加强基因型分析发展个体化医学

疾病的诊断,从表型(phenotype)分析发展到表型和基因型( genotype)结合分析代表着医学的革命性进步。临床分子病理学,或称分子诊断,已成为当今迅猛兴起的病理亚学科之一。它从核酸水平（DNA和RNA）研究疾病发生和发展规律,揭示疾病时外源性基因在体内的存在和内源性基因的突变及表达异常,是传统形态病理学的有益补充和发展。     

TIMP－1基因转染对人肺巨细胞癌细胞系生物学行为的影响

利用基因重组技术构建了一个含有全长人ＴＩＭＰ－１ｃＤＮＡ的真核表达重组体。重组质粒通过脂质体法导入高转移入肺巨细胞癌细胞系（ＰＧ细胞）。随机挑选５个Ｇ４１８抗性克隆，并对其中的两个克隆ＰＧ－Ｔ２和ＰＧＴ４进行了深入的研究。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹表明，这两个克隆具有较高的ＴＩＭＰ－１ＲＮＡ表达，其表达水平明显高于ＰＧ细胞和空载体转染对照细胞ＰＧ－ＭＶ。ＰＧ－Ｔ２和ＰＧ－Ｔ４克隆细胞显示出很高的ＴＩＭＰ－１蛋白活性，相同条件下ＰＧ和ＰＧ－ＭＶ未能显示出具有ＴＩＭＰ－１蛋白活性。此外，与其母系ＰＧ细胞及空载体转染对照细胞ＰＧ－ＭＶ相比，ＴＩＭＰ－１转染细胞的增殖速度和侵袭能力明显下降，其在软琼脂上形成克隆和在裸鼠体内成瘤的能力丧失。提示ＰＧ细胞中ＴＩＭＰ－１基因的特异性上调不仅能抑制其侵袭能力，而且对其增殖和成瘤产生抑制作用。     

人结肠鳞癌直肠鳞腺癌SCID鼠原位移植高转移模型的建立及其生物学特性的研究

目的 建立人结肠鳞癌直肠鳞腺癌SCID鼠原位移植高转移模型,为探讨理想的治疗结肠癌肝转移和预防结肠癌根治术后肝转移的方法提供实验工具。方法 采用组织学完整的结肠癌手术标本植入SCID鼠结直肠（粘膜层）壁内,观察原位移植的成瘤、移植瘤的侵袭和转移及其形态学特征（光镜、电镜、免疫组织化学）。结果 两株人结肠癌SCID鼠均获原位移植成功。人结肠鳞癌SCID鼠原位移植模型HCS-HMN-1已传至19代,人直肠鳞癌SCID鼠原位移植模型HRSA-HMN-2已传至23代,共移植SCID鼠223只,其移植生长率和自发转移率及液氮冻存复苏成活率均为100％,移植瘤在结直肠内呈广泛原位侵袭性生长、淋巴结转移、肝转移和全腹腔播散转移。并具有分泌CEA的功能。移植瘤细胞病理学和电镜观察、流式细胞仪DNA含量检测及染色体核型分析与瘤源人结直肠癌细胞完全一致。结论 本研究所建立的两株人结直肠癌SCID鼠高转移模型完整地模拟了人结直肠癌侵袭和转移的临床过程。为进一步研究结直肠癌肝转移、治疗和预防结直肠癌根治术后肝转移的方法提供了理想的实验动物模型。     

肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶作用机制系列研究

针对肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物的作用和调节机制进行了较深入的系列研究。在包括肺癌、前列腺癌和黑色素瘤的几组具有不同转移潜能的人肿瘤细胞系中，癌细胞产生MMP-2和MMP-9的能力与其侵袭转移能力密切相关。进一步通过反义基因转染技术证实，抑制MMP-9基因表达可以明显降低高转移癌细胞的体外侵袭及裸鼠体内自发转移能力。将金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1，TIMP-2和TIMP-3基因分别导入高转移癌细胞，可以观察到转染细胞的侵袭转移能力受到明显抑制。说明通过选择性抑制MMPs基因表达或增强TIMPs基因表达均可在一定程度上达到抑制肿瘤侵袭转移的目的。与此同时，我们应用定时控制表达技术分别将正义或反义MMP-9基因导入MMP-9不表达或高表达的黑色素瘤细胞，通过四环素控制的分子开关成功实现了MMP-9基因的定时控制表达，为提高临床基因治疗的效果提供了初步实验依据。     

单核细胞趋化蛋白1 mRNA在颅内动脉瘤瘤壁内的表达

目的 探讨脑动脉瘤发生发展的病理过程。方法 对2例未破裂的颅内动脉瘤和11例破裂的颅内动脉瘤瘤壁组织进行常规HE染色和原位杂交的方法，观察单核细胞趋化蛋白1（MCP－1）的mRNA在瘤壁内表达的位置；1例正常脑动脉壁组织做对照。结果 2例未破裂和10例破裂动脉瘤壁组织HE染色，显示瘤壁仅由增厚的内膜和结缔组织外膜组成。纤维增厚的内膜有长梭形的成纤维细胞不规则排列。瘤壁全层有单核细胞浸润。1例破裂动脉瘤瘤壁仅存玻璃样变纤维结构，几乎不存在细胞成分。1例未破裂动脉瘤和8例破裂动脉瘤瘤壁有附属血栓，血栓呈机化表现。原位杂交结果显示：正常动脉未见杂交信号。2例未破裂和10例破裂动脉瘤瘤壁内有杂交阳性细胞，多为成纤维细胞，颗粒沉积于细胞质。单核细胞胞质少，阳性颗粒不明显。杂交阳性信号间断分布在动脉瘤瘤壁内膜，多出现于排列紊乱的成纤维细胞，淋巴细胞聚集处。1例破裂动脉瘤瘤壁仅存玻璃样纤维结构，几乎不存在细胞，未见杂交信号。动脉瘤附壁血栓内MCP－1 mRNA表达细胞有成纤维细胞、浆细胞、微血管的内皮细胞，表达部位在细胞质。结论 未破裂的和破裂的动脉瘤瘤壁的病理表现和MCP－1 mRNA的高表达，提示脑动脉瘤的发展是单核细胞为主的不断加强的慢性炎性过程。     

