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目的:对抗TSLP-scFv全人源单链抗体进行单点突变,以提高其亲和力。方法:本研究前期筛选了特异性好的抗TSLP-scFv,本研究利用Discovery Studio系统模拟TSLP和抗TSLP-scFv 三维结构,进行分子对接,对结合表位氨基酸进行随机突变,选取可显著提高其亲和力的氨基酸突变点,根据突变位点设计引物,采用重叠延伸PCR对氨基酸位点进行突变。将突变后的scFv基因与表达载体pLZ16连接,转化E.coli DH5αF′,表达后筛选亲和力提高的抗TSLP-scFv。结果:DS系统筛选出可以提高scFv亲和力的5个单点突变氨基酸位点,PCR扩增出突变后的抗TSLP-scFv DNA片段大小为1 000 bp左右。将测序正确的菌株进行表达,通过ELISA筛选出与抗原结合力提升的抗TSLP-scFv;通过生物大分子相互作用技术,测定单抗的亲和力,突变后的scFv M4亲和力较突变前提高了10倍左右。结论:成功提升了抗TSLP-scFv全人源单链抗体的亲和力。 相似文献
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目的探讨酒石酸吉他霉素联合头孢硫脒治疗呼吸道感染的临床疗效。方法将180例呼吸道感染患者随机分为3组.分别给予酒石酸吉他霉素、头孢硫脒及联合用药进行治疗,疗程均为14d。观察治疗前后临床疗效并在治疗结束后进行痰细菌培养。结果酒石酸吉他霉素组、头孢硫脒组与联合用药组经过14d治疗的痊愈率为65.0%、70.0%、83.3%,总有效率分别为783%、78.3%、95.0%,细菌清除率分别为62.7%、63.2%、89.1%,药物敏感率分别为75.4%、74.9%、90.6%。结论酒石酸吉他霉素联合头孢硫脒治疗呼吸道感染疗效高.安全性好.并且联合用药疗效优于其中单一药物治疗疗效。 相似文献
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[目的]研究TLR激动剂LPS和PGN影响中性粒细胞凋亡及凋亡相关的Bax蛋白的表达。[方法]分离培养正常受试者的外周血中性粒细胞,分别加入LPS和PGN两种TLR激动剂,并设生理盐水对照,用流式细胞术检测中性粒细胞的凋亡抑制率,通过Westernbloting技术检测中性粒细胞Bax蛋白的表达。[结果]LPS和PGN降低中性粒细胞自发性凋亡的发生率,与自发性凋亡组比较差异有统计学意义(P﹤0.05);接受LPS和PGN刺激的中性粒细胞表达Bax蛋白均低于自发性凋亡组(P﹤0.05)。[结论]在TLR激动剂诱发的中性粒细胞生存效应中,LPS和PGN可能通过降低中性粒细胞内Bax蛋白的表达来延长中性粒细胞的生命期限。 相似文献
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目的 :研究缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏MCP 1表达的影响 ,探讨缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用机制。方法 :将Wistar大鼠随机分为三组 :正常对照组 (NC组 )、糖尿病模型组 (DM组 )、糖尿病模型 +缬沙坦治疗组 (DV组 ) ,于 8周时用免疫组织化学的方法检测STZ诱导的糖尿病大鼠肾组织中MCP 1的表达。结果 :8周时肾组织中MCP 1的表达DM组明显高于DV组、NC组 (P <0 0 1) ,DV组明显高于NC组 (P <0 0 5 ) ,而且与UAER呈明显正相关 (r =0 665 9,P <0 0 1)。结论 :缬沙坦能显著减少糖尿病大鼠肾组织中MCP 1的表达 ,明显改善肾功能 相似文献
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目的 研究糖尿病大鼠肾脏血管内皮生长因子 (VEGF)及Ⅳ型胶原 (Ⅳ -C)的表达 ,探讨VEGF及Ⅳ -C与糖尿病肾脏病变的关系。方法 将Wistar大鼠随机分正常对照组 (NC组 )和糖尿病模型组 (DM组 ) ,每组 2 0只 ,用链脲佐菌素 (STZ)诱导糖尿病大鼠模型。于 8周用免疫组织化学的方法检测两组大鼠肾组织中VEGF及Ⅳ -C的表达。同时检测肾功能。结果 8周肾组织中VEGF及Ⅳ -C的表达DM组明显高于NC组 (P <0 0 1) ,而且分别与 2 4h尿白蛋白排泄率 (UAER)呈显著正相关 (r =0 893 ,P <0 0 1;r =0 72 6,P <0 0 1)。结论 糖尿病大鼠肾组织中VEGF及Ⅳ -C的表达明显增强 ,而且其表达与肾脏病变呈正相关 相似文献
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3种菌种保存法比较 总被引:8,自引:0,他引:8
