双层共培养模型中缝隙连接在内皮细胞调节平滑肌细胞增殖能力中的作用

目的 探讨在双层共培养体系中缝隙连接在血管内皮细胞(endothelial cell,EC)调节血管平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)增殖能力中的作用.方法 采用植块法分别培养大鼠主动脉内皮及平滑肌细胞,并将2种细胞分别接种至Transwell insert膜的两侧以建立内皮细胞与平滑肌细胞双层共培养模型,并用透射电镜观察2种细胞在Tran-swell insert膜两侧生长情况.用3H-TdR掺入法观察双层共培养模型中平滑肌细胞增殖情况,并观察缝隙连接阻断剂180α-甘草次酸(18α-GA)对平滑肌细胞增殖能力的影响.结果 在共培养第1天,EC/SMC组与SMC/SMC组的平滑肌细胞3H-TdR掺入率无统计学差异[(10 900 ±1 320)cpm/weli vs(10 430±1 200)cpm/well,P>0.05].第2天,EC/SMC组中平滑肌细胞3H-TdR的掺入率有低于SMC/SMC组[(17 200±1 734)cpm/well vs(20 900±1 659)cpm/well]的趋势,但两者差异未达到统计学标准.共培养第3天时,EC/SMC组平滑肌细胞3H-TdR掺入率显著低于SMC/SMC组,两者相比有显著性差异[(25 800±1 984)cpm/well vs(33 070±3 569)cpm/well,P<0.05].在用18α-GA预处理24 h后,EC/SMC共培养3 d后平滑肌细胞3H-TdR的掺入率明显高于同期未处理EC/SMC组,两者相比有显著性差异[(30 500±2 650)cpm/well vs(25 800±1 984)cpm/well,P<0.05].结论 双层共培养模型中内皮细胞通过缝隙连接可抑制血管平滑肌细胞的增殖能力.     

相位角与冠心病PCI患者术前营养状况相关性研究

目的 探讨相位角与冠心病经皮冠状动脉介入(PCI)患者术前营养状况相关性。方法 收集2021年4-7月在该院心内科拟行PCI手术的120例冠心病住院患者为研究对象。术前采用营养风险筛查表(NRS-2002)、一般情况及膳食情况调查问卷行营养评估,测定人体成分,收集相关营养指标及病情指标,分析相位角与相关指标的相关性。结果 相位角与NRS-2002评分、N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)、细胞内外水分比(ECW/TBW)呈负相关(P<0.05),与血红蛋白、BMI、白蛋白、前白蛋白呈正相关(P<0.05)。以NRS-2002评分作为预测患者营养风险标准,相位角在预测患者短期营养风险的特异度为82.5%,灵敏度为93.1%。能量、蛋白质、钾、Vb1、Vb2、镁、钙、锌、硒等摄入不足(P<0.001),脂肪、钠、铁、铜、锰、磷等摄入超量(P<0.001)。结论 冠心病PCI术前应用相位角评估其营养状况有助于精准指导该类患者围术期的营养治疗。     

ALT711干预对高龄大鼠供体内皮祖细胞的活化作用

目的 观察ALT711干预对大鼠骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)活性的影响,探讨ALT711影响年龄导致的EPCs功能改变的可能机制及在细胞移植治疗损伤性血管疾病中的作用.方法 3～4月龄、10～12月龄、18～20月龄3个年龄段大鼠,每个年龄段20只随机分为ALT711喂养组和对照组(n=10),从骨髓获取单个核细胞并进行体外培养、分化.培养7 d后检测各组EPCs迁移、黏附、增殖能力.提取3个年龄段大鼠血清,分为ALT711干预组和对照组培养年轻大鼠骨髓EPCs,培养7d后检测培养的各组EPCs迁移、黏附、增殖能力.结果 随供体大鼠年龄增加,骨髓EPCs迁移[(30.5±2.0) vs (18.8±2.3) vs (12.9±1.6)EPCs/视野(×400),P<0.01]、黏附[(52.2±2.3) vs(31.5±3.3) vs (23.9±2.0)EPCs/视野(×400),P<0.01]、增殖[(0.522±0.031) vs (0.349±0.022) vs (0.272±0.020),P<0.01]能力降低,使用ALT711干预可恢复因供体年龄增加导致的骨髓活性减弱;随供体大鼠年龄增加其血清对培养的年轻供体骨髓EPCs迁移[(26.8±1.8) vs (20.2±1.5) vs (16.0±1.3)EPCs/视野(×400),P<0.01]、黏附[(45.6±2.1) vs (30.1±3.0) vs (22.8±1.6)EPCs/视野(×400),P<0.01]、增殖[(0.466±0.023) vs (0.360±0.019) vs(0.303±0.015),P<0.01]活性具有抑制作用,加入ALT711干预可以拮抗这种效应.结论 EPCs生物学功能随机体年龄增加而减退,ALT711干预可以改善供体增龄导致的EPCs活性减退,拮抗老年供体血清对EPCs活性的负性调节效应.     

