应用高强度聚焦超声缓解胰腺癌患者疼痛症状的观察

目的探讨高强度聚焦超声(highintensityfocusedultra-sound,HIFU)缓解胰腺癌患者疼痛症状及其近期疗效。方法应用FEP-BY01型肿瘤超声治疗机对31例胰腺癌患者进行HIFU治疗。结果治疗后81%(25/31)患者疼痛症状明显缓解;治疗后肿瘤大小变化:36%(11/31)明显缩小,42%(13/31)无变化,23%7/31)有不同程度的增大;CA19-9的浓度由治疗前的((32.5±3.8)μkat/L,降为治疗后(21.5±2.6)μkat/L。未发生皮肤烧伤、胰瘘、出血、胰腺炎、胃肠道穿孔等并发症。结论HIFU是治疗胰腺癌的一种新的安全有效的局部治疗方法。     

微波消融技术及临床应用研究进展

随着微创技术的发展,实体瘤的局部热消融（Thermal ablation）技术已经成为现代肿瘤综合治疗中行之有效的方法之一。热消融技术主要包括微波、射频、激光、冷冻和高强度聚焦超声等。微波消融（microwave ablation,MWA）治疗技术具有微创、痛苦小、操作简便、可反复施行、疗效确切等优点,为肿瘤的局部治疗提供了一种新途径。目前该技术已成为了国内外学者研究的热点,现就微波消融技术及临床应用研究进展综述如下。     

C57BL／6小鼠树突状细胞的培养及其诱导细胞毒性T淋巴细胞对FBL-3细胞杀伤效应的研究

目的探讨C57BL／6小鼠树突状细胞（DC）的培养及其诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对FBL-3细胞的杀伤效应。方法应用GM—CSF和114培养C57BL／6小鼠骨髓DC,用冻融法制备FBL-3细胞抗原致敏DC,用3H—TdR法检测T细胞增殖反应的能力,标准的4h51cr释放测定法检测CTL杀伤活性。结果用IL4和GM—CSF联合培养小鼠骨髓细胞3天后,可见细胞形态发生改变,细胞形态不规则。培养第6～8天,细胞表面出现较多毛刺样突起,拉长,为典型的DC特征。流式细胞仪检测DC表面分子有CD80、CD86、H-2Kd及I-Ad表达。FBL-3细胞冻融组和PBS组的DC在体外均可以诱导T细胞增殖,冻融组的DC体外诱导T细胞增殖能力明显高于PBS组。冻融组DC体外诱导的CTL对FBL-3细胞有明显的细胞毒作用。结论应用IL-4联合GM—CSF培养C57BL／6小鼠骨髓细胞,可大量扩增成熟DC,培养的DC符合其自身的特性;用冻融法制备FBL-3细胞抗原致敏DC,可以诱导T细胞细胞大量增殖,并能诱导出杀伤效应较强的CTL。     

血小板特异性抗体及HLA抗体引起血小板输注无效的研究

目的分析血小板输注无效（PTR）患者血小板同种抗体,并对其HPA及HLA-Ⅰ类抗原进行基因分型,探讨血小板输注无效与血小板同种抗原／HLA—Ⅰ类抗原相关性。方法应用ELISA方法对17例血小板输注无效患者血清中的血小板抗体进行检测;运用PCR—SSP方法,采用HPA分型试剂盒检测血小板同种抗原7个抗原系统HPA-1、2、3、4、5、6、15,以及HLA分型试剂盒对HLA—A／B抗原进行基因分型。结果6名患者单独表达HLA抗体,4名患者表达血小板特异性糖蛋白抗体,3例HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体共同表达．其中以GPⅡb／Ⅲa为主。对17例患者HPA系统和HLA-Ⅰ类抗原基因分型,发现HPA-3系统中a的基因频率高达0．676,b为0．324;HLA—A＊02、HLA—A＊24、HLA—A＊11和HLA—B＊60、HLA—B＊13、HLA—B＊46多见。结论HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体表达引起血小板输注无效,了解胛R与HPA／HLA—Ⅰ类抗原的相关性对指导临床血小板配合性输注具有重要意义。     

K562及其耐药细胞系多药耐药机制的蛋白质组学研究

 目的 探讨K562及其耐药细胞系蛋白差异表达情况。方法 应用二维荧光差异电泳结合质谱技术,经过相应软件处理找出K562和K562耐药细胞之间蛋白质表达质和量的变化。结果 二维电泳发现11个差异蛋白点,质谱鉴定出9个表达差异的蛋白质,其中4种蛋白质能量代谢有关;3种蛋白质与细胞信号转导有关;2种蛋白与细胞增殖相关。9种差异表达蛋白质中,6种在K562/ADM中表达增加,3种表达降低。结论 研究表明应用2D-DIGE结合质谱技术为白血病多药耐药机制研究是一种新的可靠手段,对于揭示耐药细胞与敏感细胞蛋白组学变化和蛋白质之间的相互作用提供新的思路。     

