞凋亡的影响

目的： 研究RNA干扰(RNAi)效应对人卵巢癌细胞株HO8910PM和HO8910中bi-1基因表达的抑制作用和凋亡诱导作用。 方法： 把表达bi-1 shRNA的各重组干扰质粒转染到HO8910PM和HO8910细胞中,RT-PCR和Western blotting法检测bi-1基因mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术和Hoechst 33258/PI荧光染色检测siRNA诱导细胞凋亡作用。结果：与对照组细胞相比较,转染4种候选干扰质粒组细胞中bi-1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降（P<0.05）,以转染pmU6-b4组细胞的表达抑制率最高,在HO8910PM细胞中的抑制率分别为 (45.50±3.04）%和(51.08±4.96）%,在HO8910细胞中的抑制率分别为 (37.29±3.69）%和(44.96±4.28）%;流式细胞术结果表明,与对照组细胞相比较,转染pmU6-b4质粒24 h、48 h、72 h、96 h的HO8910PM细胞中亚二倍体峰比值明显升高 (P<0.05),以转染72 h组细胞的比值最高,达到 (25.89±5.63）%,而HO8910细胞中无亚二倍体峰出现;荧光显微镜下可见转染pmU6-b4质粒72h的HO8910PM细胞出现细胞核缩小、染色质固缩和核断裂,而HO8910细胞核无明显变化。 结论： 针对bi-1的siRNA能特异有效地下调HO8910PM和HO8910细胞中bi-1基因的表达,不同序列特异性的siRNA下调bi-1基因表达的能力不同;瞬时转染质粒pmU6-b4能有效诱导HO8910PM细胞凋亡,但不能诱导HO8910细胞凋亡。     

绿茶提取物EGCG对肺癌细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

绿茶的水溶性提取物含有多种多酚类化合物,其中表没食子儿茶素没食子酸酯[（-）-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]的含量最高,也最具有药用功效。已发现EGCG可抑制人肺癌血管生成,但其抑制肺癌血管生成的机制还不完全清楚。低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）是促血管生成的关键因子。本文的目的拟探讨在非小细胞肺癌细胞A549中,EGCG是否通过影响HIF-1α和VEGF表达来抑制肺癌血管生成。方法：将已在无血清培养液中饥饿24h的A549细胞用不同浓度的EGCG[0（对照）、10、25、50、100μmol／L）预处理1h后,再加终浓度为40ng／mL的胰岛素样生长因子（insulin—like growthfactor-1,IGF-1）在37℃继续孵育16h。将各组细胞和条件培养液收集后,采用Westernblot分析各组细胞中HIF-1α蛋白的表达、ELISA检测各条件培养液中VEGF的蛋白分泌、实时PCR测定各组细胞HIF-1α和VEGFmRNA的表达水平。     

DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的实验研究

拟从细胞凋亡角度出发，探讨能够诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的因素，为有效地防治该恶性肿瘤提供新的思路。方法：光镜下观察细胞的形态变化；流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体比例；ＤＮＡ凝胶电泳及二苯胺法测定ＤＮＡ片段化程度。结果：一定浓度的拓朴异构酶Ⅰ（Ｔｏｐｏｉｓｏ－ｍｅｒａｓｅⅠ，ＴＯＰＯⅠ）抑制剂喜树碱（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ，ＣＰＴ）体外作用于人低分化鼻咽癌上皮细胞系ＣＮＥ－２Ｚ细胞一定时间后，镜下可见细胞体积缩小，染色质凝聚，胞膜突起及凋亡小体形成等形态变化。２～１０μｍｏｌ／Ｌ的ＣＰＴ分别作用１２小时后作流式细胞仪检测，亚二倍体比例均为３０％左右；各浓度分别作用２４小时，亚二倍体比例均为５０％左右；同时细胞周期有明显的变化，主要表现为Ｇ２／Ｍ期细胞减少。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳呈典型的梯形带。结论：拓朴异构酶Ⅰ抑制剂ＣＰＴ对人低分化鼻咽癌上皮细胞具有明显的凋亡诱导作用。