小鼠骨髓基质细胞参与缺血组织血管再生及时相关系

目的；探讨体外培养的骨髓基质细胞体内移植后在缺血区新血管生成中的作用及其时相关系。方法：实验选用健康BALB／C小鼠，体质量18～22g，5．6周龄，雌雄各半。分离小鼠胫骨、股骨，用预冷的DMEM／F12培养基冲洗出骨髓。经密度梯度离心分离出骨髓单个核细胞体外培养。体外诱导分化鉴定分离的细胞，建立下肢缺血模型，荧光标记的体外扩增的骨髓基质细胞被移植入左侧缺血组织作为移植组，右侧注射等量培养介质作为对照组，分为移植后第7，14，28天3个观察期(n=6)，冷冻切片荧光显微镜观察，毗邻切片HE及vWF染色，检查荧光阳性细胞与染色阳性细胞的时空关系，并计算移植前后毛细血管密度的变化。结果：体外分离培养的骨髓基质细胞在成内皮细胞供及物存在条件下表达vWF，并分泌一氧化氮。移植后第7天检测到大量幼稚的荧光阳性细胞存活，第14天荧光阳性细胞呈与骨骼肌直径相似的网状分布；移植后28d，移植组毛细胞血管数量【(57&;#177;18)／mm^2]明显高于对照组【(36&;#177;12)／mm^2】(t=3．618，P&;lt;0．05)。结论：体外培养的骨髓基质细胞在体外能够定向分化为血管内皮细胞，移植入体内缺血区能促进缺血区新血管生成，可望用作组织缺血细胞治疗的种子细胞。     

基质细胞衍生因子1α介导小鼠内皮祖细胞修复损伤血管内膜

目的探讨损伤血管局部表达的基质细胞衍生因子1α是否能介导内皮祖细胞参与损伤血管的再内皮化,抑制新生内膜的增生。方法培养、获取小鼠骨髓源性内皮祖细胞,采用改良的Boyden小室测定基质细胞衍生因子1α诱导的内皮祖细胞迁移及AMD3100(CXCR4的拮抗剂)对其的影响。分别将内皮祖细胞培养基、内皮祖细胞及AMD3100孵育过的内皮祖细胞经心脏穿刺注射给颈动脉损伤小鼠,在14天后取损伤血管检测内皮祖细胞募集情况、再内皮化情况及新生内膜增生情况。结果基质细胞衍生因子1α能诱导内皮祖细胞迁移(与对照组比较P<0.01),AMD3100能有效阻断该作用(AMD3100组与对照组比较P>0.05)。较多注射的内皮祖细胞成功归巢到损伤血管处(14.2±3.6个/切片),AMD3100孵育过的内皮祖细胞仅少量可成功归巢(4.0±2.5个/切片);内皮祖细胞注射能加速损伤血管的再内皮化(内皮祖细胞移植组比对照组:83.45%±5.44%比66.46%±6.16%,P<0.01),AMD3100孵育过的内皮祖细胞注射则无效(68.02%±6.68%,与对照组比较P>0.05);内皮祖细胞移植组新生内膜增生厚度(19237±1875μm2)和内膜中膜比值(0.94±0.12)均小于对照组(34676±2412μm2和1.77±0.18)及AMD3100组(32451±2081μm2和1.60±0.17)(P<0.01)。结论基质细胞衍生因子1/CXCR-4在介导移植的内皮祖细胞修复损伤血管内膜中起重要作用。     

高渗和低渗造影剂对大鼠肾动脉内皮功能的影响及意义

目的 探讨不同类型和剂量的造影剂对大鼠肾动脉内皮功能的影响和内皮细胞损伤情况,为造影剂肾病的发生及防治提供研究资料.方法 肾动脉血管环在含不同剂量高渗造影剂泛影葡胺和低渗造影剂碘佛醇的IMDM培养液中孵育1 h,Griess法和放免法分别检测培养液中一氧化氮(nitric oxide, NO)和内皮素(endothelin-1, ET-1)的含量,并用化学发光法检测血管内皮细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)的释放情况.结果 肾动脉血管环在含泛影葡胺和碘佛醇的培养液中孵育1 h后,NO分泌无明显变化,而ET-1分泌增加,且呈剂量依赖性.孵育4 h后,泛影葡胺90 μl/ml组肾动脉内皮LDH释放显著增加;碘佛醇各剂量组引起的LDH释放增加没有统计学意义.结论 高渗造影剂泛影葡胺和低渗造影剂碘佛醇都可以影响肾动脉内皮功能,这一作用可能主要与ET-1分泌增加有关,而NO的分泌没有明显改变.泛影葡胺对肾动脉内皮功能的影响比碘佛醇严重,大剂量的泛影葡胺在一定时间内还可以导致孵育的肾动脉内皮细胞损伤.     