孕妇CD36抗原表达筛查及基因测序分析

目的了解孕妇CD36抗原的表达及其基因型。方法对在本中心做抗体筛查及血小板抗体检测的200名孕妇,采用流式细胞术检测其血小板及单核细胞上的CD36表达,并对其中血小板或单核细胞上CD36抗原缺失者做基因测序分析。结果本组孕妇CD36缺失表达率为1.5%(3/200),3例CD36缺失均为Ⅱ型缺失(只有血小板上CD36缺失),未见CD36Ⅰ型缺失(血小板和单核细胞上CD36都缺失)。3例CD36缺失表达者基因测序分析:2例发生CD36基因突变,其突变位点分别是Exon12 A1163T和Exon5 329-330del AC,为常见的基因突变类型;1例为正常CD36基因型。结论孕妇CD36表达缺失率与中国普通人群相似,缺失者CD36基因发生了基因突变。     

人脐血来源的树突状细胞体外培养、扩增及鉴定

目的 探讨人脐血来源的树突状细胞(dendritie cells,DC)的体外培养、增殖情况。方法 无菌条件下常规采集脐血,用密度梯度离心法分离脐血中单个核细胞,贴壁培养2小时,去除非贴壁细胞,将获得的单个核细胞分为两组,试验组在含有粒单细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白介素-4(IL-4)+肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的培养液中培养,在体外诱导分化为DC,对照组不加上述细胞因子。在DC发育过程中,在光镜下连续观察DC生长情况,流式细胞仪(FACS Calibur.BD公司)检测细胞表型。结果 正常体外培养的DC在第四天由贴壁状态变为悬浮毛刺状细胞,随着培养时间的延长,此类细胞数量增多,第八天为形态不规则的毛刺状并聚集成簇,为典型DC形态。FACS显示培养成熟的细胞高表达DC相对特异性标志CD1a,共刺激分子CD80、黏附分子CD54、高表达MHCⅡ类分子,提示DC提高共刺激功能和黏附功能。结论 人脐血经GM-CSF(50ng/ml)+IL-4(10ng/ml)+TNF-α(50ng/ml)体外培养,能诱导出成熟DC。     

广东地区CD36Ⅱ型缺失献血者CD36基因突变类型及其对CD36单核细胞表达的影响分析

目的了解广东地区CD36Ⅱ型缺失人群CD36基因突变类型及其对CD36单核细胞表达量的影响。方法选择本中心2012年6月—2016年6月的广东地区献血者2 300名,采用流式细胞术筛查出CD36Ⅱ型缺失表达者,并借助DNA测序仪对CD36编码序列做测序分析以弄清该人群CD36基因突变类型;运用Graph Pad Prism v5. 0统计分析CD36基因突变对CD36Ⅱ型缺失者单核细胞表达的影响。结果本组广东地区献血者CD36Ⅱ型缺失者比例为0. 96%(22/2 300),CD36Ⅱ型缺失者的CD36编码基因的突变率为27. 27%(6/22),突变基因类型分别为A1163T、1228—1239del ATTGTGCCTATT、198—205del GATCTTTG、C1156T、C268T和C380T。22名CD36Ⅱ型缺失者单核细胞的CD36表达量(平均荧光强度,MFI):6名存在单链基因突变的CD36Ⅱ型缺失者[Mt(+/-)组]与16名无基因突变的CD36Ⅱ型缺失者[Mt(-/-)组]及8名正常CD36表达献血者(WT组)分别为58. 10±7. 57 vs 139. 90±16. 33 vs 141. 80±15. 59(P0. 01)。结论广东地区CD36Ⅱ型缺失献血者中仅部分人存在CD36编码基因的单链基因突变,但突变可影响CD36在其单核细胞的表达量。     

红细胞谱细胞的建立及临床应用

目的 :建立一套能快速鉴定血型抗体特异性的谱红细胞。方法 :挑选O型健康献血员的红细胞 ,应用相关血型系统特异性的抗血清 ,先在微板上进行相关血型抗原分型初筛试验 ,挑选出符合要求的抗原 ,然后用试管法做抗原确证试验。结果 :筛选出 2 2名献血员为谱细胞成员 ,组成每套为 10份的谱细胞 ,包含D、E、Jka、Jkb、Fya、Fyb、Mur等 2 0余种抗原 ,可鉴定出Rh、NM、P、Lewis、Kidd等 8个常见血型系统 2 0余种抗体。谱细胞应用于临床 ,鉴定出各种抗体 33例。结论 :本项研究建立的谱细胞抗原分布合理 ,鉴定抗体能力强 ,适合用于血型不规则抗体筛选及特异性鉴定     

流式细胞血小板交叉配型试验方法的建立

目的建立检测灵敏度更高的流式细胞血小板交叉配型(Flow-XM)的试验方法。方法对104名临床血小板输注>3次的患者作Flow-XM试验,同时采用经典补体依赖微量淋巴细胞毒交叉配型(NIH-CDC)方法作对照,比较2种方法的试验结果。结果血小板阳性检出率,Flow-XM试验为60.58%(63/104),NIH-CDC试验为26.92%(28/104)(P<0.01)。结论 Flow-XM试验具有较高的灵敏度,能够对原始结果全程质控,可使血小板交叉配型技术实现了标准化。