菌种的保存法很多 ,如 :琼脂斜面法 [1 ]、高层半固体琼脂保存法 [2 ]、庖肉培养基保存法、脱纤维羊血冷冻菌种保存法等。一些方法比较简便 ,但保存时间短 ,传代频繁 ,菌种易变性 ;一些方法虽能长期保存菌种 ,但操作复杂 ,所需设备较多。为能建立一种操作简便、保存时间长、菌种稳定性好、勿需较高设备条件的保存方法 ,本文就我们实验室中最常用的 3种进行比较性研究如下。1 材料和方法1.1 材料 1保护剂牛奶的准备 :从奶场购得新鲜牛奶 ,经脱脂棉反复 3次过滤后 ,10磅 10 min高压蒸气灭菌后 ,冰箱保存备用。 2菌种管的处理 :先经清洁液… 相似文献
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黄甜甜段碧晗叶迎春王硕高凌 《疑难病杂志》2021,(5):481-487
目的探讨m^(6)A RNA甲基化调控因子在甲状腺癌中的作用。方法在TCGA数据库中获取甲状腺癌样本510例和正常对照样本58例的RNA-seq转录组数据及相应甲状腺癌患者的临床病理资料。比较13种m^(6)A RNA甲基化调控因子在甲状腺癌和正常甲状腺组织中的表达水平。基于一致性聚类分析将甲状腺癌组织分为2个聚类,并比较其总体生存率和临床病理特征的差异。进一步利用单因素COX回归分析筛选出与甲状腺癌患者预后相关因子,并将其纳入LASSO回归分析,构建患者的风险特征模型,进而评估风险特征模型的预测价值。结果除YTHDF2外,余12个m^(6)A RNA甲基化调控因子在甲状腺癌组织中的表达与正常甲状腺组织比较差异均有统计学意义。在一致性聚类分析中,聚类2的总体生存率明显低于聚类1。基于3个高风险调控因子(RBM15、KIAA1429和FTO)构建风险特征模型并用于风险评分计算。高危组和低危组的总体生存率,RBM15、KIAA1429、FTO表达和T状态比较差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,风险评分可以预测甲状腺癌患者的5年生存率(AUC=0.717),多因素Cox回归分析表明,风险评分是甲状腺癌的独立预后指标(P=0.001)。结论m^(6)A RNA甲基化调控因子影响甲状腺癌的进展,其中RBM15、KIAA1429和FTO可作为临床预后标志物,在治疗决策中具有潜在价值。 相似文献
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核因子-κB对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1与细胞间黏附分子-1表达的影响 总被引:2,自引:2,他引:2
目的:探讨核因子-κB(NF.κB)对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,以及抑制其表达对肾脏的保护作用。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(DM组)、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯干预组(DP组),用链脲佐茵素诱导糖尿病大鼠模型。于8周末检测血糖、糖化血红蛋白、肾重指数及尿白蛋白排泄率。应用免疫组织化学染色技术检测肾组织NF-κB、MCP-1以及ICAM-1的表达。结果:(1)与NC组相比,DM组大鼠肾重指数、尿白蛋白排泄率显著增高。DP组也有增高但显著低于DM组(均P〈0.01);(2)DM组大鼠肾组织NF-κB、MCP-1以及ICAM-1的表达显著高于NC组,DP组的表达显著低于DM组而高于NC组(均P〈0.01);(3)NF.κB的表达与MCP-1、ICAM-1、尿白蛋白排泄率、肾重指数呈明显正相关(r=0.885,P〈0,01;r=0.861,P〈0.01;r=0.796。P〈0.01;r=0.457。P〈0.01)。结论:糖尿病大鼠肾组织中NF-κB表达明显增加,抑制其活性可减少MCP-1、ICAM-1的表达,减轻单核/巨噬细胞的浸润。延缓糖尿病肾病的发展。 相似文献
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目的研究诃子鞣质对生物被膜型白色念珠菌的抑制作用。方法采用MTT法检测诃子鞣质对生物被膜形成的影响;光镜下观察生物被膜内白色念珠菌的形态学变化;采用荧光显微镜观察吖啶橙/溴化乙锭染色的生物被膜内白色念珠菌的死亡方式。结果诃子鞣质对生物被膜的形成及成熟期生物被膜中的白色念珠菌有抑制作用,并存在时间和剂量依赖性;鞣质导致被膜内白色念珠菌细胞变形,形态结构改变,芽管和假菌丝形成抑制,但未见确切细胞凋亡。结论诃子鞣质对白色念珠菌生物被膜的形成有抑制作用,它可能通过非凋亡途径导致生物被膜内白色念珠菌的死亡。 相似文献
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叶迎春 《中华现代中医学杂志》2009,5(1)
本文旨在研究教学基地的综合医院如何做好教学研究工作,以适应新形势下,“以病人为中心”的工作,结合我院的实际情况,以适应市场不断变化,从师资力量、教学内容、教学管理等方面进行改革。 相似文献