卡维地洛与培哚普利联合干预心梗后心衰对心肌肌浆网Ca~(2+)泵活性和Ca~(2+)释放通道密度的影响

目的 探讨β受体阻滞剂卡维地洛与血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利联合干预心梗后慢性心衰对心肌肌浆网(SR)Ca~(2+)泵活性和Ca~(2+)释放通道(RyR2)密度的影响及意义.方法 通过结扎大鼠左冠脉建立慢性心衰模型,术后1周开始分别给以卡维地洛(6mg·kg~(-1)·d~(-1))、培哚普利(4mg·kg~(-1)·d~(-1))、特拉唑嗪(2mg·kg~(-1)·d~(-1))、卡维地洛(6mg·kg~(-1)·d~(-1))+培哚普利(4mg·kg~(-1)·d~(-1))联合干预9周,观察血流动力学、左室心肌SR Ca~(2+)泵活性和RyR_2密度的变化.结果 与假手术组相比,心衰组左室舒张末压(LVEDP)显著升高(P<0.01),+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)显著降低(P<0.01),左室心肌SR Ca~(2+)泵活性和RyR_2密度显著降低(P<0.01).卡维地洛、培哚普利单独及联合干预均降低LVEDP(P<0.01),升高+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)(P<0.01),并升高左室心肌SR Ca~(2+)泵活性和RyR_2密度(P<0.01),联合干预变化更明显(P<0.01).特拉唑嗪组对上述指标无明显影响(P>0.05).左室心肌sRCa~(2+)泵活性与+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)显著正相关(r=0.596,r=0.684,P<0.01).结论 β受体阻滞剂卡维地洛和血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利长期联合干预心梗后慢性心衰,能够改善血流动力学和心肌SR Ca~(2+)泵活性,增加RyR_2密度,优于任何单一药物干预.

Abstract：

Objective To study the effects of carvedilol combined with perindopril on Ca~(2+) pump activity and the density of Ca~(2+)-release channel ryanodine receptor (RyR2) in the myocardial sarcoplasmic reticulum (SR) in rats with chronic heart failure caused by myocardial infarction. Methods Rat models of chronic heart failure established by left coronary artery ligation were divided into different groups and treated with carvedilol (6 mg·kg~(-1)·d~(-1)), perindopril (4 mg·kg~(-1)·d~(-1)), terazosin (2 mg·kg~(-1) ·d~(-1)), or the combination of carvedilol (6 mg·kg~(-1) ·d~(-1) and perindopril (4 mg·kg~(-1) ·d~(-1) for 9 weeks. Another 12 rats with sham operation served as the sham-operated group. The hemodynamic parameters, activity of SR Ca~(2+) pump, and RyR2 density were determined. Results Compared with shame-operated group, the rats with chronic heart failure showed significantly increased left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP) (P<0.01) and decreased +dP/dtmax, -dp/dtmax, activity of SRCa~(2+)pump and density of RyR2 (P<0.01). Both monotherapies with carvedilol and perindopril attenuated the increment ofLVEDP, and significantly increased+dp/dtmax, -dp/dtmax, activity of SR Ca~(2+) pump and density of RyR2 (P<0.01). Combined treatment even further enhanced the therapeutic effects, whereas terazosin produced no obvious effect. The activity of SR Ca~(2+) pump was strongly correlated to +dp/dtmax and -dp/dtmax (r=0.596 and 0.684, respectively, P<0.01). Conclusion Prolonged treatment with p$-blocker carvedilol in combination with ACE inhibitor perindopril may improve the hemodynamic parameters, enhance Ca~(2+) pump activity and increase the density of RyR2 of myocardial SR more effectively than either monotherapy in preventing and treating chronic heart failure following myocardial infarction.     

急进高原初期自主神经系统功能变化

目的联合采用多种检测方法探讨急进高原初期自主神经系统功能变化。方法99名健康汉族男性青年，分别在平原和空运至海拔3675m西藏高原后2～4d内接受了5min短程心率变异性、冷加压试验、静息心率及血压检测。结果与平原相比，急进西藏高原心率变异性中平均正常RR间期的标准差（SDNN）、相邻RR间期差的均方根（rMSSD）、相差〉50ms的相邻RR间期占RR间期总数的百分比（PNN50）、低频（LF）、高频（HF）、总功率（TP）、低频校正值（LFnu）、高频校正值（HFnu）及分型维数（FD）均显著下降，而LFnu和低频／高频（LF／HF）显著升高；冷加压试验中收缩压和舒张压的升高幅度也显著下降；静息心率显著增快，而收缩压和舒张压无显著变化。结论急进高原初期交感神经和副交感神经活动减弱、调节功能受到广泛抑制，交感神经活动相对占优势。     

妊娠期糖尿病筛查及诊治常规

妊娠期糖尿病（GDM）是妊娠期间首次发现或发生的糖代谢异常。属高危妊娠，对母儿健康均有较大危害。GDM的临床过程较复杂，至今母婴死亡率仍较高。过去对GDM的管理集中在母亲的存活和分娩活婴，如今不仅要考虑妊娠的正常结局，还将给母亲、胎儿建立一个环境，从生命的开始就要有一个高质量的孩子。由于GDM多发病于妊娠中期，初始症状不明显，发现较晚。等到妊娠末期或分娩时才发现，已对母亲和胎儿造成了较大的损害（对胎儿可能造成部分不可逆的损害），失去了最佳治疗时机。因此对GDM的早诊断、早治疗是影响母婴结局的重要手段。而对众多的孕妇人群中如何早期发现GDM显得尤为重要。