利用聚会酶链式反应技术扩增层粘连蛋白受体的cDNA

利用聚会酶链式反应技术扩增层粘连蛋白受体的ｃＤＮＡ北京医科大学病理学教研室张鸿来，张卫国，吴秉铨聚合酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰｃＲ）技术产生仅数年，却以惊人的速度发展，应用于分子生物学研究的各个领域，其中包括肿瘤转...     

第八届编辑委员会的成立

中华病理学杂志第八届编辑委员会已经组成。2005年11月15日在宁波召开了本届第一次的编辑委员会。会上首先宣读了中华医学会白书忠副会长对新编辑委员会成立的祝贺。随后杂志社燕鸣总编辑代表中华医学会和杂志社宣布了第八届编辑委员会组成名单。第八届编辑委员会在留任编委的基础上增聘了38位新成员，壮大了中壮年专家队伍。最值得提出的是从海外编委中聘任了一位副总编，加强了编审领导力量和与香港特别行政区病理学家的合作。第八届编辑委员会的正、副总编都在65岁以下，是他们年富力壮、学识宽广的好时光，相信会肩负起日益繁重、艰巨的编审工作。海外编委和特邀编审也随着人员变化做了些调整，以适应未来工作的需要。     

子宫内膜黏液性上皮病变中KRAS基因突变分析北大核心CSCD

目的通过对子宫内膜黏液性上皮病变中的KRAS突变情况进行分析,探讨KRAS突变与子宫内膜黏液癌的相关性。方法收集2015年7月至2017年10月首都医科大学附属北京妇产医院病理科诊断的子宫内膜黏液性上皮病变43例,不典型性子宫内膜增生症10例．子宫内膜样癌12例。从中性甲醛固定石蜡包埋组织中提取基因组DNA,聚合酶链反应（PCR）扩增KRAS第2、3号外显子,并进行毛细管电泳分析突变情况。应用Fisher确切概率法对各组中KRAS突变差异情况进行比较。结果43例子宫内膜黏液性上皮病变患者年龄33-77岁,平均年龄（55．12±9．34）岁,中位年龄55岁。8例具有黏液分化的不伴细胞不典型性的子宫内膜增生症均未检出KRAS突变。不典型性子宫内膜增生症、子宫内膜样癌、不典型性子宫内膜增生症伴黏液分化、子宫内膜样癌伴黏液分化与黏液癌中存在KRAS突变,检出比例分别为1／10、1／12、4／11、6／15和8／9。黏液癌与子宫内膜样癌组（P〈0．01）、子宫内膜样癌伴黏液分化组（P〈0．05）相比,KRAS突变分布差异具有统计学意义。结论不典型性子宫内膜增生症伴黏液分化、子宫内膜样癌伴黏液分化和黏液癌中存在KRAS高频突变．提示KRAS突变激活与子宫内膜黏液癌的发病机制密切相关。     

组织微阵列

随着科技的发展,尽管人类对某些肿瘤的病因、发病机制及相关预后因素有了一定的认识,也有了一些相应的治疗方法,但对相当多的肿瘤仍显得力不从心。新近,基因工程生物技术的快速发展促使人们对疾病的分类重新予以考虑,即不再以形态学和临床表现为基础,而是以病变所表达的分子标记物为出发点,这样可将那些组织学上雷同、但生物学行为和预后不同的肿瘤区别开来。加之人类基因组序列的测定即将完成,所有人类遗传信息的第一手资料也会随之获得,运用DNA微阵列可很容易筛选出在某一疾病中发生了异常改变的基因,但如何实现这些基因的转化,即如何将…     

p21 WAF1/CIP1基因导入对p53突变人肺癌细胞系生长特性的影响

目的　探讨含突变ｐ５３ 基因癌细胞系表达ｐ２１ 基因的抗肿瘤作用。方法　构建人ｐ２１表达重组子,导入ｐ５３ 基因突变的人肺癌ＰＧ细胞系,建立稳定高表达ｐ２１ 的细胞系;然后观察其形态及生长特性的改变;ＣＤＫ４ ,ＰＣＮＡ水平;对基因毒性物的反应性。结果　在含ｐ５３ 基因突变的ＰＧ 细胞内导入外源性ｐ２１ 基因,其高表达ｐ２１ 约是ＰＧ 细胞的６ 倍;转染细胞出现核规则、核膜变薄等异型性降低;生长速度下降（５０％ ） ,叠落生长不明显;在０ ．５％ 血清条件下生长显著低于对照组;血清依赖性升高;软琼脂集落实验：转染细胞集落形成率降低为１ ％ （ 对照组为２８％ ） 。ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 显示,ｐ２１ 转染细胞的ＣＤＫ４ 和核仁组成区相关蛋白水平显著降低。但顺铂诱导下转染细胞凋亡发生延缓至４８ 小时以后（ 对照组２４ 小时）。结论　在有ｐ５３ 基因突变的肿瘤细胞ｐ２１ 的高表达仍能抑制癌细胞的生长,降低恶性表型;其作用可能与降低细胞ＣＤＫ４ 和ＰＣＮＡ 水平有关,而不依赖细胞凋亡机制。表达ｐ２１ 基因可作为恢复ｐ５３ 基因功能的旁路途径。